富硒鮑魚菇的深層培養(yǎng)及其特性

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1、維普資訊http://www.cqvip.com(j一‘毒／一福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)m№鑒w味13(4)10895～S9富硒鮑魚菇的深層培養(yǎng)及其特性林琳謝必峰施巧琴——(’￡一{。)摘要報(bào)導(dǎo)在含有不同l襄度無機(jī)硒的波體培養(yǎng)基中培養(yǎng)鮑魚菇菌絲體，探討其耐硒和富硒特性．鮚果表蛹：鮑魚菇有較強(qiáng)的耐硒特性和很強(qiáng)的言硒能力，鮑魚菇菌絲體硒含量隨培養(yǎng)基質(zhì)硒濃度的增加而增高，在培養(yǎng)基中添加硒量為5gml時(shí)，富硒鮑魚菇菌絲體含硒量可達(dá)200t~g．／ml時(shí)，為對照的40倍硒回收率迭38．8．其氯基酸廈多糖含量均高于對照關(guān)鍵詞重璺絲墮一蓬墨堡查，耋O引言元素硒是人體的必需微量元素

2、，缺乏硒人體易產(chǎn)生各種疾病．已知大骨節(jié)病、克山病、苯丙酮尿癥、嬰兒突然死亡綜合癥、各種心血管疾病及癌癥的發(fā)生均與體內(nèi)缺硒密切相關(guān)．硒是自由基捕獲劑一谷胱甘肽過氧化物酶的關(guān)鍵性輔因子，具有抗氧化、清除自由基，調(diào)節(jié)多種維生素在體內(nèi)的吸收和消耗，解毒重金屬等多種功能．尤其是其抗腫瘤抗癌特性更受關(guān)注．美國建議每人每天補(bǔ)充1o?！?∞g(甚至更多)的硒以減少腫瘤的發(fā)生．做為補(bǔ)硒劑．有使用多年并在防治克山病中取得相當(dāng)療效的無機(jī)硒弧硒酸鈉，也確比無機(jī)硒生理活性更高的有機(jī)硒．如硒酵母．近年來人們對能夠富集較高濃度有機(jī)硒具較高營養(yǎng)價(jià)值和生理藥理活性的食用菌特別關(guān)注．但報(bào)道的均為栽培獲得的

3、食用菌子實(shí)體，為實(shí)現(xiàn)富硒食用菌的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，擬采用液體深層發(fā)酵培養(yǎng)食用菌菌絲體做為生物補(bǔ)硒劑，并探討其富硒特性鮑魚菇因其味道鮮美、營養(yǎng)價(jià)值高和具多種生物功能而備受人們喜愛，特別是我國臺灣正在大力推廣，并進(jìn)行商品化生產(chǎn)，其產(chǎn)品暢銷于東南亞和香港．鮑魚菇的深層發(fā)酵培養(yǎng)未多見報(bào)道，其富硒特性的研究也未見報(bào)道．1材料和方法I．I供試菌種鮑魚菇?I¨由本院提供1．2乒板耐Se試驗(yàn)制備含不同濃度Se(采用亞硒酸鈉)的PDA平板．硒含量分別為(／~g／m[)：0，5收稿日期：1996一0—2o維普資訊http://www.cqvip.com福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)10，2

4、050，i00在其上接種豆粒大的斜面菌種，于26℃下培養(yǎng)7天，測其菌絲生長的長度并觀察其菌絲在含se平板上萌發(fā)定植的時(shí)問。1．3富硒菌絲體的制備斜面培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基。種子培養(yǎng)基()：豆粉04，玉米淀粉0。6．酵母粉0．5，蔗糖10，葡萄糖1。0．KHPO0。2，MgSO0。2，硒含量1~g／ml，裝量100ml／250ml三角瓶。發(fā)酵培養(yǎng)基()：豆粉06，玉米淀粉1。0，酵母粉05，蔗糖16，葡萄糖1。0．KHPO0。2，MgSO40。2，Se含量分別為(~g／mI)：5，10，50，裝量：200mt／5OOml三角瓶．制備工藝：斜面培養(yǎng)7天一搖瓶種子培養(yǎng)6天一搖瓶

5、發(fā)酵培養(yǎng)4天一過濾一洗滌數(shù)次一干燥一粉碎。l4測定方法氨基酸的測定：樣品稱重．用6NHCI封管，置干燥箱，110℃水解24h，除酸，用002NHCI定容，上機(jī)(日立83550型氨基酌自動分析儀)分析。se含量的測定：稱取一定量樣品加HNO。和HCIO。加蓋低溫蒸至溶液清亮，開蓋蒸至近干，加HCI和少量交換水加熱30min，定容并稀釋至可測范圍，采用氫化物發(fā)生原子吸收法測定總硒。近年來作者剝富硒靈芝菌絲體的測試結(jié)果表明，富硒靈芝菌絲體其無機(jī)硒含量約占總硒的0．5(以稀鹽酸溶提樣品，原子吸收法測試)有機(jī)硒占99。5左右．而富硒鳳尾菇、香菇、金針菇子實(shí)體中有機(jī)硒占總硒的量均在

6、99。4～99．5，富硒酵母‘有機(jī)硒占總硒97。故認(rèn)為本試驗(yàn)樣品總硒的測定值基本上反映了有機(jī)硒的富集值。多糖的測定：菌絲體干粉稱重一熱水浸提兩次一上清液濃縮~sevag法去蛋白一乙醇沉淀一苯酚一硫酸法測多糖含量．2結(jié)果與分析2．1鮑魚菇對硒的耐受力對某些微生物來說，硒是其生長不可缺少的營養(yǎng)微量元素培養(yǎng)基中缺乏硒則不能生長而硒濃度過高則生長也受到抑制。為探討鮑魚菇對硒的耐受能力，進(jìn)行在含不同濃度se的固體平板上培養(yǎng)該食用菌的試驗(yàn)，菌絲定植與生長情況見圖1，同時(shí)又進(jìn)行了該食用菌在含不同濃度硒的液體培養(yǎng)基中的耐se試驗(yàn)，結(jié)果見圖2。由圖1、圖2可知：(1)鮑魚菇在固體培圖1鮑

7、魚菇在含不同濃度硒養(yǎng)基含硒5～1Ogg／ml時(shí)，可正常萌發(fā)定植。的目體培養(yǎng)基上的生長維普資訊http://www.cqvip.com第4期林琳等：富硒鮑魚菇的深層培養(yǎng)及其特性5~g／ml時(shí)．生長幾乎不受抑制古硒量增至20～50~g／ml時(shí)，定值時(shí)間延長且生長受到嚴(yán)重抑制，硒濃度選1009g／m[時(shí)，菌絲的生長基本停止．(2)鮑魚菇在液體培養(yǎng)條件下顯示更強(qiáng)的耐se能力，在培養(yǎng)基含se高選50pg／ml時(shí)，其生長幾乎不受抑制．2．2鮑魚菇對硒的官集能力不同生物對硒的吸收和富集能力不同．為探討鮑魚菇在體內(nèi)富集硒的能力，在含不同濃度硒的液體培養(yǎng)基