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《雙抗體夾心ELISA法測定豬α-干擾素的濃度.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、浙江農(nóng)業(yè)學報ActaAgriculturaeZhefiangensis，2015，27(5)：740—745http：／／www．~nyxb．en蔣佳穎，王一成，楊孝樸，等．雙抗體夾心ELISA法測定豬僅．干擾素的濃度[J]．浙江農(nóng)業(yè)學報，2015，27(5)：740—745．DOI：10．3969／j．issn．1004—1524．2015．05．06雙抗體夾心ELISA法測定豬lt-干擾素的濃度蔣佳穎，王一成，，楊孝樸，袁秀芳，李軍星，徐麗華(甘肅農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，甘肅蘭州730070；浙江省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸
2、醫(yī)研究所，浙江杭州310021)摘要：為了能夠準確測定豬血清中豬一干擾素(PoIFN—)含量及豬一干擾素制品的濃度，本研究以制備并經(jīng)過親和層析提純的兔抗豬一干擾素IgG多克隆抗體為包被抗體，以制備的鼠抗豬．干擾素單克隆純化抗體作為二抗，建立了測定豬o【一干擾素濃度的雙抗體夾心ELISA法(DAS—ELISA)。通過條件優(yōu)化，最佳兔抗豬一干擾素IgG多克隆純化抗體包被濃度為12．5Ixg·mL。。，最佳鼠抗豬0【一干擾素單克隆純化抗體作用濃度為6．25txg·mL～，利用本實驗室制備的已知濃度豬0【一干擾素標準蛋白建
3、立標準曲線，確定該方法檢測豬僅。干擾素濃度范圍為0．0781—2．50txg·mL‘。。與Lowry法、凍干稱量法測定豬0【一干擾素濃度相比較，3種方法檢測結(jié)果無顯著差異，但所建立的雙抗體夾心ELISA法能夠檢測血清中豬0【．干擾素濃度，且方法簡便。關鍵詞：豬Ot一干擾素；雙抗體夾心ELISA；定量檢測中圖分類號：S852．4；Q816文獻標志碼：A文章編號：1004—1524(2015)05-0740-06DevelopmentofdoubleantibodysandwichELISAfordetermining
4、theconcentrationofpor—cinea-interferon(PoIFN-)JIANGJia—ying，WANGYi—cheng'，YANGXiao—pu’，YUANXiu—fang，LIJun．xing，XULi—hua(AnimalVeterinaryCollege，GansuAgriculturalUniversity，Lanzhou730070，China；eAnimalHta~bandryandVeterinaryInstitute，Zh~jiangAcademyofAgricultura
5、lSciences，Hangzhou310021，China)Abstract：Inordertoaccuratelymeasuretheconcentrationofporcine0【一interferon(PoIFN一僅)inswinesei31mandPoIFN一儀product．DoubleantibodysandwichELISA(DAS-ELISA)methodwasdevelopedbyusingpurifiedrabbitantiPolFN一0【IgGascaptureantibody．a(chǎn)ndpur
6、ifiedmouseantiPoIFN一ⅡIgGasdetectionantibody．TheresultindicatedthatthebestpackageconcentrationofrabbitantiporcinePoIFN一0【IgGwas12．5恤g·mL～，andmouseantiPoIFN—dIgGwas6．25txg·mL～．ThedetectionrangeoftheDAS-ELISAwasbetween0．078l一2．50vg·mLbystandardCHIVeestablishedusi
7、ngtheknownconcentrationofstandardproteinofPoIFN一0【．Comparedwiththelowrymethodandfreeze—dryingweighingmethod，therewasnosignificantdifferencebetweenthethreemethods．AndthisestablishedDAS—ELISAmethodwassimpleandcoulddetectconcentrationofPoIFN·0【inselql／n．Keywords：
8、porcineOt—interferon；doubleantibodysandwichELISA；quantitativedetermination干擾素(Interferon)是一類具有廣譜抗病毒組的調(diào)節(jié)和控制，而且與細胞RNA及蛋白質(zhì)的活性的蛋白質(zhì)，其活性的發(fā)揮主要受到細胞基因合成有關，是一種具有抗病毒、調(diào)節(jié)機體免疫功收稿日期：2014．10-2l基金項
