缺血-藥物后處理對(duì)離體大鼠心肌線粒體功能

缺血-藥物后處理對(duì)離體大鼠心肌線粒體功能

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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士論文缺血/藥物后處理對(duì)離體大鼠心肌線粒體功能及心磷脂的影響缺血/藥物后處理對(duì)離體大鼠心肌線粒體功能及心磷脂的影響摘要目的:本研究采用Langendorff離體灌注建立大鼠心肌缺血再灌注損傷模型,觀察缺血后處理(IPostC)和線粒體鉀通道開放劑二氮嗪(DZ)藥物后處理對(duì)缺血再灌注損傷大鼠心功能、心肌酶學(xué)、心肌氧自由基、心肌線粒體膜電位、心肌線粒體呼吸功能及心磷脂的影響,并探討KATP通道開放劑在缺血/藥物后處理心肌保護(hù)中的作用。方法:采用Langendorff裝置建立大鼠離體心肌缺血再灌注模型,

2、將SD大鼠隨機(jī)分為續(xù)灌組(C)、缺血再灌注損傷組(CON)、二氮嗪后處理組(DZ)、5-羥葵酸拮抗二氮嗪后處理組(5-HD+DZ)、缺血后處理組(IPO)、5-HD拮抗缺血后處理組(5-HD+IPO)組,每組8例。C組:在Langendorff灌注平衡20min后續(xù)灌70min;CON組:平衡20min,缺血前灌注4℃ST.Thomas停跳液,全心缺血40min,復(fù)灌30min;DZ組:平衡20min,全心缺血40min,缺血后給予含二氮嗪(50μmol/L)的K-H液灌注5min后,然后再用K-H液復(fù)灌注2

3、5min;5-HD+DZ組:二氮嗪后處理之前先給予含5-羥葵酸(100μmol/L)的K-H液灌注5min,再用K-H液復(fù)灌注20min;IPO組:平衡20min,缺血前灌注4℃ST.Thomas停跳液,全心缺血40min,采用恢復(fù)灌注10s、全心停灌10s,連續(xù)6次循環(huán)(共計(jì)2min),然后再用K-H液復(fù)灌注28min,;5-HD+IPO:缺血后處理之前先給予含5-羥葵酸(100μmol/L)的K-H液5min,再用K-H液復(fù)灌注23min。觀察:1.平衡末及再灌注末各組不同時(shí)間心功能及心肌酶學(xué)的變化;2.

4、平衡末及再灌注末取心肌并分離、制備線粒體,觀察線粒體膜電位及氧自由基的變化;3.平衡末及再灌注末取心肌并分離、制備線粒體,觀察線粒體呼吸功能的變化;4.平衡末及再灌注末取心肌并分離、制備線粒體,提取線粒體總磷脂,觀察各組線粒體心磷脂含量的變化。結(jié)果:1.心功能(HR、CF、LVDP、LVEDP)、心肌酶學(xué)(LDH、CK)、線粒體膜電位(Δψ):各組內(nèi)再灌注末的心功能、心肌酶學(xué)及線粒體膜電位與平衡末比均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01);再灌注末:CON組與C組比有極顯著差異(P<0.01);DZ組與I

5、PO組的心功能、心肌酶學(xué)、線粒體膜電位優(yōu)于CON組(P<-68-遵義醫(yī)學(xué)院碩士論文缺血/藥物后處理對(duì)離體大鼠心肌線粒體功能及心磷脂的影響0.01),但不及C組(P<0.05或P<0.01);5-HD+DZ組與CON組比無明顯差異,而與C組、DZ組及IPO組比有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。5-HD+IPO組與CON組及IPO組比均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。2.線粒體ROS及呼吸功能(3態(tài)呼吸、RCR、P/O):各組內(nèi)再灌注末的ROS及呼吸功能與平衡末比有顯著性差異(P<0.05或

6、P<0.01);再灌注末:CON組與C組比有顯著性差異(P<0.05或P<0.01);再灌注末以琥珀酸為底物時(shí)DZ組及IPO的線粒體ROS生成減少及呼吸功能明顯優(yōu)于CON組(P<0.01),但不及C組(P<0.05);5-HD+DZ組與CON組比無明顯差異,而與C組、DZ組比有顯著性差異(P<0.01);再灌注末以蘋果酸/谷氨酸為底物時(shí)DZ組與5-HD+DZ組及CON組比沒有明顯差異,IPO組再灌注末的ROS及呼吸功能與CON組及C組比均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01);5-HD+IPO組與C組、C

7、ON組和IPO組比均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01);再灌注末:以維生素C/TMPT為底物時(shí),DZ組的呼吸功能(3態(tài)呼吸、RCR)與5-HD+DZ組及CON組比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但5-HD+IPO組與C組、CON組和IPO組比均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。3.線粒體心磷脂含量:各組內(nèi)再灌注末與平衡末比均有極顯著差異(P<0.01);再灌注末:CON組心磷脂與C組比有極顯著差異(P<0.01);DZ組與IPO組的心磷脂明顯高于CON組(P<0.01),但低于C組(P<0.01);5-HD

8、+DZ組與C組及DZ組有顯著性差異(P<0.01,P<0.05),與CON組沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,5-HD+IPO組與C組、CON組和IPO組比均有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:1.IPostC和DZ能改善缺血再灌注大鼠心臟的心功能、保護(hù)線粒體膜電位、減少線粒體ROS的產(chǎn)生、保護(hù)線粒體呼吸鏈及心磷脂含量,產(chǎn)生心肌保護(hù)作用。2.選擇性線粒體ATP敏感性鉀通道拮抗劑5-HD能夠完全拮抗DZ的

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