利用卡那霉素鑒定轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的探究活動.pdf

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1、生物學(xué)教學(xué)2014年(第39卷)第6期利用卡那霉素鑒定轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的探究活動張建華(江蘇省射陽縣第四中學(xué)鹽城224300)摘要本文闡述了利用卡那霉索鑒定轉(zhuǎn)基因抗蟲棉探究活動的目的理、材料、步驟和實驗結(jié)果。關(guān)鍵詞卡那霉索抗蟲棉轉(zhuǎn)基因鑒定探究活動轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是指棉花細(xì)胞染色體上，整合有外砂平鋪于發(fā)芽盒中，厚約20mm，細(xì)砂中的含水量以手源抗蟲基因的棉花品種。其細(xì)胞外源基因中，一類是握成團(tuán)、松開能散即可?？瓜x基因，通常為來源于蘇云金芽孢桿菌的Bt基因；3．3播種方法每個小組選取某個品種健壯、飽滿的另一類是選擇標(biāo)志基因

2、，通常是MPTII基因。在選擇種子20粒，以單粒分2行播人一個發(fā)芽盒中，每行1O壓力下，不含標(biāo)志基因的非轉(zhuǎn)化組織或細(xì)胞死亡，而含粒，將種子均勻地壓入砂的表面，然后加蓋20ram厚度標(biāo)志基因的轉(zhuǎn)化細(xì)胞由于有抗性而繼續(xù)存活。所以，的松散砂，并貼上種子名稱的標(biāo)簽。可以用一定的篩選劑從大量的不含標(biāo)志基因的非轉(zhuǎn)化3．4藥劑配制播后7一lOd，在棉苗子葉展平時，開組織或細(xì)胞中選擇出轉(zhuǎn)化細(xì)胞?。始配制卡那霉素溶液。將1支硫酸卡那霉素(每支卡那霉素是基因工程中應(yīng)用最早最廣泛的一種篩2mL，0．5g)全部倒入裝有20OraL蒸餾

3、水的燒杯中，用選劑。有實驗驗證，讓發(fā)芽的苧麻種子在含有卡那霉玻璃棒慢慢攪勻待用。硫酸卡那霉素的溶液濃度為素的MS培養(yǎng)基上生長，一段時間后幼苗就會開始白2500ppm(藥液須由實驗指導(dǎo)教師配制)?；酌缟L受到嚴(yán)重影響_2J。而含MPTII標(biāo)記基因3．5藥液處理每個小組選取正常棉苗10株(每行的苧麻，它表達(dá)的產(chǎn)物可以使植物對卡那霉素產(chǎn)生抗5株，分布要均勻，剩余棉苗全部剪除)，對其中一行5性，用一定濃度的卡那霉素處理苧麻種子，可以作為鑒株棉苗的兩側(cè)子葉的正面，用蘸有硫酸卡那霉素鑒定定轉(zhuǎn)基因后代中，苧麻轉(zhuǎn)化體和非轉(zhuǎn)

4、化體的重要參考液的棉簽進(jìn)行均勻涂抹；另一行棉苗留作對照，不能沾指標(biāo)-2J。本次探究實驗利用本地廣泛種植轉(zhuǎn)基因抗上藥液。蟲棉的有利條件，讓學(xué)生有一個對轉(zhuǎn)基因生物有直接然后，放在光照充足、溫度為25℃及濕度不宜太認(rèn)識和實踐活動的機(jī)會。大的環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)。如果溫度較低時，也可以直接1探究目的將發(fā)芽盒放到智能種子發(fā)芽箱中培養(yǎng)。掌握卡那霉素鑒定轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的原理、方法、步3．6現(xiàn)象觀察一般在涂抹藥液7～lOd后，各小組驟和結(jié)果。提高學(xué)生的多種能力，激發(fā)學(xué)習(xí)生物學(xué)的開始觀察幼苗子葉顏色。熱情，增強(qiáng)環(huán)境保護(hù)意識。4結(jié)果分析2

