資源描述：
《藻膽蛋白生物合成光譜分析張陽杰.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、藻膽蛋白α亞基生物合成及光譜分析報(bào)告題目藻膽蛋白α亞基生物合成及光譜分析作者姓名張陽杰班級(jí)學(xué)號(hào)2011114020525指導(dǎo)教師蘇平完成時(shí)間2014.3生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心目錄引言.......................................................................31.實(shí)驗(yàn)儀器與試劑..........................................................51.1實(shí)驗(yàn)儀器......................................................
2、...51.2實(shí)驗(yàn)材料及試劑...................................................51.2.1實(shí)驗(yàn)材料.....................................................51.2.2抗生素儲(chǔ)備液.................................................51.2.3IPTG儲(chǔ)備液...................................................61.2.4緩沖液............................
3、...........................61.2.5SDS-PAGE電泳溶液.............................................62.實(shí)驗(yàn)方法.................................................................72.1菌種活化與擴(kuò)大培養(yǎng)................................................72.2藻膽蛋白α亞基生物合成...........................................82.3藻膽蛋白α
4、亞基提純...............................................82.4色素蛋白電泳檢測..................................................82.5藻膽蛋白α亞基光譜測定...........................................93.結(jié)果與分析..............................................................93.1藻膽蛋白α亞基產(chǎn)物圖...................................
5、..........93.2藻膽蛋白α亞基光譜圖.............................................103.3透析后藻膽蛋白α亞基光譜圖......................................114.實(shí)驗(yàn)討論................................................................12參考文獻(xiàn)................................................................13藻膽蛋白α亞基生物合成及光譜分析張陽杰（指
6、導(dǎo)老師：蘇平）（湖北師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生物技術(shù)1105班湖北黃石435002）摘要：本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建質(zhì)粒來實(shí)現(xiàn)在大腸桿菌內(nèi)合成具有活性的α—PEC。藻膽蛋白(包括本文研究的α—PEC)在藍(lán)藻內(nèi)的作用是吸收光、傳遞能量至光合作用反應(yīng)中心，所以本實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)重組是否成功主要檢驗(yàn)吸收光譜是否與天然藻膽蛋白一致。藻膽蛋白(Phycobiliprotein)是存在于藍(lán)藻、紅藻和隱藻中的一類捕光色素蛋白，可分為藻紅蛋白(簡稱PE)，藻藍(lán)蛋白(簡稱PC)，別藻藍(lán)蛋白(簡稱APC)和藻紅藍(lán)蛋白(簡稱PEC)。重組有藻膽蛋白（本實(shí)驗(yàn)只做藻紅蛋白）基因的E.coliBL21，在含有kana（24μ
7、g/ml）和氯霉素（40.8μg/ml）的LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)。當(dāng)OD600達(dá)到0.5-0.6時(shí)，用終濃度為1mmol/L的異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）誘導(dǎo)培養(yǎng)2.5小時(shí)。加超聲緩沖液后用超聲破壁離心取上清，得到藻紅蛋白粗提液。通過鎳-親和層析對(duì)起進(jìn)行純化。關(guān)鍵詞：藻膽蛋白重組質(zhì)粒光譜分析引言藻膽蛋白(Phycoerythrocyanin)是一類結(jié)構(gòu)相似的色素蛋白。它是由藻膽色素通過和相應(yīng)的脫輔基蛋白中保守性半胱氨酸的巰基以硫醚鍵共價(jià)結(jié)合形成的。藻膽色素是一類線性四吡咯化合物（分子量約600Da）。藻膽體中
