抗菌藥物藥敏試驗.ppt

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1、抗菌藥物藥敏試驗紙片擴散法實驗目的和要求掌握紙片擴散法的原理、操作方法及結果判讀了解藥物敏感試驗的方法和實際意義原理含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分溶解后便不斷地向紙片周圍區(qū)域擴散，形成遞減的濃度梯度。在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的細菌的生長被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度，并與該藥對測試菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負相關，即抑菌圈愈大，MIC愈小。試驗程序材料普通平皿培養(yǎng)基,大腸桿菌菌液,葡萄球菌菌液。抗生素藥敏紙片（直徑5mm，青霉素，

2、鏈霉素、氯霉素、慶大霉素、四環(huán)素）無菌鑷子、無菌棉簽、量尺取瓊脂平皿培養(yǎng)基兩個，分別在其底部中央位置標注“大腸桿菌”和“葡萄球菌”字樣，同步進行如下操作。方法1.標記分區(qū)底部觀2.密涂接種分三次接種，每次取一環(huán)。第一次密涂接種后旋轉60度二次密涂接種，然后同方向旋轉60度后再次密涂接種。頂部觀3.貼片頂部觀4.培養(yǎng)置37℃溫箱，倒置培養(yǎng)18h5.結果觀察抑菌圈直徑≥15mm高度敏感抑菌圈直徑10-15mm中度敏感抑菌圈直徑≤10mm低度敏感無抑菌圈不敏感或耐藥注意事項接種時均勻密涂貼片時，用無菌鑷子輕輕觸壓藥物紙片使之與培

3、養(yǎng)基充分接觸貼片后不能再更改紙片位置鑷取藥物紙片時一旦掉到培養(yǎng)基表面，則繼續(xù)保持其位置，切勿鑷起重新放置，以防不同抗生素交叉影響整個貼片過程應在15min內(nèi)完成