5、實驗原理凡是實驗材料為棉種新農(nóng)雜l2號、新農(nóng)興7號的棉花對卡那霉素較為敏感，因而抗卡那霉素的基實驗小組，實驗組幼苗子葉表現(xiàn)為正常綠色，與對照組因被確定為抗性標(biāo)記基因。轉(zhuǎn)基因抗蟲棉攜帶抗卡那棉苗子葉葉色沒有區(qū)別。說明這兩品種細(xì)胞中基因表霉素基因，棉苗對卡那霉素處理不敏感；而非轉(zhuǎn)基因棉達(dá)產(chǎn)生了抗硫酸卡那霉素的物質(zhì)。凡是材料為湘雜棉花不攜帶抗卡那霉素基因，對卡那霉素處理反應(yīng)敏感。5號、鹽雜3號的實驗組幼苗子葉表現(xiàn)為斑狀失綠(發(fā)利用轉(zhuǎn)基因抗蟲棉品種與非轉(zhuǎn)基因棉花品種對卡那霉黃)，而對照組幼苗子葉仍為正常綠色，表明湘雜棉

6、5素葉色反應(yīng)不同的特性，可以簡便而準(zhǔn)確地進(jìn)行轉(zhuǎn)基號、鹽雜3號兩品種細(xì)胞不能產(chǎn)生抗卡那霉素的物質(zhì)。因抗蟲棉與非轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的間接鑒定。5實驗結(jié)論3材料步驟棉種新農(nóng)雜12號、新農(nóng)興7號是轉(zhuǎn)基因抗蟲棉；3．1實驗材料轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉花品種新農(nóng)雜12湘雜棉5號、鹽雜3號是非轉(zhuǎn)基因棉花。號、新農(nóng)興7號，非轉(zhuǎn)基因棉花品種湘雜棉5號，鹽雜36活動總結(jié)號各若干粒，醫(yī)用硫酸卡那霉素l0支(每支2mL，0．本次活動實驗現(xiàn)象明顯，效果顯著。學(xué)生通過利5g)，種子發(fā)芽盒10個，經(jīng)過消毒處理的細(xì)砂l(fā)Okg，脫用卡那霉素鑒定轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，

7、進(jìn)一步理解轉(zhuǎn)基因工脂棉簽100支，20OraL燒杯10個，玻璃攪拌棒10根，蒸程中重組細(xì)胞的篩選原理。各小組積極收集相關(guān)資餾水lO00mL。料，討論制定探究實驗方案，經(jīng)過實施得出實驗結(jié)論。3．2播前準(zhǔn)備4位學(xué)生為一組對細(xì)砂進(jìn)行消毒、過本次活動讓學(xué)生直接接觸轉(zhuǎn)基因生物，可激發(fā)學(xué)生對篩，細(xì)砂直徑為0．05—0．80ram，確保無毒無菌。將細(xì)轉(zhuǎn)基因生物相關(guān)課程學(xué)習(xí)和探究的熱情。加之本次實·66·生物學(xué)教學(xué)2014年(第39卷)第6期初中生物學(xué)知識高效記憶法例談陸嘉琴(江蘇省海門市能仁中學(xué)226100)摘要初中生物學(xué)涉

8、及的概念、知識點很多，本文介紹幫助學(xué)生快速記憶生物學(xué)知識的五種方法。關(guān)鍵詞生物學(xué)知識記憶方法1編順口溜記憶法多畫簡筆畫，不強(qiáng)求圖的美觀性，但求圖的科學(xué)性。教教師根據(jù)教學(xué)內(nèi)容編制順口溜、口訣，可以幫助學(xué)師要及時展示學(xué)生所畫的圖片，表揚好的，糾正錯的。生巧記生物學(xué)知識。例如，顯微鏡操作順口溜：一取二實踐證明，畫圖能培養(yǎng)學(xué)生的觀察、思考、空間想象等放，三安裝；四轉(zhuǎn)低倍，五對光；六夾玻片，物中