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1、中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué)2013年10月第40卷第5期ChinOccupMed，October2013，Vo1．40，No．5doi：10．11763／j．issn．2095—2619．2013．05．012·研究與實(shí)踐·絨毛膜尿囊膜血管實(shí)驗(yàn)替代眼刺激實(shí)驗(yàn)研究Studyonusingchorioallantoicmembranevascularassayasanalternativemethodofdraizeeyeirritationtest王寧，仇峰，施志沖，鄭志清，洪新宇，帥怡，肖萍WANGNing，QIUFeng
2、，SHIZhi—chong，ZHENGZhi—qing，HONGXin—yu，SHUAIYi，XIAOPing上海市疾病預(yù)防控制中心毒理研究室，上海200336摘要：目的探討使用絨毛膜尿囊膜血管實(shí)驗(yàn)(CAMVA)替代動(dòng)物眼刺激實(shí)驗(yàn)(Draize實(shí)驗(yàn))的可行性。方法用CAMVA方法對(duì)十二烷基磺酸鈉(SDS)、吐溫20和過硼酸鈉的眼刺激性進(jìn)行檢測(cè)，得到半數(shù)反應(yīng)濃度(RC)值，與世界經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(OECD)數(shù)據(jù)庫(kù)化學(xué)物眼刺激分級(jí)比對(duì)，并與Draize實(shí)驗(yàn)最大平均值(MAS)和24h作用值的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性比較。
3、結(jié)果SDS以充血反應(yīng)為主，RC。為0．1mol／L(有刺激)，OECD數(shù)據(jù)庫(kù)眼刺激分級(jí)為中度；吐溫20以出血反應(yīng)為主，RC。為0．53mol／L(有刺激)，OECD數(shù)據(jù)庫(kù)眼刺激分級(jí)為輕度；過硼酸鈉則出現(xiàn)凝血效應(yīng)，RC為0．03moL／L(有刺激)，OECD數(shù)據(jù)庫(kù)PIlaU激分級(jí)為無刺激。LogRC與Draize實(shí)驗(yàn)MAS和24h作用值的相關(guān)系數(shù)分別為0．9736和0．9434(P<0．05)。結(jié)論CAMVA可能是一種有效的眼刺激實(shí)驗(yàn)替代方法，仍需要更多的實(shí)驗(yàn)加以驗(yàn)證。關(guān)鍵詞：眼刺激；離體實(shí)驗(yàn)；替代方法；絨毛膜
4、尿囊膜血管實(shí)驗(yàn)中圖分類號(hào)：R139．3；R135．92；R114文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：2095—2619(2013)05—0433—04體內(nèi)眼刺激實(shí)驗(yàn)(Draizeeyeirritationtest，以下簡(jiǎn)級(jí)比對(duì)，并和Draize實(shí)驗(yàn)評(píng)分進(jìn)行相關(guān)性分析，以探稱“Draize實(shí)驗(yàn)”)自20世紀(jì)50年代起一直作為評(píng)價(jià)討CAMVA作為Draize實(shí)驗(yàn)替代方法的可行性?；瘜W(xué)物眼刺激作用的傳統(tǒng)方法。但是，許多研究發(fā)現(xiàn)該方法在實(shí)驗(yàn)室問和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的結(jié)果常有很大差異，1材料和方法故對(duì)Draize實(shí)驗(yàn)作為眼刺激評(píng)價(jià)的惟一方法
5、產(chǎn)生了質(zhì)疑J。同時(shí)，近年來由于動(dòng)物福利、動(dòng)物保護(hù)運(yùn)動(dòng)1．1受試物和試劑受試物的選擇標(biāo)準(zhǔn)參照OECD的興起和人們對(duì)“3R”(減少、優(yōu)化、替代)運(yùn)動(dòng)的關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)，所選擇的3種受試物包括陰離子表面活性劑注J。歐美各國(guó)已廣泛開展了Draize實(shí)驗(yàn)的離體替十二烷基磺酸鈉[Sodiumlaurylsulphate，SDS，美國(guó)化代方法研究，并通過了驗(yàn)證，很多產(chǎn)品的評(píng)價(jià)方法都學(xué)文摘服務(wù)社登記號(hào)(ChemicalAbstractServiceNum—開始采用離體替代方法作為新的研究策略。絨毛膜ber，CASNO)：151-21
6、·3]、非離子型表面活性劑吐溫尿囊膜血管實(shí)驗(yàn)(Chorioallantoicmembranevascularas—20(Tween20，CASNO：9005—64．5)、無機(jī)鹽過硼酸鈉say，CAMVA)利用尿囊絨膜(CAM)與結(jié)膜結(jié)構(gòu)相似的(CASNO：10486-00-7，分析純，美國(guó)Sigma公司)。無特點(diǎn)，通過檢測(cè)化學(xué)物對(duì)CAM的損傷并量化為半數(shù)特定病原體級(jí)“白色來亨”受精雞卵(上海家禽育種反應(yīng)濃度(Medianreactiveconcentration，RC50)，來評(píng)價(jià)有限公司)；新西蘭白色家兔(
7、上海生旺實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖其眼刺激性。國(guó)外用CAMVA作為Draize實(shí)驗(yàn)的一種有限公司)；熒光素鈉(CASNO：518．47．8，分析純，美替代方法已發(fā)展到驗(yàn)證研究階段。本研究使用國(guó)Sigma公司)；硅酮橡膠環(huán)(直徑10mm，廣東省疾病CAMVA對(duì)3種化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，將結(jié)果與世界經(jīng)預(yù)防控制中心)。濟(jì)合作與發(fā)展組織(OrganizationforeconomicCO．opera．1．2受精雞卵孵育受精雞卵，質(zhì)量為50～60g，在tionanddevelopment，OECD)數(shù)據(jù)庫(kù)化學(xué)物眼刺激分(37．5±0．5
8、)℃，相對(duì)濕度為70％的條件下進(jìn)行孵育。孵育過程中，雞蛋氣室端向上，每小時(shí)進(jìn)行自動(dòng)翻轉(zhuǎn)。作者簡(jiǎn)介：王寧(1979一)，女，衛(wèi)生毒理學(xué)碩士，主管醫(yī)師，主要從孵育第4天起光照檢查，用光源確定胚胎的位置，在從事化妝品體外替代方法研究蛋的窄端鉆1個(gè)小孔，用針管吸出2．0～2．5m1蛋清通訊作者：肖萍主任醫(yī)師，E-mail：pxiao@scdc．sh．cn液，用火棉膠封住小孔。在胚胎頂部位置，用手持鉆中國(guó)職業(yè)
