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《阻斷缺血后處理大鼠心肌線粒體比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文阻斷缺血后處理大鼠心肌線粒體比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研究遵義醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。學(xué)位論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果。其他同志對(duì)本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均已在學(xué)位論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝=藝思。學(xué)位論文作者簽名：]馴蕾厶步簽字日期：2口1凈否月乙日遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解遵義醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：遵義醫(yī)學(xué)院有權(quán)保留并向有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被
2、查閱和借閱。本人授權(quán)遵義醫(yī)學(xué)院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存學(xué)位論文，即：遵義醫(yī)學(xué)院具有學(xué)位論文的數(shù)字化制品復(fù)制權(quán)，信息網(wǎng)絡(luò)傳播權(quán)和匯編權(quán)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名：飛兮包J，L簽字日期：沙1、年占月21日囂翥：軍㈣日論文：阻斷缺血后處理大鼠心肌線粒體比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研英漢縮略詞對(duì)照表??????????????????4中文摘要?????????????????????5英文摘要?????????????????????7前言??一一??“?一一
3、?一“?一“?”一???一“?一”一·9刖舌??一一??“?一‘“?一??“?”‘????“?一”一’第一部分：離體心臟缺血一再灌注模型構(gòu)建及心肌線粒體樣本的制備材料一?一一?”一?””一”?“一???”?“．．?””?．．?”11方法”?一一”一“”一“一?．．”“??．．?··??·??·?·?“·12結(jié)果???????????“?一“?????????17討論”?．．”“一???一“?·????“·?····?·?··??··2l第二部分：心肌線粒體蛋白雙向電泳、質(zhì)譜鑒定及回復(fù)驗(yàn)證材料?????“????·??··?····??????······23方法”．．
4、????“??????··一·?·????????32結(jié)果”??一?????????“”????????····40討論”．．?““一““?一””．．?”?”一”?“?一“???．．一一482結(jié)論··??·??·??·········??···············??·??····54參考文獻(xiàn)?????????????????????55綜述：ATP敏感性鉀通道在心肌保護(hù)中的研究進(jìn)展???59致謝???????????????????????69作者簡(jiǎn)介?????????????????????703英漢縮略詞對(duì)照表4阻斷缺血后處理大鼠心肌線粒體七匕較蛋白質(zhì)組學(xué)的
5、研究中文摘要目的：通過(guò)研究5一羥葵酸阻斷缺血后處理大鼠心肌線粒體蛋白質(zhì)的表達(dá)變化，尋找心肌缺血再灌注損傷的標(biāo)識(shí)蛋白和保護(hù)蛋白，為科研和臨床提供依據(jù)。方法：1．建立Langendorff大鼠離體心臟缺血再灌注損傷模型：雄性SD大鼠(N=24)隨機(jī)分為正常組(Nor)、缺血再灌注損傷組(I／R)、缺血后處理組(IPO)、5一羥葵酸阻斷缺血后處理組(5．HD+IPO)，每組6只；各組灌注方案：Nor組：持續(xù)灌注Kerbs．Henseleit緩沖液(K-H液)120min。I瓜、IPO及5-HD+IPO組于缺血前灌注K．H液平衡20min，灌注4℃St．Thomas停跳液缺血
6、40min，而后分別按以下方案續(xù)灌：I瓜組：灌注K-H液60rain；IPO組：復(fù)灌前給予K．H液復(fù)灌10S、停灌10s循環(huán)6次，繼而K．H液58min；5-HD+IPO組：復(fù)灌前依次灌注100lamol／L5．羥葵酸3min、K-H液復(fù)灌10S停灌10s循環(huán)6次、K．H液55min。記錄各組平衡末和續(xù)灌末心率(胍)、左室發(fā)展壓(L、rDP)、左室舒張末壓(LVDEP)以及最大dp／dt等心功能的變化，并收集心室肌組織；2．差速離心聯(lián)合Nycodenz密度梯度離心獲取大鼠心肌線粒體，通過(guò)透射電鏡檢測(cè)線粒體的純度、完整性和富集度；3．對(duì)IPO與5-HD+IPO組心肌線粒
7、體蛋白行雙向凝膠電泳(2．DE)，掃描獲取數(shù)字化圖像，采用PD—Quest8．0軟件查找差異表達(dá)蛋白點(diǎn)，并將蛋白點(diǎn)挖取進(jìn)行質(zhì)譜分析后獲得蛋白相關(guān)信息：4．利用Westernblot回復(fù)驗(yàn)證關(guān)鍵差異蛋白的表達(dá)趨勢(shì)，以判斷2-DE結(jié)果的可靠性。結(jié)果：1．透射電鏡證實(shí)Nyeodenz不連續(xù)密度梯度離心法使線粒體的純度進(jìn)一步提高；2．各組心功能指標(biāo)在平衡末無(wú)明顯差異，灌注末Nor組及IPO組的心功能明顯好于I／R組和5-HD+IPO組(尸
