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《犬瘟熱病毒單抗夾心ELISA檢測方法的建立.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第32卷第4期揚州大學(xué)學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版)V?l.32N?.42011年12月J????al??f?Ya?g?h???U?i?e??i??(Ag?ic?l???al?a?d?Life?Scie?ce?Edi?i??)Dec.2011犬瘟熱病毒單抗夾心ELISA檢測方法的建立張?鴻1?胡傳莉2?賀生中1?李?玲1?朱善元1?翟曉虎1(1.江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院?江蘇泰州225300?2.江蘇省東?？h畜牧獸醫(yī)站?江蘇東海222300)摘?要?以2株犬瘟熱病毒(CDV)特異性單克隆抗體2H11和1G7為基礎(chǔ)建立了檢測CDV的單抗夾心ELISA方法?用單抗2H11作
2、為捕獲抗體?以辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的單抗1G7為檢測抗體?通過方陣試驗確定2H11和1G7--1?建立的單抗夾心ELISA方法具有良好的特異性?與純化的犬細(xì)小HRP的最佳工作濃度分別為200和475?g?mL病毒(CPV)無交叉反應(yīng)?對純化的CDV最小檢出濃度為0.01?mL-1?采集經(jīng)CDV抗原快速檢測試紙條檢測為陽?g性的40份疑似感染犬樣品和檢測為陰性的18份對照犬樣品?分別用單抗夾心ELISA法和套式PCR法(N-PCR)進(jìn)行同步檢測?結(jié)果表明?單抗夾心ELISA法敏感性接近于N-PCR法?兩種方法的符合率為85%?關(guān)鍵詞?犬瘟熱病毒?雙抗體夾心E
3、LISA?單克隆抗體中圖分類號?S?855.3?????文獻(xiàn)標(biāo)志碼?A?????文章編號?1671-4652(2011)04-0015-04E??ab????????????a??a?d??c??ELISA?????d???c????????ca????d???????????????ba??d????????c???a??a???b?d???1?HU?C??a?-???HE?S????-?????1?LI?L???1?ZHU?S?a?-??a?1?ZHAI?X?a?-??1ZHANG?H???(1.J???????A????H????????V???C????T
4、ai?h???225300?Chi?a?2.D???????A????H???????V???S???D??ghai?222300?Chi?a)ABSTRACT?A??a?d?ich?ELISA?ba?ed????m???cl??al?a??ib?die?(mAb)f????a?id?diag???i???f?ca?i?e?di??em?e???i???(CDV)?a??e??abli?hed.The?ELISA??a????a?da?di?ed?b???ai?-ma?chi?g?e??e?ime???a?d??he????ki?g?c??ce???a?i????
5、?f?he?mAb?2H11a?d?HRP-c??j?ga?ed?mAb?1G7?e?e?200a?d?475?g?mL-1??e??ec?i?el?.The?e??a?????c??????eac?i?i???i?h?ca?i?e??a????i???(CPV)a?d??he?mi?im?m?de?ec?i???limi???a??0.01?g?mL-1??f????ified?CDV?a??ige??b???he?e??ab-li?hed?ELISA.40???i?i?e??am?le??a?d?18?ega?i?e??am?le??de?ec?ed?b???
6、?lid??ha?e?ch??ma??g?a?hic?imm???a??a???e?e?e??ed??i?h?ELISA?a?d??e??ed-PCR(N-PCR).The??e??l????h??ed??ha???he??e??i?i?i????f?ELISA??a???imila?????N-PCR??i?h?85%ag?eeme????f??he?????me?h?d?.KEY?WORDS?ca?i?e?di??em?e???i?????a?d?ich?ELISA?m???cl??al?a??ib?d?犬瘟熱是由犬瘟熱病毒(CDV)引起的一種犬類高度接觸性傳
7、染病?臨床癥狀以雙相熱?皮疹?白細(xì)胞減少?胃腸炎?結(jié)膜炎及神經(jīng)癥狀為特征?可導(dǎo)致高發(fā)病率和病死率?對犬?貂?狐等動物的危害很?1??2??3?大?目前?檢測CDV的方法包括病毒分離與鑒定?反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)?熒光抗體?4??酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)?5-7??8?技術(shù)和膠體金免疫層析技術(shù)等?其中ELISA具有敏感性高?特異?5-7?9-11?性強(qiáng)?操作簡便和能夠定量測定等優(yōu)點?本研究在前期制備抗CDV單克隆抗體的基礎(chǔ)上?建立了CDV單抗夾心ELISA檢測方法?以滿足犬瘟熱臨床診斷的需要?1?材料與方法1.1?試驗材料CDV?O?de???e
8、?????
