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《急性冠脈綜合征患者經(jīng)皮冠脈介入治療前后血漿內(nèi)皮素系統(tǒng)變化和臨床意義》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、急性冠脈綜合征患者經(jīng)皮冠脈介入治療前后血漿內(nèi)皮素系統(tǒng)變化和臨床意義 [摘要]目的研究急性冠脈綜合征(ACS)患者經(jīng)皮冠脈介入治療(PCI)前后不同時(shí)限血漿內(nèi)皮素(ET)水平及外周血單個(gè)核細(xì)胞ETA及ETB受體表達(dá)的變化及其臨床意義。方法選取2008年10月~2009年2月住院并接受PCI治療的ACS患者40例(ACS組),包括ST段抬高型心肌梗死(STEMI)26例(STEMI組),非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)9例(NSTEMI組),不穩(wěn)定型心絞痛(UA)5例(UA組);選擇同期健康體檢者20例為對照組。采用酶聯(lián)免疫法測定對照組及ACS組PCI治療前后不同
2、時(shí)限血漿ET-1水平,同時(shí)用半定量RT-PCR方法測定外周血單個(gè)核細(xì)胞表面ETA及ETB受體的表達(dá)。結(jié)果①PCI術(shù)前1hSTEMI組、NSTEMI組、UA組間ET-1水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但均高于對照組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);術(shù)后3個(gè)月STEMI組、NSTEMI組、UA組ET-1水平均低于同組術(shù)后7d水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。②PCI術(shù)前1hSTEMI組、NSTEMI組、UA組ETAmRNA、ETBmRNA表達(dá)水平均高于對照組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);術(shù)后3個(gè)月STEMI組、NSTEMI組、UA組ETAmRNA、E
3、TBmRNA表達(dá)水平均低于同組術(shù)后75d水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),具有可比性。1.2方法1.2.1ET-1的測定ET-1酶聯(lián)免疫分析試劑盒由北京東亞免疫技術(shù)研究所提供。1.2.2外周血單個(gè)核細(xì)胞采集所有患者隨機(jī)采集PCI術(shù)前1h及術(shù)后12h、24h及術(shù)后7d、術(shù)后3個(gè)月靜脈血5mL用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,靜置2h后分離血漿,以3000r/min離心5min,吸取白細(xì)胞層,用生理鹽水稀釋后,緩慢加入5mL淋巴細(xì)胞分離液,以3000r/min離心25min,吸取單個(gè)核細(xì)胞層至EP管,離心4min,棄上清,加入1mL紅細(xì)胞(RBC)裂解液離心4min,棄
4、上清,然后加入200μLRNAfree水溶解沉淀。1.2.3總RNA提取取50μL單個(gè)核細(xì)胞溶液按硫氰酸胍-酚-氯仿法抽提總RNA,置入-70℃冰箱保存。1.2.4一步法半定量RT-PCR操作參照TaKaRa大連寶生物公司一步法RT-PCR試劑盒說明書進(jìn)行。引物由上海生物工程公司合成。ETA引物序列:上游:5’-CACTGGTTGGATGTGTAATC-3’;下游:5’-GATACACCAGTAACTAGAGGC-3’,367bp;ETB引物序列:上游:5’-TCAACACGGTTGTGTCCTGC-3’;下游:5’-TTCTAACCACCGACAAGTCA-3’,5
5、29bp;β-actin引物序列:上游:5’-TGTGCTACGTCGCCCTGGACTTG5G-3’;下游:5’-GAGGTAGGACCGGAGCGACAGGTG-3’,263bp。取擴(kuò)增產(chǎn)物上樣4μL,用1.5%的瓊脂糖凝膠電泳,用SynGene公司成像系統(tǒng)進(jìn)行成像。所得條帶用scionimmage軟件進(jìn)行灰度值的半定量?! ?.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS16.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,多組間比較采用方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示,采用χ2檢驗(yàn)。以P0.05),但均高于對照組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意
6、義(P0.05);術(shù)后3個(gè)月STEMI組、NSTEMI組、UA組ET-1水平均低于同組術(shù)后7d水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。見表1。2.2各組PCI治療前后ETAmRNA的表達(dá)情況PCI術(shù)前1hSTEMI組、NSTEMI組、UA組ETAmRNA、ETBmRNA表達(dá)水平均高于對照組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);術(shù)后3個(gè)月STEMI組、NSTEMI組、UA組ETAmRNA、ETBmRNA表達(dá)水平均低于同組術(shù)后7d水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P [3]MongeJC.Neurohormonalmarkersofclinicaloutcomeincardiova
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