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《基于錨定PCR技術對10種重要農業(yè)害蟲微衛(wèi)星DNA位點的篩選及其特征分析-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在應用文檔-天天文庫。
1、生物安全學報2014，23(1)：60—65JOURNALOFBIOSAFETYhttp：ffwww．bscn．orgDOI：10．3969／j．issn．2095—1787．2014．o1．012基于錨定PCR技術對10種重要農業(yè)害蟲微衛(wèi)星DNA位點的篩選及其特征分析李慧，郎坤玲，沈長朋，李潔，陶云荔，褚棟青島農業(yè)大學農學與植物保護學院，山東省植物病蟲害綜合防控重點實驗室，山東青島266109摘要：【背景】微衛(wèi)星DNA廣泛存在于真核和原核生物的基因組中，具有多態(tài)性豐富、易于檢測等特點，在遺傳圖譜的構建、動植物遺傳學育
2、種等方面被廣泛應用。【方法】利用5錨定PCR技術對桃小食心蟲、桃蛀螟、玉米螟、二點委夜蛾、花薊馬、黃胸薊馬、棕櫚薊馬、斑翅果蠅、稻水象甲、扶桑綿粉蚧10種重要農業(yè)害蟲進行微衛(wèi)星DNA篩選，并分析各個物種的微衛(wèi)星DNA的特點?！窘Y果】不同物種的陽性克隆率、微衛(wèi)星比率、克隆效率和冗余率存在不同程度的差異；在核苷酸堿基數目上，主要為二核苷酸重復序列，占重復位點總數的93．2％～100％，三、四核苷酸重復位點較少。在二核苷酸重復位點中，CA／TG重復位點最為豐富，占重復位點總數的89．2％～100％。這與使用的錨定引物密切相關
3、；10種害蟲的微衛(wèi)星DNA平均重復次數為6．7～8．9次，其中玉米螟具有最高的微衛(wèi)星DNA重復次數(34次)；在序列類型上，完全型序列占上述害蟲序列總數的91．0％～100％?！窘Y論與意義】5錨定PCR技術能夠快速挖掘害蟲的微衛(wèi)星DNA位點，本研究結果為這些害蟲微衛(wèi)星位點的進一步利用奠定了基礎。關鍵詞：農業(yè)害蟲；微衛(wèi)星；5錨定PCR技術；克?。惶卣鞣治鯥solationandCharaCterizatiOnofmicrosatelliteDNAlocifrOmtenimportantagriculturalpestin
4、sectsusinganchoredPCRmethodHuiLI，Kun-lingLANG，Chang—pengSHEN，JieLI，Yun—liTAO，DongCHUKeyLaboratoryofIntegratedCropPestManagementofShandongProvince，CollegeofAgronomyandPlantProtection，QingdaoAgriculturalUniversity，Qingdao，Shandong266109，ChinaAbstract：【Background】M
5、icrosatelliteDNAconsistsofbothprokatryoticandeukaryoticgenomes．Thecharacteristicsincluderichpolymorphismandeasydetection．Thetechniquehasbeenappliedinanimalandplantgeneticsandbreeding，fortheconstructionforgeneticmaps．【Method】Usingthe5anchoredPCRmethod，microsatcll
6、iteDNAfrom10importantagriculturalpestswereisola—tedandanalyzed，includingCarposinasasakii(Lepidoptera：Carposinidae)，Conogethespunctralis(Lepidoptera：Pyralidae)，Ostrinianubilalis(Lepidoptera：Pyralidae)，Proxenuslepigone(Lepidoptera：Noctuidae)，Frankliniellaintonsa(T
7、hysanoptera：Thripidae)，Thripshamaiiensis(Thysanoptera：Thripidae)，Thripspalmi(Thysanoptera：Thripidae)，Drosophilasuzukii(Diptera：Drosophilidae)，Lissorhoptrusoryzophilus(Coleoptera：Curculionidae)andPhenacoccussolenopsis(Hemiptera：Pseudococcidae)．Thecharacteristicso
8、fmicrosatelliteDNAintheseinsectswereanalyzed．【Result】Thepositiveclonerates，microsatelliterates，clo-ningeficiencyandredundancyratesofmicrosatelliteDNAamongthespecieswe
