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《gb 5009.272-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的測定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB5009.272—2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的測定2016-12-23發(fā)布2017-06-23實施中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會發(fā)布國家食品藥品監(jiān)督管理總局GB5009.272—2016前言本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T21493—2008《大豆磷脂中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的測定》和NY/T1798—2009《植物油脂中磷脂組分含量的測定高效液相色譜法》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T21493—2008和NY/T1798—2009相比,主要變化如下:———標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷
2、脂酰肌醇的測定”;———統(tǒng)一了標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍。ⅠGB5009.272—2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的測定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了高效液相色譜法測定大豆磷脂、大豆油、菜籽油、花生油、葵花籽油中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇三種組分含量的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于含油大豆磷脂、脫油大豆磷脂、大豆油、菜籽油、花生油、葵花籽油中磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)的測定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于大豆溶血磷脂酰膽堿及大豆溶血磷脂乙醇胺的測定。2原理試樣直接溶解或經(jīng)三氯甲烷提取,氨基固相萃取柱凈化后,高效液相色譜分離,紫外檢測器檢測,外標(biāo)法定量。3試劑和
3、材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的一級水。3.1試劑3.1.1正己烷[CH3(CH2)4CH3]:色譜純。3.1.2異丙醇[(CH3)2CHOH]:色譜純。3.1.3乙酸(CH3COOH):色譜純。3.1.4三氯甲烷(CHCl3)。3.1.5乙醚(CH3CH2OCH2CH3)。3.1.6甲醇(CH3OH):色譜純。3.2試劑配制3.2.1乙酸水溶液(1mL/100mL):吸取1mL乙酸,加入適量水中,用水定容至100mL。3.2.2正己烷-異丙醇-乙酸水溶液混合溶液(8+8+1):取正己烷80mL,異丙醇80mL,乙酸水溶液10mL,混勻。3.2.
4、3乙酸-乙醚混合溶液(2+144):取乙酸4mL和乙醚288mL,混勻。3.2.4三氯甲烷-異丙醇混合溶液(2+1):取三氯甲烷200mL和異丙醇100mL,混勻。3.3標(biāo)準(zhǔn)品3.3.1磷脂酰膽堿(CAS號:8002-43-5):純度大于95%。3.3.2磷脂酰乙醇胺(CAS號:39382-08-6):純度大于95%。1GB5009.272—20163.3.3磷脂酰肌醇(CAS號:97281-52-2):純度大于95%。3.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制磷脂標(biāo)準(zhǔn)混合溶液:分別準(zhǔn)確稱取20mg磷脂酰膽堿、20mg磷脂酰乙醇胺與10mg磷脂酰肌醇(精確至0.1mg),用正己烷-異丙醇-乙酸水溶液混合溶液
5、溶解并定容到10mL,此時磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇濃度分別為2mg/mL、2mg/mL、1mg/mL。分別準(zhǔn)確吸取此溶液0.25mL、1.25mL、2.50mL、3.75mL,并用正己烷-異丙醇-乙酸水溶液混合溶液定容到5mL。配制的混合標(biāo)準(zhǔn)液中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺濃度分別為0.1mg/mL、0.5mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL,磷脂酰肌醇濃度分別為0.05mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL、0.75mg/mL、1mg/mL。密封后低于-16℃保存?zhèn)溆谩?.5材料氨基固相萃取柱:1000mg/6mL,或性能相當(dāng)者。4儀器和設(shè)備4
6、.1液相色譜儀:帶紫外檢測器。4.2分析天平:感量1mg和0.1mg。4.3具塞試管:100mL。4.4渦旋振蕩器。4.5旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:轉(zhuǎn)速10r/min~120r/min。4.6離心機(jī):轉(zhuǎn)速至少5000r/min。4.7氮氣濃縮裝置。5分析步驟5.1試樣制備5.1.1大豆磷脂試樣制備及前處理試樣應(yīng)避光放在密閉和防潮的容器內(nèi)。樣品在使用前充分混勻。依據(jù)樣品中磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇含量,稱取樣品15mg~50mg(精確至0.1mg),用正己烷-異丙醇-乙酸水溶液混合溶液溶解并定容至5mL,經(jīng)0.45μm微孔膜過濾。密封后低于-16℃保存?zhèn)溆谩?.1.2油脂試樣制備及前處理試
7、樣按GB/T5524進(jìn)行扦樣和分樣,分取50g,裝入樣品瓶備用。準(zhǔn)確稱取油脂試樣4g(精確至1mg),置于100mL具塞試管中,加入50.0mL三氯甲烷,渦旋混合。先用1.0mL三氯甲烷活化氨基固相萃取柱,將10.0mL油脂三氯甲烷溶液移入氨基硅膠固相萃取柱中,然后依次用2.0mL三氯甲烷-異丙醇混合溶液和3.0mL的乙酸-乙醚混合溶液淋洗小柱,然后用3.0mL甲醇洗脫出磷脂,再重復(fù)4次,收集洗脫液。洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,在45℃蒸至近干,轉(zhuǎn)為氮吹,吹干后加
