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《虎杖中白藜蘆醇誘導(dǎo)肝癌細胞HepG-2凋亡及其對Bcl-2和Bax蛋白表達的影響.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第2O卷第15期中國實驗方劑學(xué)雜志V01.20.No.152014年8月ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeAug..2O14虎杖中白藜蘆醇誘導(dǎo)肝癌細胞HepG一2凋亡及其對Bcl一2和Bax蛋白表達的影響顧生玖,李關(guān)波,朱開梅(桂林醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院,廣西桂林541004)[摘要]目的:探討虎杖白藜蘆醇對人肝癌HepG一2細胞增殖和凋亡。方法:采用微波輔助法提取虎杖中白藜蘆醇,取對數(shù)生長期人肝癌HepG一2細胞,隨機分為藥物組和對照
2、組,藥物組用12.5,25,50,100Ixmol·L。。不同質(zhì)量濃度的白藜蘆醇作用人肝癌HepG一2細胞24,48,72h后,采用MTT法檢測虎杖白藜蘆醇對人肝癌HepG一2細胞生長抑制作用;Hoechst33342染色法熒光顯微鏡觀察細胞的形態(tài)學(xué)變化,Westernblot法檢測不同濃度白藜蘆醇作用HepG一2細胞48h后B細胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)蛋白和Bcl一2相關(guān)蛋白(Bax)的表達。結(jié)果:MTT實驗結(jié)果表明,不同濃度白藜蘆醇對人肝癌HepG-2的生長具有顯著的抑制作用,呈現(xiàn)時間依
3、賴性和劑量依賴性,當(dāng)白藜蘆醇質(zhì)量濃度達到50,100I~mol·L時,其對HepG一2細胞增殖抑制作用明顯增強,與對照組相比,差異具有顯著(P<0.01);熒光染色觀察隨著藥物濃度增加,細胞凋亡數(shù)量增多,當(dāng)50,100mol·l白藜蘆醇作用于人肝癌HepG一2細胞48h可出現(xiàn)典型凋亡小體。Westernblot法檢測結(jié)果顯示:隨著自藜蘆醇濃度的增加Bcl一2蛋白的表達逐漸降低,Bax蛋白的表達逐漸增加。結(jié)論:虎杖中自藜蘆醇可以有效地抑制人肝癌HepG一2細胞增殖,誘導(dǎo)細胞掏亡,其誘導(dǎo)該細胞凋亡的作用
4、機制可能是通過下調(diào)Bcl一2蛋白和上調(diào)Bax蛋白的表達。[關(guān)鍵詞]虎杖白藜蘆醇;肝癌HepG一2細胞;細胞凋亡;Bcl一2;Bax[中圖分類號]R285.5[文獻標識碼]A[文章編號]1005—9903(2014)15—0168—05[doi]i0.13422/j.cnki.syfjx.2014150168ApoptosisofHepG·2CellInducedbyResveratrolandItsEffectsonExpressionsofProteinsBcl-2andBaxGUSheng-ji
5、u,LIMei—bo,ZHUKai—mei(CollegeofPharmacy,GuilinMedicalUniversity,Guilin541004,China)[Abstract]Objective:Todiscusstheeffectsofresveratrolonthegrowthandcellapoptosisofhumanhepatoblastoma—derivedHepG一2cellline.Method:Theresveratrolwasextractedbymicrowave—a
6、ssistedmethodandHepG一2cellswereexposedtoresveratrolatthedifferentconcentrations.ThehepatoeellularcarcinomaHepG一2cellsinlogarithmicphaseofgrowthwererandomlydividedintodruggroupandcontrolgroup,withtheconcentrationof12.5,25,50,100p~mol·L~resveratrolinhepa
7、tocellularcarcinomaHepG一2cells.Interventiondurationswere24,48,72haccordingly.TheviabilityofHepG·2cellswasmeasuredbyMTT.Morphoto!ogyofcellapoptosiswasobservedbyHoeschst33342fluorescencestainingandfluorescent.TheproteinexpressionofBcl一2andBaxwasanalyzedb
8、ywesternblot.Result:Resveratrolinhibitedthegrowthofcellsandcausedapoptosissignificantly.Thesuppressionwasbothinatime—anddose—dependentmanner.TheresultofMTTshowedthat,at50,100v.mol·Lcouldinhibitthecellproliferationobviouslycomparedwithco