兩種方法檢測人類免疫缺陷病毒抗體結(jié)果比較.doc

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1、兩種方法檢測人類免疫缺陷病毒抗體結(jié)果比較朱武軍(貴州省貴陽市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科550005)【摘要】目的比較化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測人類免疫缺陷病毒抗體(抗一HIV)的一致性。方法收集45份室間質(zhì)評樣本，分別用兩種方法進(jìn)行檢測。結(jié)果化學(xué)發(fā)光法檢測樣本的吸光度／臨界值比值明顯高于ELISA法，兩種方法對抗HIV檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Y2—25．002，P

2、446．61；R512．91文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B文章編號：1672—9455(2009)06—0455—02艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合征，是由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的嚴(yán)重疾病，迄今仍無法有效治療，除了行為干預(yù)等社會學(xué)手段外，阻斷輸血傳播，及時發(fā)現(xiàn)HIV感染者并采取針對性措施，是目前疫情控制的重要技術(shù)手段。由于HIV進(jìn)入人體后需要經(jīng)過一段時間才會產(chǎn)生HIV抗體(抗一HIV)，這一時間醫(yī)學(xué)上稱為“窗口期”。艾滋病研究的重點(diǎn)領(lǐng)域之一就是盡可能縮短“窗口期”，而達(dá)到這一目的最重要的手段就是高質(zhì)量的艾滋病診斷試劑盒和敏感性高的檢測方法?；瘜W(xué)發(fā)光標(biāo)記方法

3、是近年來發(fā)展起來的一種新的非放射性免疫分析技術(shù)。為比較化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測抗一HIV的一致性，本文對同一份標(biāo)本采取兩種方法進(jìn)行檢測，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。1材料與方法1．1標(biāo)本來源所有標(biāo)本均來自貴州省臨床檢驗(yàn)中心2006～2008年全省室間質(zhì)評樣本，一20℃以下保存。1．2儀器化學(xué)發(fā)光儀KPS-KM(北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn))；酶標(biāo)儀MuhiskanMK3(芬蘭)；洗板機(jī)(芬蘭雷勃WwllwashPlus)。1．3試劑ELISA法檢測試劑由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供，批號120080101；化學(xué)發(fā)光法試劑為

4、北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號20070920。1．4方法隨機(jī)抽取室間質(zhì)評10份陽性標(biāo)本分別以1：5稀釋作為待測標(biāo)本，與另外35份標(biāo)本，共計45份標(biāo)本分別用兩種方法進(jìn)行檢測，均嚴(yán)格按照各自的試劑盒說明書操作。1．5統(tǒng)計學(xué)方法用SPSSl2．0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)資料比較采用Y2檢驗(yàn)。2結(jié)果在45份標(biāo)本中，化學(xué)發(fā)光法和ELISA法均為陽性29份，其樣本吸光度／臨界值(OD／CO)范圍分別為2．379～179．100和1．633～28．375；兩種方法均為陰性的標(biāo)本12例，其OD／CO值范圍分別為0．077～0．525和0．053～0

5、．617；在化學(xué)發(fā)光法為陽性而ELISA法為陰性的3例標(biāo)本中，ELISA法的樣本OD／CO值范圍為0．607～0．849，而化學(xué)發(fā)光法的OD／CO值范圍為1．230～1．787。結(jié)果見表1。表1兩種方法對45份樣本抗一HIV檢測結(jié)果(”)由表1可以看出，化學(xué)發(fā)光法的敏感性高于ELISA法，兩種方法抗HIV檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Y2—25．002，P<0．01)。3討論艾滋病是由HIV感染所引起的一種獲得性免疫缺陷性疾病，可通過性傳播、血液傳播和母嬰傳播途徑感染人類，檢出抗一HIV是艾滋病診斷的重要條件，而診斷HIV感染是艾滋病預(yù)防控制工作的重

6、要組成部分。因此，建立敏感、實(shí)用的檢測方法，對于監(jiān)測、診斷或血液篩查以及控制艾滋病的流行顯得尤為重要。目前艾滋病診斷技術(shù)主要包括病毒檢測和病毒特異性抗體檢測等。由于HIV病毒分離、病毒載量測定、病毒核酸測定以及病毒抗原檢測等方法難度大、費(fèi)用高，因而抗體檢測是常規(guī)檢測方法，包括ELISA、聚丙烯酰胺凝膠電泳、間接免疫熒光試驗(yàn)和斑點(diǎn)印跡在內(nèi)的檢測技術(shù)用于篩選實(shí)驗(yàn)，免疫印跡試驗(yàn)用于確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。由此可見，提高敏感性、特異性，縮短窗El期和方法簡便、快速，是HIV檢測試劑未來發(fā)展的主要趨勢。白1985年第1代抗HIV檢測試劑問世至今，HIV血清學(xué)檢測試劑已

7、經(jīng)發(fā)展到第4代。但使用第4代試劑對艾滋病病毒抗體進(jìn)行檢測，仍然有2～3周的窗口期。此外，由于把抗宣石曲瓞一薈士濁包的擊田休全原和抗體同時包被在反應(yīng)板上存在著相互干擾的可能，影響了免疫反應(yīng)的特異性。另外，從方法學(xué)上來講，這種基于ELISA的分析方法，靈敏度終歸是有限的[1]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，化學(xué)發(fā)光法檢測樣本的OD／CO比值明顯高于ELISA法，對于抗體效價較低的弱陽性血清樣本，化學(xué)發(fā)光法具有明顯優(yōu)勢，可以大大縮短“窗V1期”，最大可能地避免漏檢，降低窗El期導(dǎo)致醫(yī)院感染的風(fēng)險，早期發(fā)現(xiàn)疾病，對防治艾滋病等傳染病有著更大的技術(shù)優(yōu)勢。而且該技術(shù)與國

8、外普遍采用的管式發(fā)光法不同，首創(chuàng)板式發(fā)光法，具有高通量的特點(diǎn)，更加適合我國國情。目前，該方法的不足之處是試劑成本比較貴，但隨著該技術(shù)逐步實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，試