流式細胞術(shù)在白血病和淋巴瘤中應用課件.ppt

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1、流式細胞術(shù) 在白血病、淋巴瘤免疫分型中的應用免疫分型的作用區(qū)分淋系、髓系白血病區(qū)分淋系白血病中的T、B-ALL鑒定混合細胞性白血病的類型:T-M、B-M、T-B、T-B-M于治療過程中監(jiān)測MRD,評價療效提示某些遺傳學異常:CD56+APL---t(11;17)?CD19+AML---t(8;21)(q22;q21)?提示預后:CD7、CD11b、CD56等陽性的AML患者預后不良CD15陽性的AML患者CR率高免疫分型的原理正常造血細胞白血病細胞抗原表達遵循系列保守性出現(xiàn)抗原跨系表達髓系:CD33+,T系:CD7+髓系:

2、CD33+CD7+抗原表達有一定的時序性出現(xiàn)抗原時序混亂表達原始細胞:CD34+CD11B-原始細胞:CD34+CD11B+各階段細胞按一定的比例分布出現(xiàn)分化阻滯原幼細胞<5%原幼細胞>20%免疫分型需要掌握什么理論知識?正常造血細胞的抗原表達規(guī)律不同系列的細胞表達的抗原?同一系列不同階段的細胞表達的抗原?每種抗原的表達強度?正常B系細胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細胞分析》正常T系細胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細胞分析》正常粒細胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細胞分析》正常單核細胞分化圖源于王建中等編著

3、的《臨床流式細胞分析》免疫分型中的重要抗原CD45正常成人骨髓標本成熟粒細胞:約占40-60%,表達CD11b、CD13、CD33、CD15、CD16、CD10、CD64,不表達CD34、HLA-DR、CD14、CD117有核紅細胞:<50%,表達GPA成熟單核細胞:約占2-8%,表達CD11b、CD64、CD14、HLA-DR,不表達CD34、CD117成熟淋巴細胞:約占20-40%T細胞:表達CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7,不表達CD10、CD34、TDT等B細胞:表達CD19、CD20、CD22,不表

4、達CD10、CD34、TDT等NK細胞:CD3-(CD16+CD56)+正常幼稚B細胞:<5.0%,表達CD10、CD19、CD22、弱表達CD20,少量CD10stCD34+TDT+幼稚髓系細胞:〈5.0%免疫分型常用的抗體AMLCD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO懷疑M6加做CD71、GPA懷疑M7加做CD61、CD41B-ALLCD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aT-ALLCD34、

5、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、HLA-DR、CD1a、TDT、cCD3NK細胞CD16、CD56、CD57漿細胞CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56免疫分型的步驟一第一步:初篩,初步篩選白血病類型CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑為T-ALLCD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑為AML伴CD7+CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑

6、為B-ALLCD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑為B-ALL伴CD33+CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑為AML伴CD19+CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑為AMLCD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑為APL免疫分型的步驟二第二步:確診,進一步確定白血病類型,并且將某一系別的白血病根據(jù)分化程度的不同再分為不同亞型根據(jù)初篩結(jié)果加做其他系別特異性標記T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、TDT、c

7、CD3B-ALL:CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aAML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,懷疑M6加做CD71、GPA,懷疑M7加做CD61、CD41B-ALL免疫亞型亞型CD19CD34TdTCD10CyIgSmIgFAB分型earlyB-precursorALL+++(-)--L1、L2CommonB-ALL++++(-)-L1、L2PreB-ALL+-/+++(+)-L1B-ALL+----/+(+)L3T-ALL免疫亞型分型CD7CD2TdTCD

8、3c/mCD1aFAB分型急性早期T前體細胞白血病earlyT-precursorALL+-+-/+-L1、L2胸腺皮質(zhì)T-ALL+++++L1、L2急性T細胞白血病T-ALL++-+-L1、L2示例:T-ALL初篩CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-示例:AML伴CD7+初篩

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