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1、中草藥烏梅浸提液抑藻效應探究 摘要：為了明確烏梅對銅綠微囊藻生長的抑制效應，通過檢測烏梅浸提液對銅綠微囊藻的藻液吸光度、藻細胞密度及葉綠素a含量來明確烏梅浸提液對銅綠微囊藻的生長效應。結(jié)果表明，低濃度烏梅浸提液可促進銅綠微囊藻的生長，而高濃度的烏梅浸提液可抑制微囊藻的生長。研究結(jié)果將為實際應用烏梅抑制銅綠微囊藻的生長提供科學的理論依據(jù)。關(guān)鍵詞：烏梅浸提液；抑制效應；銅綠微囊藻中圖分類號：S968.4文獻標識碼：ADOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.12.017長期以
2、來，以銅綠微囊藻（Microcystisaeruginosa）為主的藍藻水華給淡水池塘養(yǎng)殖造成了巨大的危害，已成為限制淡水池塘養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的主要瓶頸之一。銅綠微囊藻為常見淡水魚類不易消化利用的藍藻，當池塘水體處于富營養(yǎng)化狀態(tài)時該藻大量繁殖形成水華，使其他有益藻類生長受到強烈抑制，水體中的溶氧等水化指標劇烈變化，破壞養(yǎng)殖水環(huán)境平衡，造成池塘養(yǎng)殖對象不同程度死亡，給養(yǎng)殖戶帶來巨大損失[1]。另外，多數(shù)銅綠微囊藻能產(chǎn)生一種肝毒性的環(huán)狀七肽的微囊藻毒素（Microc7ystins）[2-6]，這種物質(zhì)對水生動
3、物肝臟損傷較為嚴重，并可在水生動物性腺中積累，進而威脅到人類身體健康[7]。天津市現(xiàn)有淡水池塘養(yǎng)殖面積約3.2萬hm2，養(yǎng)殖產(chǎn)量約占全市水產(chǎn)養(yǎng)殖總產(chǎn)量的78%，在天津市的漁業(yè)經(jīng)濟中占有舉足輕重的位置。然而，在淡水池塘養(yǎng)殖迅猛發(fā)展的同時，以銅綠微囊藻（M.aeruginosa）為主的藍藻水華一直制約著天津市淡水池塘養(yǎng)殖業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。據(jù)統(tǒng)計，天津市每年約有1/3的淡水養(yǎng)殖池塘發(fā)生不同程度的藍藻水華，而現(xiàn)有的抑藻技術(shù)仍是以向養(yǎng)殖池塘潑灑化學抑藻劑（如CuSO4）為主?；瘜W抑藻劑的應急抑藻性能雖好，但抑藻效
4、果持久性卻差，進而導致養(yǎng)殖池塘的藍藻水華反復發(fā)生。另外，多數(shù)化學試劑對養(yǎng)殖動物的毒性較大，且容易造成養(yǎng)殖水環(huán)境的二次污染。中草藥具有生態(tài)安全性好及來源廣等優(yōu)點，已廣泛應用于水域環(huán)境調(diào)控中，然而利用中草藥控制銅綠微囊藻的研究卻鮮有報道。在前期初步的研究中，筆者發(fā)現(xiàn)中草藥烏梅（Prunusmume（Sieb.）etZucc）水提液具有一定的抑藻效應。因此有必要對烏梅的抑藻效應進行深入的研究，本研究擬通過室內(nèi)抑藻試驗評價烏梅的抑藻效能，為烏梅實際應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)的抑藻提供科學的理論依據(jù)。1材料和方法1.1試
5、驗材料7銅綠微囊藻的來源及培養(yǎng)：試驗用無毒銅綠微囊藻FACHB469與有毒銅綠微囊藻FACHB905，由中科院水生生物研究所淡水藻種庫提供。將試驗用藻置于室內(nèi)光照培養(yǎng)箱中用3000mL錐形瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為（24±1）℃，光照強度為54μmol·m-2·s-1，光暗周期為12h∶12h，每天定時振蕩4～6次，采用BG11培養(yǎng)液培養(yǎng)。1.2烏梅浸提液烏梅購自天津市瑞松堂大藥房，其浸提液制備過程為：取凈烏梅肉置于盛有蒸餾水的燒杯中，烏梅量按照10%（W/V：中草藥干質(zhì)量/中草藥溶液體積）添加，然后燒杯加蓋文
6、火煮20min，制成浸提液，過濾后調(diào)整濾液體積使烏梅濃度仍為10%，4℃保存。1.3試驗設(shè)計1.4試驗方法1.4.1藻液吸光度的測定采用Thermo紫外光分光光度計，以銅綠微囊藻培養(yǎng)液為參比，在625nm波長下測定吸光度。1.5數(shù)據(jù)分析2結(jié)果與分析2.1烏梅浸提液對銅綠微囊藻培養(yǎng)液吸光度的影響烏梅浸提液對銅綠微囊藻培養(yǎng)液吸光度的影響見圖1。由圖1可見，在濃度為0.1%烏梅浸提液的作用下，銅綠微囊藻的藻液吸光度從487h開始迅速下降直到試驗結(jié)束，而其他濃度處理組（0.001%，0.003%，0.01%，0
7、.032%）的藻液吸光度則隨著時間的延長而逐漸升高，但相對于對照組，0.01%與0.032%濃度處理組的藻液吸光度在試驗結(jié)束時明顯下降。2.2烏梅浸提液對銅綠微囊藻細胞密度的影響烏梅浸提液對銅綠微囊藻細胞密度的影響見圖2。從圖2中可見烏梅濃度為0.001%，0.003%，0.01%時銅綠微囊藻細胞密度隨時間的延長而呈上升趨勢，其中烏梅濃度為0.001%時，藻細胞密度在96h大于對照組，此時比初始的藻細胞密度增大了17.49%。而烏梅濃度為0.1%和0.032%時，在96h藻細胞密度明顯減少（P 有關(guān)藥
8、物對銅綠微囊藻影響所產(chǎn)生的“階段反應原理”現(xiàn)象有少量報道，李磊等[13]研究發(fā)現(xiàn)不同濃度的荷花和睡蓮種植水對銅綠微囊藻生長的抑制作用不盡相同，表現(xiàn)為明顯的低促高抑現(xiàn)象；張薛等[14]在長期培養(yǎng)試驗中，發(fā)現(xiàn)在投加低質(zhì)量濃度桔皮水提液的試驗組中，銅綠微囊藻在培養(yǎng)后期生長迅速，某些試驗組中出現(xiàn)促進銅綠微囊藻生長的現(xiàn)象，在投加高質(zhì)量濃度桔皮水提液的試驗組中，培養(yǎng)40d內(nèi)均保持接近于100%的抑制率。本研究證實高濃度烏梅浸提液對銅綠微囊藻的生長具有很
