微波輔助提取虎杖中白藜蘆醇工藝探究

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1、微波輔助提取虎杖中白藜蘆醇工藝探究  【摘要】目的:優(yōu)選微波輔助提取虎杖中白藜蘆醇的最佳工藝。方法:用紫外分光光度法測定白藜蘆醇的含量,并以白藜蘆醇的提取率為參考指標(biāo),通過單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn)方法對微波輔助提取法(MAE)提取虎杖中白藜蘆醇的最佳工藝進(jìn)行研究。結(jié)果:經(jīng)過正交實(shí)驗(yàn)得到從虎杖白藜蘆醇的最佳工藝為:微波輔助作用時(shí)間15min以70%的乙醇為提取劑,料液比1:30,微波輔助功率為500W。結(jié)論:該實(shí)驗(yàn)確定的最佳提取工藝簡便、快速、準(zhǔn)確,靈敏度高和重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。【關(guān)鍵詞】虎杖白藜蘆醇微波輔助提取正交

2、實(shí)驗(yàn)紫外分光光度法虎杖別名花斑竹、酸筒桿、酸桶筍、酸湯梗、川筋龍、斑杖根,為蓼科植物虎杖Polygonum11cuspidatum,的干燥根莖和根。多生于山谷、溪旁或岸邊,分布在我國中部及南部。產(chǎn)于江西、福建、云南、四川、貴州等地。藥理作用:(1)對心血管系統(tǒng)的影響:強(qiáng)心擴(kuò)血管作用;抑制血小板聚集、抗血栓;改善微循環(huán)、抗休克作用;降血脂;(2)對呼吸系統(tǒng)的影響:鎮(zhèn)咳、平喘作用;(3)對消化系統(tǒng)的影響:胃腸道作用、保肝用;(4)止血抗炎作用;(5)鎮(zhèn)靜作用;(6)修復(fù)損傷的DNA及保護(hù)大腦皮層神經(jīng)元功能、對酶

3、活性抑制作用、對內(nèi)分泌的影響、對基因表達(dá)的影響、利尿作用等[1]。研究結(jié)果表明虎杖含有如下多種化學(xué)成分:含有大黃素、大黃素-6-甲醚、大黃素-8-單甲醚、大黃酚、大黃酸及蒽苷大黃素-6-甲醚-8-β-D-葡萄糖苷和大黃素-8-β-D-葡萄糖苷等[2];含有白藜蘆醇和白藜蘆醇苷(虎杖苷).其中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷為主要藥用成分。白藜蘆醇(3,4,5,-三羥基二苯乙烯;trans-resveratrol)是一種活性多酚物質(zhì),在虎杖、葡萄、花生、毛穗藜蘆、毛脈酸模等植物中存在[3]。白藜蘆醇的功能作用:首先,具有

4、抗癌作用,可用于預(yù)防與治療慢性炎癥和癌癥。對腫瘤的起始、促進(jìn)、發(fā)展三個(gè)階段均有抑制作用,可作為天然的化學(xué)防癌劑。其次,在心血管方面的作用。適量飲用葡萄酒有利于心血管健康的觀點(diǎn)已得到普遍認(rèn)同。另外,白藜蘆醇還具有抗氧化、抗自由基,保護(hù)肝臟,抗菌,消炎,抗過敏等多種有益人體的功能作用[4]。目前,國內(nèi)在白黎蘆醇的提取方面研究較多。一般是采用有機(jī)溶劑提取,如乙醇、甲醇、丙酮等,以丙酮提取率最高。提取方式有浸漬提取、回流提取、超聲提取等,硅膠柱層析或大孔吸附樹脂吸附分離的方法來提純白黎蘆醇;檢測多以高效液相色譜。本

5、實(shí)驗(yàn)以微波輔助提取,具有省時(shí)、方便等作用,微波輔助提取中藥有效成分具有選擇性好、提取純度高和高效快速的特點(diǎn),已在中草藥化學(xué)成分提取方面得到廣泛應(yīng)用。11有關(guān)虎杖中白藜蘆醇、白藜蘆醇苷和大黃素含量測定方法的研究報(bào)道較多,主要有分光光度法、膠束薄層色譜法、電化學(xué)發(fā)光法、高速逆流色譜法、高效液相色譜等[5-6],其中以分光光度法最為簡單方便。本研究探討微波輔助提取虎杖中白藜蘆醇的工藝研究,并建立測定白藜蘆醇含量的紫外分光光度法,旨在為虎杖的藥理作用研究以及科學(xué)合理利用提供試驗(yàn)依據(jù)。1實(shí)驗(yàn)部分1.1原料、試劑與儀器

6、(1)實(shí)驗(yàn)原料、試劑;虎杖,產(chǎn)地:福建三明;95%乙醇;乙酸乙酯;石油醚;均為化學(xué)純;白藜蘆醇,產(chǎn)地:美國,分析純。(2)實(shí)驗(yàn)儀器;TR-02型藥材粉碎機(jī):(武義縣屹立工具有限公司);LWMC-205型可調(diào)功率微波化學(xué)反應(yīng)器:(南京陵江科技開發(fā)有限責(zé)任公司);SHB-III循環(huán)水式多用真空泵:(鄭州長城科工貿(mào)有限公司);UV-2550型紫外分光光度計(jì):(廈門精藝興業(yè)科技有限公司);FA1604N型電子天平:(上海精密科學(xué)儀器有限公司);RE-52B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:(上海博經(jīng)經(jīng)貿(mào)公司);SYP智能型玻璃恒溫水浴鍋

7、:(鞏義市予華儀器責(zé)任有限公司);玻璃儀器氣流烘干器:(鞏義市予華儀器責(zé)任有限公司)722S-可見分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司。1.2分析方法11本方法采用紫外分光光度計(jì)在306.4nm出測量所提取液的吸光度。一定的波長下有吸收峰進(jìn)行測定。白藜蘆醇的英文名Resveratrol簡寫RES,分子式C14H12O3,分子量228.25,無味、白色晶體難溶于水,易溶于乙醇,甲醇,丙酮等有機(jī)溶劑,本實(shí)驗(yàn)以白藜蘆醇為對照品,以乙醇為溶劑,采用分光光度法在306.4nm波長下直接進(jìn)行白藜蘆醇吸光度值的測定,從而

8、分析計(jì)算其含量。1.3實(shí)驗(yàn)步驟11(1)備料;把虎杖根莖烘干、把干凈的虎杖用粉碎機(jī)粉碎,過40目篩后放存儲(chǔ)瓶中備用。(2)配制溶液;分別配制45%、55%、65%、70%、75%、80%的乙醇溶液:乙酸乙酯:水為1:1的溶液。(3)供試品溶液制備;按照實(shí)驗(yàn)方案準(zhǔn)確稱取1.0g若干份虎杖根莖粉末,分別置于三角錐形瓶中,加入相應(yīng)濃度和體積的乙醇浸泡6小時(shí),置于微波化學(xué)反應(yīng)器中按方案提供的條件提取,冷卻室溫后抽濾;加石

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