論虎杖白藜蘆醇的提取工藝及檢測(cè)方法

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1、論虎杖白藜蘆醇的提取工藝及檢測(cè)方法摘要:介紹了虎杖中白藜蘆醇的提取以及檢測(cè)方法的研究進(jìn)展，為進(jìn)一步開發(fā)利用提供了依據(jù)。關(guān)鍵詞:虎杖白藜蘆醇提取工藝檢測(cè)方法Abstract:Inthispaper，theadvancesintheresearchofextractiontechnologyanddeterminationofresveratrolfromPolygonumcuspidatumoreexploitationinthefuture.Keycuspidatum;Resveratrol;Extractiontechno

2、logy;Determination　　白藜蘆醇(3,4,5,-三羥基二苯乙烯；trans-resveratrol)是一種活性多酚物質(zhì)，在虎杖、葡萄、花生、毛穗藜蘆、毛脈酸模等植物中存在。白藜蘆醇被認(rèn)為是一種植物抗毒素，在植物受到病原性進(jìn)攻和環(huán)境惡化時(shí)產(chǎn)生的。其藥理作用為：抗菌、抗氧化、預(yù)防心臟病、抗癌、抗血小板凝聚、保護(hù)肝臟、雌激素作用、防輻射、免疫調(diào)節(jié)、抗艾滋病活性等［1～3］。白藜蘆醇已被喻為繼紫杉醇之后又一新的綠色抗癌藥物，它在食品、醫(yī)藥等方面應(yīng)用也越來越廣。在日本，已將含白藜蘆醇植物提取物作為食品添加劑使用；在我國

3、，也有將白藜蘆醇植物提取物制成降脂、美容、減肥和抗癌天然保健食品及膠囊［4］。本文回顧了近年來虎杖白藜蘆醇的提取工藝以及檢測(cè)方法的研究進(jìn)展。1提取方法　　1.1酶提取法虎杖中除了含有白藜蘆醇外，還含有白藜蘆醇苷、蒽醌類、二苯乙烯類、多糖、氨基酸等物質(zhì)，白藜蘆醇苷在一定的條件下可以通過酶解脫去葡萄糖基而轉(zhuǎn)化為白藜蘆醇，酶解可以通過加入生物酶或利用植物內(nèi)微生物進(jìn)行，采用酶法從虎杖中提取白藜蘆醇已有專利報(bào)道［5～8］，向海艷等［9］用纖維素酶酶解后提取，虎杖中白藜蘆醇苷在纖維素酶作用下，轉(zhuǎn)化成白藜蘆醇，使白藜蘆醇得率大大提高。其白

4、藜蘆醇得率比直接醇提法提高近5倍。但這些方法存在轉(zhuǎn)化率不高、成本較高、需時(shí)較長(zhǎng)等不足?！　?.2微波提取法李核等［10］用微波輔助萃取法，研究了溶劑類型及萃取時(shí)間和溫度、微波功率、虎杖顆粒大小和水分等主要操作參數(shù)對(duì)虎杖中白藜蘆醇產(chǎn)率的影響，得到最佳萃取條件為：甲醇和丙酮為最佳萃取劑，溫度80℃，時(shí)間15min，微波功率800～900Pa，萃取時(shí)間90min，萃取物中白藜蘆醇的含量高達(dá)33％；曹庸等［17］采用超臨界CO2流體技術(shù)對(duì)虎杖中白藜蘆醇進(jìn)行萃取，獲得初步萃取條件：萃取釜壓力25MPa，溫度50℃；解析釜壓力5.7MP

5、a，溫度46℃，用無水乙醇及CY(自制)作為改性劑，同時(shí)用HPLC對(duì)萃取物進(jìn)行白藜蘆醇含量測(cè)定。超臨界二氧化碳具有性質(zhì)穩(wěn)定、不易燃、無毒、不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)，但有一定的局限性：它主要適用低極性物質(zhì)萃取，壓力溫度選擇也較小，在生產(chǎn)應(yīng)用上存在設(shè)備一次性投資大，維護(hù)費(fèi)用高［18］等不足。2檢測(cè)分析　　2.1HPLC周建軍等［19］采用色譜柱為EclipseXDBC8柱，流動(dòng)相為乙腈-水，流速為1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為303nm。測(cè)出漢中地區(qū)虎杖中白藜蘆醇的含量；周春山等［20］選用自填裝ODS-C18色譜柱(200mm×4.6mm

6、,5μm)，以甲醇-水(41:59)為流動(dòng)相，流速為0.6ml·min-1，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為303nm。白藜蘆醇在0.06～0.30μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。朱鴻津［21］采用HPLC法測(cè)定虎杖中白藜蘆醇含量，其間以聚酰胺柱對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，獲得較好分離度和高回收率。測(cè)定條件:ODS-C18柱，流動(dòng)相為甲醇-水(35∶65)，檢測(cè)波長(zhǎng)為300nm。白藜蘆醇在0.420μg范圍內(nèi)具良好的線性關(guān)系，曹庸等［22］采用色譜柱:島津Shim-parkCLC-ODS(150mm×4.6mm,5μm)，以乙腈-水(體積比為41∶59)溶

7、液為流動(dòng)相，流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)306nm。在此條件下，樣品溶液進(jìn)樣質(zhì)量濃度范圍在500～1000μg/ml時(shí)，白藜蘆醇含量與峰面積呈良好的線性關(guān)系。朱立賢等［23］測(cè)定虎杖中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的含量。色譜柱為L(zhǎng)ichrospherC18，流動(dòng)相為甲醇-水-醋酸，梯度洗脫，流速0.3ml·min-1，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)305nm，線性范圍為：0.0396～0.3564μg。該法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，適用于虎杖中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的定量分析?！　?.2TLC周國海等［24］用薄層掃描分析測(cè)定虎杖白藜蘆醇含量:

8、以硅膠G為薄層吸附劑，氯仿∶丙酮∶醋酸∶水(4∶4∶0.5∶0.2)為展開劑，在紫外燈(365nm)下觀察熒光斑點(diǎn)，在365nm處并進(jìn)行掃描測(cè)定，并對(duì)虎杖莖、根、葉進(jìn)行了含量測(cè)定，虎杖鮮根莖中含量達(dá)0.548%。傅紅等［25］建立一種虎杖中白藜蘆醇的含量測(cè)定方法，以石油醚-醋酸丁酯-甲醇-