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《食品免疫學(xué) 6抗原和抗體的制備》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.第六章單克隆抗體的制備和應(yīng)用GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.本章內(nèi)容第一節(jié)單克隆抗體的概念和基本原理第一節(jié)單克隆抗體的概念和基本原理第二節(jié)單克隆抗體制備的主要步驟第二節(jié)單克隆抗體制備的主要步驟Generated
2、byFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.NielsK.JerneGeorgesJ.F.K?hlerCésarMilsteinGeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.克隆(Clone)又名無性繁殖系,指由一個祖先細(xì)胞經(jīng)分化、增殖所產(chǎn)生的遺傳性狀完全相同的細(xì)胞群Generated
3、byFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.多克隆抗體(Polyclonalantibody,pAb)用包含多種抗原決定基的抗原物質(zhì)免疫動物,從而刺激多個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體的總和,稱為多克隆抗體單克隆抗體(MonoclonalAntibody,mAb)由一個雜交瘤細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的,針對單一抗原決定簇的抗體,稱為單克隆抗體GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSo
4、ftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)單特異性和均一性無限供應(yīng)用混合的抗原制備出識別一個抗原決定簇的抗體GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.BB淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)的基本原理骨髓瘤細(xì)胞B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.fo
5、xitsoftware.comForevaluationonly.雜交細(xì)胞(hybridcell)在外界某些條件干預(yù)下(如PEG、電穿孔),當(dāng)兩個細(xì)胞緊密地接觸的時候,其細(xì)胞膜可能發(fā)生融合,產(chǎn)生具有原來兩個細(xì)胞染色體/基因的單個細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.雜交瘤細(xì)胞(Hybridomas)若用一種腫瘤細(xì)胞與另一種體細(xì)胞(如淋巴細(xì)胞)融合,所形成的雜交細(xì)胞稱為
6、雜交瘤細(xì)胞,簡稱雜交瘤。其既具有腫瘤細(xì)胞無限增殖的能力,也具有淋巴細(xì)胞的一些特性B淋巴細(xì)胞雜交瘤骨髓瘤細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合所產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.第二節(jié)單克隆抗體制備的主要步驟第二節(jié)單克隆抗體制備的主要步驟抗原制備免疫動物骨髓瘤細(xì)胞及飼養(yǎng)細(xì)胞的制備細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的篩選及克隆化單克隆抗體的鑒定單克隆抗體的制備GeneratedbyF
7、oxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.一、抗一、抗原原顆粒性抗原:細(xì)胞、細(xì)菌和病毒等,一般具有較強(qiáng)的免疫原性,可不加佐劑。例如,直接腹腔注射1~2×107個細(xì)胞??扇苄钥乖嚎扇苄钥乖膩碓粗饕翘烊患兓?,或者用目的基因在原核或真核細(xì)胞內(nèi)表
8、達(dá)??扇苄钥乖枧c弗氏完全或不完全佐劑混勻,進(jìn)行免疫。GeneratedbyFoxitPDFCreator?FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.二、免疫動物免疫目的:BB淋巴細(xì)胞在目的抗原刺激下增殖、分化,形成能分泌特異性抗體的BB淋巴細(xì)胞,有利于細(xì)胞融合形成分泌