石斛組織培養(yǎng)和移栽探究

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1、石斛組織培養(yǎng)和移栽探究　　摘要石斛又叫石斛蘭，蘭科石斛屬植物。是我國古文獻中最早記載的蘭科植物之一。本實驗用1/2MS為基本培養(yǎng)基,添加不同的激素配制三種不同的培養(yǎng)基進行石斛蘭試管苗快速繁殖和移栽的研究。結(jié)果表明:1/2MS-C配方石斛蘭原球莖增殖最快。再按照1/2MS-C配方分別用純凈水[1]、蒸餾水[2]、自來水[3]作溶解劑配制三種不同的培養(yǎng)基對石斛進行組織培養(yǎng)，經(jīng)多次試驗后發(fā)現(xiàn)配方[1]石斛原球莖的增殖速度最快，數(shù)量最多。關(guān)鍵詞：石斛、組織培養(yǎng)、移栽中圖分類號：S223文獻標識碼：A文章編號：前言植物的組織培養(yǎng)

2、（tissue12石斛組織培養(yǎng)和移栽探究　　摘要石斛又叫石斛蘭，蘭科石斛屬植物。是我國古文獻中最早記載的蘭科植物之一。本實驗用1/2MS為基本培養(yǎng)基,添加不同的激素配制三種不同的培養(yǎng)基進行石斛蘭試管苗快速繁殖和移栽的研究。結(jié)果表明:1/2MS-C配方石斛蘭原球莖增殖最快。再按照1/2MS-C配方分別用純凈水[1]、蒸餾水[2]、自來水[3]作溶解劑配制三種不同的培養(yǎng)基對石斛進行組織培養(yǎng)，經(jīng)多次試驗后發(fā)現(xiàn)配方[1]石斛原球莖的增殖速度最快，數(shù)量最多。關(guān)鍵詞：石斛、組織培養(yǎng)、移栽中圖分類號：S223文獻標識碼：A文章編號：

3、前言植物的組織培養(yǎng)（tissue12culture）是指通過無菌操作把植物體的器官、組織或細胞（即外植體）接種于人工配制的培養(yǎng)基上,在人工控制的環(huán)境條件下，使之生長,發(fā)育成植株的技術(shù)與方法。由于培養(yǎng)物是脫離植物母體在試管中進行培養(yǎng)，所以也叫離體培養(yǎng)，或植物的細胞與組織培養(yǎng)。植物組織培養(yǎng)是建立在植物細胞全能性學說的理論基礎(chǔ)上，經(jīng)過長期反復(fù)科研實踐，逐步發(fā)展形成一套較為完整的技術(shù)體系。近二十年來，利用植物組織培養(yǎng)的方法不但在探求植物學的基本理論問題上已成為一個重要的手段，而且在應(yīng)用上也逐漸表現(xiàn)出了它巨大潛力。在農(nóng)業(yè)、林業(yè)及

4、園藝等方面，組織和細胞技術(shù)已經(jīng)用來培育作物新品種，復(fù)壯特殊的無病毒無性系，以及快速繁殖植物的無性系等。在花卉及草本植物方面，用無性繁殖系快速繁殖植株，使植物的生產(chǎn)工廠化和試管品種商品化，使目前植物組織和細胞培養(yǎng)在應(yīng)用上的新動向。園藝植物絕大多數(shù)良種是采用無性繁殖，以保持其優(yōu)良性狀的遺傳穩(wěn)定性和一致性。但傳統(tǒng)的無性繁殖方法繁殖的數(shù)量小、速度慢，而離體培養(yǎng)繁殖的技術(shù)特點是繁殖系數(shù)大，周年生產(chǎn)，繁殖速度快，苗木整齊一致。例如蘭花離體繁殖，一個外植體一年可繁殖400萬個原球莖。蘭科植物種類繁多，約有450個屬.石斛蘭屬是蘭科中

5、最大的一個屬，有一千多個種，在我國主要分布在西南和華南地區(qū)。石斛又叫石斛蘭，為蘭科石斛屬植物。是我國古文獻中最早記載的蘭科植物之一。石斛由于花形、花姿優(yōu)美，艷麗多彩，種類繁多，且花枝長、花多、花期長，深受各國人民的喜愛和關(guān)注，在國際花卉市場上占有重要的位置。石斛是多年生落葉草木。莖叢生，直立，上部略成回折狀，稍偏，黃綠色，具槽紋。葉近革質(zhì)，矩圓形?？偁罨ㄐ?，花大，白色，頂端淡紫色，落葉期開花。原產(chǎn)亞洲熱帶，喜高溫多濕和一定光照。生長適溫為25～30℃，冬季溫度不低于10℃，常綠種類不低于15℃，喜溫差在10～15℃，溫

6、差過小，影響枝葉生長。石斛中有些種如鐵皮石斛、金釵石斛等是名貴中藥材，具有養(yǎng)胃生津、滋陰清熱的功能，在我國傳統(tǒng)醫(yī)學上的應(yīng)用歷史悠久。石斛也是一種重要的觀賞植物。幾乎所有觀賞植物栽培的石斛蘭都是雜種。通過種子繁殖不能得到大量與親代性狀一致的植株。分株繁殖又速度太慢，滿足不了生產(chǎn)上的需要。1967年Sagawa和Shoji報道了通過培養(yǎng)分生組織無性繁殖石斛蘭的技術(shù)：從石斛蘭幼莖的側(cè)芽和頂芽上去切取芽的分生組織，培養(yǎng)在KonpC培養(yǎng)基上。3個月后，20％的頂芽和29％的側(cè)芽分化出原球莖（Protocom-likebodies

7、）。這些原球莖既可增殖，也可分化成完整的植株。繼后，Kim、Kunisaki、Sagawa在加有椰子汁的Vacin和Went培養(yǎng)基上成功的誘導(dǎo)了石斛蘭的芽分化組織產(chǎn)生原球莖，并證明了長約5cm的幼莖上切取的外植體最好；頂芽和側(cè)芽的誘導(dǎo)成功率分別為46.6％和50.9％。我們用組織培養(yǎng)技術(shù)建立了石斛蘭的快速繁殖系。原球莖每隔20～30天即能繁殖幾倍，在增殖過程中不斷分化成小植株，繁殖迅速。此次，我們所進行的實驗只是有關(guān)石斛蘭在不同培養(yǎng)基上生長繁殖的初步研究，希望能夠?qū)τ嘘P(guān)石斛蘭組織培養(yǎng)的研究起到輔助作用。材料與方法121

8、.實驗材料供試品種為天津農(nóng)學院提供的石斛蘭2.實驗方法2.1培養(yǎng)基的配制2.1.1以1/2MS為基本培養(yǎng)基，按照需要添加不同激素（NAA、IBA、6-BA）的培養(yǎng)基的配制。先取適量去離子水溶解10g蔗糖，倒入1000ml容量瓶中，再用每種試劑母液專用的移液管取1、2、3、5號母液各10ml，4號母液2ml一一放入容量瓶中，再取0.