變應性鼻炎患者鼻黏膜SEB和TIM4的表達及其相關性研究.pdf

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1、廣東醫(yī)學2015年3月第36卷第5期GuangdongMedicalJournalMar.2015.Vo1.36.No.5·7】7·變應性鼻炎患者鼻黏膜SEB和TIM4的表達及其相關性研究術周才杰,趙梅珍,邱書奇,楊平常,胡田勇,高晗廣東省深圳市龍崗中心醫(yī)院耳鼻咽喉科醫(yī)院、深圳市耳鼻咽喉研究所(518172);加拿大麥克馬斯特大學病理與分子醫(yī)學系【摘要】目的觀察葡萄球菌腸毒素B(SEB)和T細胞免疫球蛋白粘蛋白4(TIM4)在變應性鼻炎患者鼻黏膜中的表達,并探討其相關性。方法收集24例過敏性鼻炎(AR)患者和22例非AR患者手術切除的鼻黏膜標本。從手術切除的鼻黏膜中分離單核細胞并進行流式分析。

2、采用ELISA、qRT—PCR和Westernblot檢測AR患者鼻黏膜中SEB和TIM4水平。結(jié)果在AR患者的鼻黏膜中檢測到了大量的B細胞,同時表達高水平的TIM4和共刺激分子。在AR鼻黏膜檢測到高水平的SEB。加SEB培養(yǎng)時,SEB能介導鼻黏膜B細胞TIM4的表達。SEB水平和TIM4B細胞頻率呈正相關(r=0.596,P<0.05)。結(jié)論AR鼻黏膜中SEB和TIM4表達升高;接觸SEB能介導幼稚B細胞表達TIM4和共刺激分子。TIM4CD19B細胞可能成為治療AR的潛在靶點。【關鍵詞】過敏;鼻黏膜;鼻炎;金黃色葡萄球菌腸毒素B;T細胞免疫球蛋白粘蛋白4變應性鼻炎(allergicrhin

3、itis,AR)是IgE介導的I在手術前至少2周未使用任何抗原藥物。非AR組患型變態(tài)反應,以發(fā)作性鼻癢、陣發(fā)性噴嚏、大量清水樣者包括患有慢性鼻甲肥大伴或不伴鼻竇炎,但無AR鼻涕和鼻塞為主要特征?。據(jù)統(tǒng)計其全球性的發(fā)病率癥狀(所有陰性對照組皮膚抗原試驗陰性,檢測不到血約為25%~35%,部分地區(qū)可高達44.2%;我國的清抗原特異性IgE/IgG1、鼻黏膜提取物主要基本蛋白發(fā)病率高達11%。近年來AR發(fā)病率呈現(xiàn)持續(xù)上升MBP和類胰蛋白酶)。所有患者都部分伴有下鼻甲肥趨勢,嚴重影響患者的生活質(zhì)量,已經(jīng)成為影響人類健大病史??档娜蛐詥栴}。一系列研究已經(jīng)證實葡萄球菌腸毒表1患者一般資料±5素B(sta

4、phylococcalenterotoxinB,SEB)與氣道變態(tài)反應有關,位于上皮下層的樹突細胞能經(jīng)Toll樣受體識別SEB。SEB作用后的樹突細胞能產(chǎn)生T細胞免疫球蛋白粘蛋白域分子4(Tcellimmunoglobulinmucindomainmolecule,TIM4)?,而后者與原始CD4T細胞上的TIM1結(jié)合,促使它們向Th2細胞分化”。由于未成熟B細胞有類似的抗原提呈作用,我們假定SEB能夠介導B細胞產(chǎn)生TIM4;然后驅(qū)使幼稚T細胞變成Th2細胞,進一步介導偏Th2細胞極化。在此研究中,我們在鼻過敏患者鼻黏膜中觀察到大量CD19B細胞和高水平的SEB。接觸SEB能介導幼稚B細胞表達

5、TIM4和共刺激分子。1資料與方法1.1一般資料本研究選取患有下鼻甲肥大伴隨或不伴隨過敏性鼻炎的患者。AR的診斷標準參照文獻報道。所有患者都有長期鼻塞癥狀,各種療法均未表2患者皮膚抗原檢測結(jié)果例(%)取得滿意的效果而要求手術治療,無手術史。患者一過敏原陽性過敏原陽性般資料見表1。皮膚抗原檢測結(jié)果見表2。所有患者塵螨24(100.0)草花粉12(50.0)貓毛屑8(33.3)豚草9(37.5)廣東省醫(yī)學科研基金立項項目(編號:A2013610),廣東省深圳狗毛屑6(25.0)蟑螂8(33.3)市衛(wèi)生計生系統(tǒng)科研立項項目(編號:201401097),廣東省深圳市龍崗區(qū)科技計劃醫(yī)療衛(wèi)生項目(編號:Y

6、S2013059)1.2試劑SEB、TIM1和TIM4抗體(SantaCruz,△通信作者。胡田勇:E—mail:guyue54guyue@163.com;高晗:E—CA),CD19、CD38、CD80和CD86熒光標記抗體(BD,mail:haohan1992@163.corn上海)。RNA提取試劑盒,cDNA合成試劑盒,PCR試廣東醫(yī)學2015年3月第36卷第5期GuangdongMedicalJourn~Mar.2015,Vo1.36,No.5劑盒(凱捷,上海)。SEBELISA試劑盒(R&D,上海),因的目標值歸一化處理。TIM4的引物為:正義:5r_免疫細胞分離試劑盒(Auburn,

7、CA)。鱟試驗檢測內(nèi)毒GAAACTGTCCTCCCCAGTGA一3;反義:5一CCAG—素(LimulusamebocytelysateQCL1000。BioWhittaker,GCTGAGGAGAAGACAC一3(NCBI:NM一138379;startWalkersville,MD,USA)。試劑盒含量<0.2U內(nèi)毒素/code:742;endcode:899;size:158bp)。10g。

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