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《糖類的毛細(xì)管電泳及芯片毛細(xì)管電泳》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第#&卷第7期色譜UC-V#&ECV7!""#年’月ABLE)?)M9NOE:P9;ABO9Q:F9RO:SBTMW-X!""#!"!!!!!!!"!文獻(xiàn)綜述!"!!!!!!!"!糖類的毛細(xì)管電泳及芯片毛細(xì)管電泳毛秀麗,林炳承(中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所,遼寧大連##6"!%)摘要:糖類化合物在生物體內(nèi)發(fā)揮多方面的作用。糖研究的復(fù)雜性在于其結(jié)構(gòu)的復(fù)雜多變。高效毛細(xì)管電泳作為一種快速、高效的分離分析手段已廣泛應(yīng)用于糖的研究。芯片毛細(xì)管電泳是近幾年來發(fā)展起來的新的分析技術(shù),并已經(jīng)在生命科學(xué)的研究中得到較廣泛的應(yīng)用。就各種糖類化合物的毛細(xì)管電泳的分析策略
2、、檢測條件及糖類化合物的芯片毛細(xì)管電泳進(jìn)行了闡述,共引用文獻(xiàn)78篇。關(guān)鍵詞:毛細(xì)管電泳;芯片毛細(xì)管電泳;糖類化合物中圖分類號:96(8文獻(xiàn)標(biāo)識碼::文章編號:#"""$8’#(%!""#)"7$"%"&$"(泳分析策略以及目前用芯片毛細(xì)管電泳分析糖類的!引言最新進(jìn)展進(jìn)行闡述。糖類化合物是生物體的組成物質(zhì),從細(xì)菌到高"各種糖類化合物的毛細(xì)管電泳分析等動物的機體內(nèi)都含有糖。早在#""年前德國著名的科學(xué)家;,2/<=>就開始對糖進(jìn)行研究。一個世紀(jì)"#!糖類化合物的分離過去了,糖類的研究盡管有了較大的進(jìn)展,但與蛋白"#!#!單糖和聚糖質(zhì)、核酸研究的飛躍式發(fā)展
3、相比較,仍顯得很落后。一般來講簡單的單糖是中性糖,需要將其轉(zhuǎn)化之所以如此,有兩方面的原因,一是糖類的結(jié)構(gòu)比蛋成帶電荷的形式進(jìn)行電泳。由于單糖的5!+值一白質(zhì)和核酸要復(fù)雜得多,對它們的研究受分析、檢測般大于##,故需選用強堿性的緩沖液(5BD##),使技術(shù)的限制難以深入;二是早年發(fā)現(xiàn)的糖類的功能糖基上的羥基去質(zhì)子而帶負(fù)電,直接進(jìn)行電泳分離,比較單調(diào),僅認(rèn)為糖類是提供能量的物質(zhì)。近%"年用紫外(#&(0*)檢測。也可以選用硼酸鹽緩沖液,來,隨著分離、檢測技術(shù)的發(fā)展,糖類化合物再度引硼酸鹽與糖基絡(luò)合形成帶負(fù)電的絡(luò)合物以進(jìn)行電泳起人們的興趣,特別是糖類的代謝
4、產(chǎn)物的分析、糖蛋分離,用紫外檢測。另外,采用紫外或熒光衍生試白中寡糖鏈的結(jié)構(gòu)和功能的研究、糖蛋白的微觀不劑,如!$氨基吡啶、!$氨基喹啉、8$氨基萘$#,%,6$三均一性都有非常重要的意義,因此,以糖類為研究重磺酸(:EF?)等對單糖進(jìn)行標(biāo)記,既可以使糖帶上點的糖工程被認(rèn)為是繼基因工程、蛋白質(zhì)工程后生一定的電荷,也可以增加檢測的靈敏度。物化學(xué)和分子生物學(xué)中重要的研究領(lǐng)域[#]。!""#聚糖包括寡糖和多糖。簡單單糖的分析方法也年《?/,=0/=》(!卷)上發(fā)表的關(guān)于糖類研究的專輯適于簡單寡糖的分析。具體地體現(xiàn)了學(xué)術(shù)界的這一認(rèn)識。多糖一般利用酸解或酶
5、解的方法將其轉(zhuǎn)化為寡各種色譜技術(shù)及傳統(tǒng)電泳技術(shù)均可用于糖的分糖后進(jìn)行分析。BC0G等[’]利用毛細(xì)管凝膠電泳分析[!@7]。對于較復(fù)雜的寡糖,較多采用離子交換色析了用超聲波降解或酶解后的透明質(zhì)酸的片段。多譜脈沖安培檢測,但該法存在分離效率低及非專一糖也可以直接在合適的條件下進(jìn)行電泳,?H=I+022C0性響應(yīng)、需要梯度淋洗等問題,而傳統(tǒng)的電泳則僅能等[8]用毛細(xì)管電泳分析了以%($7$羧基苯甲酰基)$分離少數(shù)帶電荷的寡糖和糖蛋白,存在操作繁瑣、無!$喹啉羧基醛(AJKA:)標(biāo)記的纖維素和肝素,但這法準(zhǔn)確定量及分離效果差等問題。方面的報道不多。毛細(xì)管電
6、泳(A))技術(shù)是!"世紀(jì)8"年代發(fā)展"#!#"復(fù)合多糖起來的一種新的分離手段。將A)最早應(yīng)用于糖的糖蛋白及其糖型:糖蛋白是糖鏈與蛋白質(zhì)通過分析是BC04+研究小組于#&8&年提出的。A)所共價鍵連接形成的化合物,其連接方式有兩種,一種具有的高分離能力、高靈敏度、快速和簡便等特點,是糖鏈和天冬氨酸連接,稱為E$連接糖蛋白;另一在糖的分析中已顯示出它的優(yōu)越性。我們也曾分別種是糖鏈和絲氨酸或蘇氨酸連接,稱為9$連接糖蛋就糖類毛細(xì)管電泳的分析原理、檢測和糖蛋白的分白。糖蛋白的毛細(xì)管電泳分析方法有兩種,一種析作了綜述[(,6]。本文就糖類化合物的毛細(xì)管電是用酶
7、解或酸解的方法將糖鏈從糖復(fù)合物上解離下收稿日期:!""#$"#$"%基金項目:國家自然科學(xué)面上基金(!&&’("%")、重點基金(!""%("#")資助項目,中國科學(xué)院“寡糖工程”知識創(chuàng)新資助項目作者簡介:毛秀麗(#&’’$),女,碩士研究生。通訊聯(lián)系人:林炳承,研究員,博士生導(dǎo)師,)$*+,-:./-,01*234,/53+/3/0?!#.·色譜第#!卷來,對其糖鏈進(jìn)行電泳[!"##];另一種是分析糖蛋白經(jīng)節(jié)苷脂進(jìn)行分析。@+L3M+N等[#!,5.]不僅采用乙腈的糖肽?;颦h(huán)糊精作緩沖液添加劑對神經(jīng)節(jié)苷脂的G%氨基將糖鏈從糖蛋白上解離后得到的是糖
8、與肽的混萘%#,A%二磺酸(O$HP)衍生物進(jìn)行分析,還用同樣合物,肽鏈可以用乙醇沉淀法或凝膠排阻色譜除去,