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《1涂片找抗酸桿菌操作規(guī)程01》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、青海大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科編號：QDFYJY-WS001-1/0-2012章節(jié)：微生物實驗室操作規(guī)程作業(yè)指導(dǎo)書標題：涂片找抗酸桿菌操作規(guī)程頁碼：第1頁共3頁涂片找抗酸桿菌操作規(guī)程1、檢驗?zāi)康臋z驗樣本中是否含有抗酸桿菌，為臨床提供診斷依據(jù)。2、原理結(jié)核菌、麻瘋桿菌、恥垢菌等抗酸性菌，因其菌體表面有一層類脂或脂質(zhì)之皮膜而不易著色，但一經(jīng)著色后，酸性酒精的作用亦是不容易把它脫色。利用這特性并以增強的染色液予染色，然后再以酸性酒精加以處理，使其脫色后再對比染色，此時抗酸性菌仍是固定著最初色素的顏色（紅色），也就易于鑒別。3、標本要求（1）標本類型：病人的痰、穿
2、刺關(guān)節(jié)液、腹水、胸積液、組織、腦脊液、分泌物、尿液等。（2）標本采集：挑取痰標本中、膿樣或可疑部分，于玻片正面均勻涂抹成卵圓形痰膜，自然干燥。染色前加熱固定。4、容器和添加劑類型痰盒、尿杯、試管等。5、試劑（1）試劑名稱：染色液。（2）產(chǎn)品型號：結(jié)核菌染色液（又名：抗酸染色液/TBStain）冷染法。（3）試劑生產(chǎn)廠家：珠海貝索生物技術(shù)有限公司。（4）包裝規(guī)格：4X250ML。（5）試劑組成：主要成份試劑1：石碳酸復(fù)紅液（1×250ml） 堿性品紅、笨酚試劑2：酸性酒精溶液（2×250ml） 乙醇、鹽酸試劑3：亞甲基藍溶液（1×250m
3、l） 亞甲藍3第2頁共3頁6、儀器設(shè)備：OLYMPUSCX31奧林巴斯雙目顯微鏡。7、操作步驟（1）涂片自然干燥后，經(jīng)火焰固定，加石碳酸復(fù)紅溶液蓋滿玻片，染色5分鐘或更久（不需加溫）。（2）水洗,(之后盡可能將水瀝干）。加酸性酒精溶液蓋滿玻片，脫色1-2分鐘（3）水洗（假如標本面還可以看到殘存紅色時，再加酸性酒精溶液脫掉紅色為止）。（4）加亞甲基藍溶液，染色30秒。（5）水洗干燥后，鏡檢。8、質(zhì)量控制：參加我科質(zhì)量管理組的質(zhì)量控制活動。9、干擾和交叉反應(yīng)麻風菌可能對檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響。10、生物參考區(qū)間涂片未見抗酸桿菌。11、患者檢驗結(jié)果的可報
4、告區(qū)間涂片未見抗酸桿菌/涂片見細長、紅色抗酸桿菌。12、結(jié)果判斷抗酸性菌（結(jié)核菌）呈紅色，其它細菌及細胞呈藍色。結(jié)核菌通常為長1.3～3.5u，寬0.3～0.5u多少有點彎曲之桿菌，沒有鞭毛和芽孢，屬難染性菌，但抗酸性染色可使其顯著被染。菌體有的成點狀連著或成群也有，菌少的時候每2～3個菌呈V、Y、T字狀的特有集結(jié)。13、臨床意義：結(jié)核分枝桿菌不產(chǎn)生內(nèi)毒素和外毒素，其毒力主要是在機體中細胞內(nèi)、外生長與大量繁殖的能力，細菌成分與其代謝產(chǎn)物引起免疫反應(yīng)（Ⅳ型）導(dǎo)致一系列組織學(xué)上的意義。3第3頁共3頁14、注意事項（1）脫色液用完后，可自制3％鹽酸酒精溶
5、液作為脫色液。（2）每次試劑用完后，請迅速蓋好，以免揮發(fā)。（3）抗酸染色直接用于痰標本時，可以適當增加標本涂片的厚度，以提高檢出率。染厚涂片時，須掌握復(fù)染時間。如果背景過深，會影響鏡檢。（4）有時同一抗酸菌體上，紅色的深淺亦有不同，觀察時應(yīng)予注意。（5）試劑盒儲存時，盡量避免高、低溫環(huán)境及陽光直射。（6）病理組織片的抗酸染色，建議使用熱染法，但需要注意的是Carbolfuchsin的染色時間不能低于5分鐘，如此即可得到較好的染色效果。（7）冬季室溫過低時，染色時間要適當延長。（8）本品應(yīng)有專業(yè)人員使用。（9）使用前應(yīng)詳細閱讀使用說明書，在有效期內(nèi)使
6、用，并做好個人衛(wèi)生防護。（10）用后應(yīng)按醫(yī)院或環(huán)保部門要求處置棄物。15、生產(chǎn)許可證16、售后服務(wù)單位編寫人審核人批準人批準日期3
