2013 種子活力測定.ppt

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1、實驗九種子生活力的快速鑒定◇種子生活力是指種子發(fā)芽、生長的潛在能力或種胚具有的生活能力。◇了解種子有無生活力需測定種子的發(fā)芽率，但所需時間較長，且無法預(yù)知是否處在深休眠狀態(tài)?！罄没瘜W(xué)反應(yīng)、生理反應(yīng)與物理方法的快速鑒定法，短時間獲得種子是否具有生活力的結(jié)果?！蟊緦嶒瀸W(xué)習(xí)幾種種子生活力的快速鑒定方法。實驗?zāi)康腡TC法紅墨水法熒光觀察法檢測種子活力實驗1TTC（氯化三苯基四氮唑）法實驗材料：小麥種子實驗試劑：0.5%TTC溶液實驗用具：培養(yǎng)皿，單面刀片，恒溫箱實驗步驟1浸種：待測種子在280C溫箱中溫水（30-350

2、C）浸種2-6小時，以增強種胚的呼吸強度，使顯色迅速。（已做）胚果毛腹溝小麥籽?？v切面圖（示胚的結(jié)構(gòu)）A.籽?？v切面；B.胚的縱切面1.胚；2.胚乳；3.果皮與種皮的愈合層；4.糊粉層；5.淀粉貯藏細(xì)胞；6.盾片；7.胚芽鞘；8.幼葉；9.胚芽生長點；10.胚軸；11.外胚葉；12.胚根；13.胚根鞘實驗步驟2(顯色)取吸漲的小麥種子30粒，每粒沿胚的中心線縱切（使胚部一分為二），分成二份，分別放在兩個培養(yǎng)皿中；取其中一個培養(yǎng)皿（30個半粒），加入0.5%TTC溶液浸沒種子，置于35℃溫箱中30min。實驗步驟3

3、倒去TTC溶液，用自來水沖洗種子一次，肉眼觀察胚部著色情況；胚部呈玫瑰紅色的種子是有生活力的種子；胚部呈淡紅色的種子，生活力較弱，有的可發(fā)芽；胚部未著色的種子，不能發(fā)芽。統(tǒng)計結(jié)果，以百分率表示。TTC法注意事項將胚一分為二；顯色時要使漂浮的種子全部浸入試劑中；顯色溫度25-350C為宜；顯色結(jié)束后，要立即觀察，因TTC光下久放會變色。實驗2紅墨水染色法有生活力的種子胚細(xì)胞的原生質(zhì)膜具有選擇透性，有選擇吸收外界物質(zhì)的能力，一般染料不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，胚部不染色；喪失生活力的種子，胚部細(xì)胞原生質(zhì)膜喪失了選擇吸收能力，染料

4、可以自由進(jìn)出細(xì)胞使胚部染色；根據(jù)胚部是否被染色來鑒定種子有無生活力。實驗原理實驗材料：小麥種子實驗試劑：5％紅墨水實驗用具：同TTC法。實驗步驟1（浸種）浸種：同TTC法。實驗步驟2（染色）取另外一個培養(yǎng)皿中30個半粒小麥種子；加入紅墨水溶液染色10min。實驗步驟310min后，傾去染色液并沖洗，至沖洗液無色為止，檢查種子染色情況；胚根、胚芽、子葉都不著色或僅胚根、胚芽尖端著色而子葉大部分不著色的是活種子；以上三部分全部或大部分著色的是死種子；統(tǒng)計結(jié)果，以百分率表示。注意事項染料的濃度要適當(dāng)，染色時間不能太長，

5、否則不易區(qū)別被染色與否。染色法測定種子生活力，適用于禾谷類、豆類、麻類、瓜類、十字花科、棉花、果樹等植物種子。TTC法紅墨水法實驗3熒光法（直接觀察法）植物種子中存在著許多能夠在紫外線照射下產(chǎn)生熒光的物質(zhì)，如核酸、蛋白質(zhì)、黃酮類、酚類、香豆素等物質(zhì)；有些種子（尤其是禾本科、松柏科、某些薔薇科）在衰老過程中，這些熒光物質(zhì)結(jié)構(gòu)和成分往往會發(fā)生變化，導(dǎo)致熒光喪失或熒光顏色改變；（活種子有藍(lán)紫色熒光，死種子無熒光或熒光呈黃褐色）具此特點的種子可用“熒光觀察法”鑒定種子生活力。實驗原理有些種子（尤其是十字花科植物）衰老死亡

6、時，熒光物質(zhì)性質(zhì)雖未改變，但由于細(xì)胞原生質(zhì)透性加大，浸種后種子中的熒光物質(zhì)很容易外滲；可觀察浸種后衰老死亡種子漏出“熒光團(tuán)”的數(shù)量,確定種子生活力。實驗材料：小麥干種子實驗用具：單面刀片，培養(yǎng)皿，紫外分析儀實驗步驟取小麥干種子15粒，用刀片沿胚的中心線將種子縱切成兩半，放在培養(yǎng)皿中，使切面向上，放在紫外分析儀下照射并進(jìn)行觀察；有生活力的種子產(chǎn)生明亮的藍(lán)色、藍(lán)紫色或藍(lán)綠色的熒光；死種子多半是黃色、褐色以至暗淡無光，并帶有斑點；記錄有生活力種子及喪失生活力種子的數(shù)量，計算百分率。紫外分析儀放入培養(yǎng)皿觀察窗口30粒濕種

7、子15粒干種子30個半粒TTC法紅墨水法熒光觀察30個半粒30個半粒30min恒溫箱10min切面向上不同方法測定種子生活力結(jié)果方法供試粒數(shù)有生活力種子粒數(shù)無生活力種子粒數(shù)有生活力種子占供試粒數(shù)的％TTC30紅墨水30熒光30思考題1、還有哪些方法、生理過程、生化原理可用來快速鑒定種子的生活力？2、試比較這幾種方法的測定結(jié)果是否相同？為什么？每組清洗6套培養(yǎng)皿（上周實驗用的）6支試管洗凈后用蒸餾水沖洗下次實驗（5月28日）實驗十細(xì)胞（質(zhì)膜）透性測定