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《對(duì)蝦白斑綜合癥病毒雙抗體夾心ELISA方法的建立.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、中國(guó)動(dòng)物檢疫2012年第29卷第4期—4l一對(duì)蝦白斑綜合癥病毒雙抗體夾心ELISA方法的建立鄭曉聰，劉葒，張朋，何俊強(qiáng)，史秀杰，賈鵬，蘭文升(1．深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心，廣東深圳518045；2．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，湖北武漢430070)摘要：用將純化的對(duì)蝦白斑綜合癥病毒VP28蛋白免疫BALB／c小鼠，分離免疫鼠脾細(xì)胞，與SP2／0~I胞融合，經(jīng)間接ELISA,)~選，得到了2~g(2G9，3E5)可以穩(wěn)定分泌抗對(duì)蝦白斑綜合癥病毒特異性單抗的雜交瘤細(xì)胞株。用純化的VP28蛋白免疫家兔，按常規(guī)方法制備多抗。選用單抗(3E5)包被ELISA板
2、，用兔多抗作為捕獲抗體，建立了對(duì)蝦白斑綜合癥病毒的雙抗體夾一,~ELISA檢測(cè)方法。該方法具有良好的特異性和敏感性，為對(duì)蝦白斑綜合癥病毒的檢測(cè)提供了有效工具。關(guān)鍵詞：對(duì)蝦白斑綜合癥病毒；VP28蛋白；單克隆抗體；ELISA中圖分類號(hào)：$945．46文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1005—944X(2012)04—0041—03DevelopmentofDoubleAntibodySandwichELISAforDetectionofWhiteSpotSyndromeVirusZhengXiaocong，LiuHong，ZhangPeng，HeJunqiang，ShiX
3、iujie1,JiaPeng，LanWensheng(1．TechnicCentreofAnimalandPlantInspectionandQuarantine，ShenzhenEntry&ExitInspectionandQuarantineBureau，Shenzhen518045，China；2．CollegeofFisheries，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070，China)Abstract：SPFBALB／cmicewereimmunizedwithpurifiedVP28proteinofwhi
4、tespotsyndromevirus(WSSV)emulsifiedwithFreund’Sadiuvant．ThespleeneellisolatedfromvaccinatedmicewerefusedwithSP2／0cells．Twohybridomaof2G9and3E5，screenedusingELISA，couldsecretestablyspecificantibodiestoVP28proteinofWSSVAdoubleantibodysandwichELISA(DAS-ELISA)fordetectionofWSSVwasestabli
5、shedbasedonmonoclonalantibody(3E5)andrabbit．a(chǎn)nti—VP28polyclonalantibody．TheresultshowedthattheDAS-ELISAhadgoodspecificityandsensitivity，indicatingthatthemethodwassuitableforrapiddetectionandepidemiologicalinvestigationofWSSVinfectioninshrimps．Keywords：whitespotsyndromevirus；VP28prote
6、in；monoclonalantibody：doubleantibodysandwich；ELISA對(duì)蝦白斑綜合癥(WhiteSpotSyndrome，WSS)是蛋白VP28由本實(shí)驗(yàn)表達(dá)純化。BALB／cd~鼠和家由對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WhiteSpotSyndromeVirus，兔購(gòu)于廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。SP2／0細(xì)胞系由本實(shí)WSSV)引起的一種對(duì)蝦暴發(fā)性傳染病。該病毒以其宿驗(yàn)室保存。主范圍廣、毒力強(qiáng)、致死亡率高、傳播速度快等特點(diǎn)，給對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)，傳染性肌肉壞全世界的對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。由于缺乏敏死病毒(Infectiousmyo
7、necrosisvirus，IMNV)、桃拉感的對(duì)蝦細(xì)胞系，關(guān)于該病毒的侵入機(jī)制以及在蝦體綜合癥病毒(Taurasyndromevirus，TSV)、傳染性皮內(nèi)的復(fù)制、裝配機(jī)理等方面的研究進(jìn)展緩慢，然而在結(jié)下和造血器官壞死病毒(Infectioushypodermaland構(gòu)蛋白的解析方面進(jìn)展迅速，用蛋白質(zhì)組學(xué)和相關(guān)技haematopoieticnecrosisvirus，IHHNV)、鯉春血癥病術(shù)鑒定了至少58種結(jié)構(gòu)蛋白，至少7種囊膜蛋白與病毒毒(Springviraemiaofcarpvirus，svcv)、病毒性出血的侵染過(guò)程相關(guān)【l之】。VP28是WSS
8、V最主要囊膜蛋白之性敗學(xué)
