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1、稀有血型血液的保存 與臨床輸注長沙血液中心王赤林全血保存保存方法：低溫保存保存溫度：4℃±2℃保養(yǎng)液：ACD.ACDA-A/B.CPDA-1等保存時間：ACD21天ACDA-A/B.CPDA-135天紅細胞保存低溫保存●保存溫度：4℃±2℃●保養(yǎng)液：MAP等●保存時間：35天深低溫保存（冷凍保存）●保存溫度：-65℃以下●冷凍保護劑：甘油●保存時間：十年●解凍洗滌后保存：4℃±2℃，24小時紅細胞深低溫保存進展1949年發(fā)現甘油對牛精子有保護作用，接著應用甘油作保護劑冷凍紅細胞獲得成功，但沒解決去除冷凍保護劑的問題未應用于臨床。
2、1956年應用Cohn分離器將冷凍保護劑甘油去除，使冷凍紅細胞成功地用于臨床，但此法比較復雜，仍未得到廣泛推廣。1963年發(fā)現可用糖液洗滌法去除甘油，冷凍紅細胞逐漸在臨床得到廣泛應用。紅細胞深低溫保存進展1972年利用不同濃度的氯化鈉溶液洗滌紅細胞去除甘油。我國于20世紀70年代中期開始紅細胞冷凍保存的研究，并于1975年成功應用于臨床。由手工制備到半自動設備制備，再到現在的全自動設備制備。經過多年的研究與探索，方法不斷改進、日益完善，開創(chuàng)了血液保存的另一重要途徑，是現代輸血工作中唯一能長期保存紅細胞的方法。紅細胞深低溫保存機理
3、低溫損傷鹽變性學說：水結冰時使細胞內外產生的高濃度電解質作用于細胞膜，增加了細胞膜對陽離子的通透性并使細胞膜上形成一些小孔，冰融化時水進入細胞引起滲透休克；冰晶的機械作用：冷凍時細胞內外形成冰晶，冰晶作用于細胞膜并使細胞膜產生小孔使細胞膜不可逆地喪失其半透性，解凍后即出現溶血。紅細胞深低溫保存機理冷凍保護玻璃化的概念：生物材料在由液態(tài)向固態(tài)轉化過程中沒有晶體形成或晶體顆粒小于5-10nm。玻璃化是冷凍保存生物材料最有效的方法。冷凍保護措施：1、添加冷凍保護劑,使細胞中水處于容易達到玻璃化狀態(tài)；2、迅速冷凍和解凍,細胞中水和膠體迅
4、速玻璃化。冷凍保護劑：細胞內保護劑:甘油、DMSO等細胞外保護劑:羥乙基淀粉、甘露醇等。紅細胞深低溫保存機理冷凍保護劑的種類雖然很多，但大多是在實驗室研究和應用，真正比較成熟且大量用于臨床的仍然是以甘油為主的保護劑。甘油具有無毒性、中性、分子量小能滲入細胞、與水結合能力強等特點，使水溶液的結晶點明顯降低，結晶過程進行緩慢或形成無結晶凝固.甘油與水結合后使電解質濃度降低，減少或避免了膜脂蛋白復合物的變性與磷脂的丟失，以防止紅細胞的冷凍損傷。紅細胞冷凍方法慢速冷凍法用高濃度甘油處理紅細胞，甘油在紅細胞中的終濃度約為40%(W/V)；
5、冷凍無需嚴格控制冷卻速率，冷凍降溫速度約1-10℃/分鐘；冷凍和貯存使用-65℃以下機械冰箱即可?？焖倮鋬龇ㄓ玫蜐舛雀视吞幚砑t細胞，甘油在紅細胞中的終濃度約為18-20%（W/V）；將甘油化的紅細胞置于液氮中（-196℃）迅速冷凍，降溫速度約100-1000℃/分鐘；然后將冷凍后的紅細胞置于-120℃保存。冷凍紅細胞制備 （一）慢速冷凍糖液聚集洗滌制備法原理：pH5.2-6.1，血漿中丙種球蛋白與紅細胞的脂蛋白形成可逆性復合物，加入非電解質溶液如果糖、葡萄糖溶液時，離子強度減小，離子間引力也減小，與脂蛋白結合的球蛋白之間又互相形
6、成可逆結合，使紅細胞聚集成團沉降，當加入電解質如生理鹽水或提高pH時，球蛋白之間的結合又斷開，紅細胞重新懸浮。甘油配方：甘油（g/v）79.2%、葡萄糖（g/v）8.0%、果糖(g/v)1.0%、EDTA.2Na0.3%制備方法：全血或懸浮紅細胞離心去血漿→加入與濃縮紅細胞等體積的甘油試劑，室溫平衡30分鐘→-65℃以下冰箱貯存→臨床用血時取出于37-40℃水浴中融化→第一次洗滌：加入50%葡萄糖溶液，待紅細胞沉淀后去上清→第二次洗滌：加入10%蔗糖溶液（國外用5%果糖溶液），待紅細胞沉淀后去上清→第三次洗滌：加入10%蔗糖溶液
7、，待紅細胞沉淀后去上清→懸浮洗滌：加入生理鹽水，離心去上清→生理鹽水懸浮紅細胞。冷凍紅細胞制備 （二）慢速冷凍鹽液離心洗滌制備法原理：用不同濃度梯度的NaCl溶液由高滲過度到等滲，用大容量離心機反復離心或用連續(xù)離心機分離、洗脫去甘油。甘油配方：甘油(g/v)57.1%、乳酸鈉(M)0.14、氯化鉀(mM)5、磷酸氫二鈉(mM)5制備方法：全血或懸浮紅細胞離心去血漿→加入甘油試劑，室溫平衡30分鐘→-65℃以下冰箱貯存→臨床用血時取出于37-40℃水浴中融化,離心去上清→第一次洗滌：加入9%NaCl和0.9%NaCl溶液(或9%N
8、aCl溶液和羥乙基淀粉溶液)，離心去上清→第二次洗滌：加入0.9%NaCl溶液(或羥乙基淀粉溶液和0.9%NaCl溶液)，離心去上清→第三次洗滌：加入0.9%NaCl溶液，離心去上清→0.9%NaCl溶液（或血漿）懸浮紅細胞。冷凍紅細胞制備 （三）快速冷凍制備法
