血藍(lán)蛋白對(duì)體外培養(yǎng)T細(xì)胞影響.doc

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1、血藍(lán)蛋白對(duì)體外培養(yǎng)T細(xì)胞的影響南華大學(xué)劉佳妮1*,陳聰2*,凌晨3,胡皓昀4,曹勁松5#,高勇強(qiáng)6#(1.南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院2013級(jí)臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)4210012016年國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃支持項(xiàng)目(NO:201610555010)和2016年度湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(NO:2016-283)資助作者簡(jiǎn)介:劉佳妮,1995-,女,2013級(jí)本科生,眼科和耳鼻喉科方向,臨床醫(yī)學(xué)專業(yè),南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院。2.南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物研究所4210013.南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院2014級(jí)臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)4210014.南華大學(xué)船山學(xué)院

2、2015級(jí)麻醉學(xué)專業(yè)4210015.6南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物研究所,湖南省特殊病原體防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南省分子靶標(biāo)新藥協(xié)同創(chuàng)新中心421001出版物名稱:ONCOLOGYLETTERS發(fā)表時(shí)間:2018.02(2018,15:2655-2660)指導(dǎo)老師:高勇強(qiáng)講師摘要:慶大霉素作為一種廣譜抗生素被廣泛應(yīng)用于T細(xì)胞體外培養(yǎng),但初步研究發(fā)現(xiàn)慶大霉素對(duì)T細(xì)胞的活性有顯著影響。本研究選擇來(lái)自凡納濱對(duì)蝦的血藍(lán)蛋白作為T細(xì)胞體外培養(yǎng)的添加劑。與添加慶大霉素對(duì)照組相比,細(xì)胞數(shù)量無(wú)顯著性差異,細(xì)胞集落形成率隨血藍(lán)蛋白濃度的增加而逐漸增加。流式細(xì)胞

3、儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn),0.2g/ml血藍(lán)蛋白組(Hem3組)的CD3+CD4+和CD4+CD25+T細(xì)胞的分化簇均顯著增加。細(xì)胞周期分析顯示,Hem3組G0/G1期T細(xì)胞明顯減少,S期T細(xì)胞顯著升高。MTT分析表明,Hem3組T細(xì)胞對(duì)HepG2細(xì)胞的殺傷作用明顯增強(qiáng)。綜上所述,本研究認(rèn)為血藍(lán)蛋白可促進(jìn)T細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒性,為血藍(lán)蛋白在T細(xì)胞過(guò)繼免疫治療中的應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。Abstract:Asabroad-spectrumantibiotic,gentamicinisusedextensivelyinTcellculturinginvi

4、tro,butpreliminarystudieshaveidentifiedthatTcellactivityissignificantlyaffectedbygentamicin.Inthepresentstudy,thehemocyaninfromLitopenaeusvannameiwasselectedasanadditiveforTcellculturesinvitro.Comparedwiththoseinthecontrolgroup,thecellquantityexhibitednosignificantdiff

5、erence,andtheformationrateofcellcolonyincreasedgraduallywithincreasesinthehemocyaninconcentration.Additionally,flowcytometryassaysidentifiedthatclusterofdifferentiationCD3+CD4+andCD4+CD25+Tcellsinthe0.2μg/mlhemocyaningroup(Hem3group)wereallsignificantlyincreased.Furthe

6、rmore,cellcycleanalysisdemonstratedthatTcellsintheG0/G1phaseweresignificantlydecreasedandcellsintheSphaseweresignificantlyelevatedintheHem3group.Inaddition,MTTanalysisindicatedthatthecytotoxicityofTcellstowardsHepG2cellswassignificantlyincreasedintheHem3group.Takentoge

7、ther,thepresentstudyidentifiedthathemocyaninmayimprovetheproliferationandcytotoxicityofTcells,andtheresultssupportedtheuseofhemocyanininTcelladoptiveimmunotherapy.關(guān)鍵詞:血藍(lán)蛋白;T細(xì)胞;細(xì)胞表型;細(xì)胞周期;細(xì)胞毒性Keywords:hemocyanin;Tcells;cellphenotype;cellcycle;cytotoxicity1.前言T細(xì)胞過(guò)繼免疫治療目前較

8、廣泛的應(yīng)用于臨床環(huán)境中,慶大霉素作為一種廣譜抗生素添加劑[1-3],普遍應(yīng)用于T細(xì)胞體外培養(yǎng)。然而,我們以前的研究顯示慶大霉素能夠抑制T細(xì)胞活性[4]。為此我們選擇血藍(lán)蛋白作為T細(xì)胞體外培養(yǎng)的添加劑,以維持體外抗菌環(huán)境,增強(qiáng)T細(xì)胞的活

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