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1、植物生理學(xué)通訊第40卷第2期，2004年4月215技術(shù)與方法TechniquesandMethods一種用透明膠帶粘取葉片表皮觀察氣孔的方法1,2,231陳佰鴻李新生曹孜義姚慶榮132甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝系，農(nóng)學(xué)院，蘭州730070;陜西理工學(xué)院陜西省資源生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，漢中723001AMethodforObservingStomabyTransparentGummedTapetoTearEpider-misfromLeaf1,2,231CHENBai-Hong,LIXin-Sheng,CAOZi-Yi,YAOQing-Rong132Depar
2、tmentofHorticulture,CollegeofAgronomy,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070;Bio-ResourcesKeyLabo-ratoryofShaanxiProvince,ShaanxiCollegeofScienceandEngineering,Hanzhong723001提要用普通塑料透明膠帶粘取葉片下表皮觀察植物的氣孔，比印跡法和撕取下表皮觀察氣孔的方法具有操作簡單、速度快、真實(shí)性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，尤其適宜于試管苗等幼嫩材料的氣孔變化動態(tài)和形態(tài)學(xué)指標(biāo)的研究。此法可以防
3、止因保衛(wèi)細(xì)胞失水而導(dǎo)致氣孔開張度的變化，能真實(shí)地觀察植物不同階段和時(shí)期氣孔的變化動態(tài)。關(guān)鍵詞透明塑料膠帶；下表皮；氣孔；印跡法氣孔是植物葉片進(jìn)行氣體交換的窗口，氣孔cm，膠面朝上，平放在實(shí)驗(yàn)臺面上。帶葉柄剪的形態(tài)特征和行為動態(tài)是植物光合生理和水分生理取植物葉片，用濾紙迅速吸干表面水分。左手捏[1~4]研究的一個(gè)重要方面。氣孔形態(tài)觀察和氣孔運(yùn)住葉柄，將葉片正面粘在膠帶上。在粘貼過程動及其影響因素是植物學(xué)和植物生理學(xué)兩門課程的中，先將葉尖粘貼在膠帶上，然后將葉片向葉背重要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。植物氣孔觀察一般采用滲入法、面彎曲，逐漸向前推移，使葉片正面與膠帶
4、充分[5~7]印跡法、固定法和電鏡掃描法。這些方法都接觸。為了防止粘貼過程中葉片皺縮，應(yīng)右手持不同程度地存在操作難度大、程序復(fù)雜、效率解剖針，置于葉片與膠帶之間進(jìn)行調(diào)整，使葉片低、使用藥劑多和儀器要求較高等缺點(diǎn)，從而影平整地粘貼在膠帶上。然后剪去葉柄。將膠帶對響了氣孔的研究和教學(xué)。因此，探索一種用材簡折過來平整地粘貼在葉片的背面。然后用手指對單、操作方便、真實(shí)性強(qiáng)的制片技術(shù)，是教學(xué)捏膠帶，使膠帶與葉片的兩面充分粘著。將對折和科研中亟待解決的問題。本文在全面分析和總的膠帶撕開，葉片的正面仍緊密粘貼在膠帶上，結(jié)以上實(shí)驗(yàn)方法不足之處的基礎(chǔ)上，探索出
5、了用葉片的背面與膠帶分離，并將葉片下表皮粘貼在透明塑料膠帶粘取植物葉片下表皮觀察氣孔的方膠帶上。若葉面附著物較多，膠帶不能與表皮緊法，以期能有助于教學(xué)和科研工作。密粘著時(shí)，可用膠帶連續(xù)重復(fù)粘貼葉片，直到粘去附著物后，粘取下表皮。為了防止粘取的表皮材料與方法材料相互重疊，在連續(xù)重復(fù)粘貼時(shí)，應(yīng)更換膠帶1試驗(yàn)材料新的部位粘著表皮。將帶葉片下表皮的膠帶沿表塑料透明膠帶為普通型膠帶，寬度為18皮輪廓剪成3～5mm×3～5mm的矩形片。在載mm，厚度為0.05mm。玻片上滴2滴蒸餾水、1滴1%的碘-碘化鉀染液，植物材料為葡萄、草莓、珠美海棠、香石將帶葉片
6、表皮的膠帶膠面向下放在載玻片上染竹試管苗，葡萄、珠美海棠組培苗的砂培馴化苗色0.5～1min,蓋上蓋玻片，壓平后鏡檢。由于(40d)和一至二年生田間移栽苗，甜瓜、番茄田間定植苗的葉片。2觀察氣孔的方法收稿2003-08-12修定2003-11-242.1透明膠帶粘取法塑料透明膠帶拉開10～15E-mail:bhch@263.net,Tel:0931-7632208216植物生理學(xué)通訊第40卷第2期，2004年4月2透明膠帶粘貼在載玻片上，在顯微鏡下觀察時(shí)，面積約3mm的下表皮，需要10～15min；而可帶蓋玻片觀察，也可將蓋玻片取掉后觀察，材
7、用火棉膠印跡法，雖然能一次取得整個(gè)葉片的下料不會移動。表皮印跡，但從涂膠到膠干制片一般需要8～102.2火棉膠印跡法用毛筆蘸火棉膠溶液少許涂抹min，而且膠的濃度和厚度直接影響壓片的質(zhì)量和在葉片背面，干燥后用小鑷子將膜取下，放在載觀察效果。用透明塑料膠帶粘取葉片下表皮，一玻片上，加1滴蒸餾水制片。火棉膠溶液的成分般只需1～2min即可粘取大量表皮，粘貼在膠帶為：40g火棉膠、75mL乙醚、250mL無水乙上的表皮被葉脈分割成大小不等的不規(guī)則小塊，2醇。面積一般在3～34mm，可以一次制作多個(gè)壓片2.3撕取下表皮法用小鑷子直接撕取葉片的下表(圖
8、1、表1)。皮制片。染色方法同前。3氣孔的觀察與測量剪取試管苗中部葉片制片，用Motic數(shù)碼顯微鏡在40×物鏡下觀察拍照。每種方法的制片各拍攝30張，用MoticI
