資源描述：
《菊花高頻再生體系建立及農(nóng)桿菌介導(dǎo)FT基因轉(zhuǎn)化的研究.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、分類號：墨魚墨2密級：公玨菊花高單位代碼：學(xué)號：100862鯉墨墨圣墨頻再生體系建立及農(nóng)桿菌介導(dǎo)FT基因轉(zhuǎn)化的研究StudiesonEstablishmentofHighFrequenceRegenerationSystemandAgrobacterium--mediatedTransformationofChrysanthemumwithFT學(xué)位申請人：劉冰指導(dǎo)教師：肖建忠教授楊際雙副教授學(xué)科專業(yè)：園林植物與觀賞園藝學(xué)位類別：農(nóng)學(xué)碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二。一一年五月二十九日獨(dú)創(chuàng)性聲明本
2、人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得塑皇墾盔些盤堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：主t＼冰簽字日期：釓11年步月叼日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解塑蘭堡盛些盤堂有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，
3、允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)塑蘭墾壅些盤堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名：袁、1琳籮月明日I學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通訊地址：翮躲艫k椽紐簽字日期：矽l1年歲月1日電話：郵編：摘要IIIIIrlIIIrlrlIIIIIIY1897092菊花是原產(chǎn)于我國的十大名花之一，但是絕大多數(shù)品種的菊花自然花期集中在11月左右，能夠在夏季或早秋開花的只有少數(shù)花色單調(diào)、花型較
4、小的品種。因此菊花的生產(chǎn)發(fā)展因?yàn)槠浠ㄆ趩栴}受到了嚴(yán)重制約。FT基因是一個激酶抑制蛋白，可以通過對CO對FT的調(diào)節(jié)促進(jìn)開花。本試驗(yàn)旨在通過對菊花高效再生體系及根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化體系的研究，將Fr基因?qū)氲骄栈ㄆ贩N‘神馬’中，以期獲得花期提前的菊花新品種，并為廣泛運(yùn)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改良菊花品種打下基礎(chǔ)。本試驗(yàn)以菊花品種‘神馬’為試驗(yàn)材料。研究了不同激素濃度配比對菊花直接誘導(dǎo)不定芽再生以及對生根誘導(dǎo)的影響，對菊花的再生條件進(jìn)行了優(yōu)化，從而獲得了菊花葉片高速快效的再生體系。試驗(yàn)結(jié)果表明，將菊花‘神馬’葉盤接種在
5、MS+NAA1m∥L+6．BAlmgrL培養(yǎng)基上，經(jīng)過20天的組織培養(yǎng)后，可直接再生出不定芽，而且再生率高達(dá)95．5％，再生芽在I／2MS+NAA0．7mg／L培養(yǎng)基上經(jīng)過10天左右可誘導(dǎo)出根，生根率可達(dá)100％。在菊花品種‘神馬’高效再生體系建立的基礎(chǔ)上，利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法對其遺傳轉(zhuǎn)化進(jìn)行了研究。研究結(jié)果表明，葉盤預(yù)培養(yǎng)時間、侵染時間、共培養(yǎng)時間以及延遲培養(yǎng)時間均對菊花的遺傳轉(zhuǎn)化效率有較大影響。同時得出經(jīng)過預(yù)培養(yǎng)12h的葉盤置于菌液侵染5min，黑暗共培養(yǎng)3d；延遲篩選3d時菊花遺傳轉(zhuǎn)化
6、率最高。共培養(yǎng)后將葉盤接種到MS+NAAling／L+6．BAlmg／L+Km20mg／L培養(yǎng)基上進(jìn)行抗性芽的篩選培養(yǎng)。25天后可直接分化出不定芽，當(dāng)不定芽長到1-2cm左右時轉(zhuǎn)到I／2MS+NAA0．7m∥L+Km20mg／L培養(yǎng)基上進(jìn)行生根篩選培養(yǎng)。在加km的培養(yǎng)基中連續(xù)篩選8周以上，將期間產(chǎn)生的抗性芽切下接種在含有20mg／Lkm的生根培養(yǎng)基中進(jìn)行二次篩選，提取能夠正常生根的抗性苗的DNA，進(jìn)行PCR檢測，共獲得PCR陽性植株7株，轉(zhuǎn)化率大約0．90／o．說明目的基因FT整合到菊花的基因組中。關(guān)
7、鍵詞：菊花；根癌農(nóng)桿菌；遺傳轉(zhuǎn)化；Fr基因StudiesonEstablishmentofmghFrequenceRegenerationSystemandAgrobacterium-mediatedTransformationofChrysanthemumwithFTAuthor：．LiubingTutor：．XiaoBanzhongYangJishuangMajor：．LandscapePlantandOranmentalHorticultureAbstractChrysanthemumisone
8、ofthetenfamousflowerwhichoriginatedinourcountry．butmostvarietiesofthembloomconcentratedinNovemberorso，atthesametimeonlyafewalittlekindsofcolorsandsmallertypeofflowerscanbloomatsummerorearlyautumn．Therefore，thedevelopmentofchrysan
