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《心梗、腦梗、心肌損傷.ppt》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、心肌梗塞 心肌損傷 腦梗塞冠狀動脈結(jié)扎過程：大鼠，ip戊巴比妥鈉45ml/kg麻醉，氣管內(nèi)插管，接人工呼吸機(jī)（65次/分，8-10ml/次）。連接微電腦生理記錄儀，描記正常II導(dǎo)聯(lián)心電圖（ECG）。沿前正中線切開胸骨前皮膚，暴露2-5肋，連同肋骨一起結(jié)扎肋下動脈，緊靠胸骨旁左緣處用純頭剪刀剪開5、4、3肋。暴露心臟，輕捏右胸廓，抵壓左胸背部肋骨擠出心臟。找到肺動脈圓椎，撥起左心房（耳）根部。結(jié)扎冠狀動脈：用5/0號絲線，在肺動脈圓椎右緣、平左心耳下緣1-2mm處冠狀靜脈走行處淺層心肌用小圓針穿線、結(jié)扎。記錄結(jié)扎時間。將心臟納入胸腔，縫合切口，停止人工呼吸。記錄ECG，觀察S
2、-T段變化。缺血6小時時，再次記錄ECG。取下心臟，用NBT染色法測心肌梗塞范圍，心室內(nèi)取血，離心制備血清，用比色法測血清乳酸脫氫酶（LDH）含量。心梗測定指標(biāo)心電圖（ECG）記錄：用微電腦生理記錄儀記錄結(jié)扎前、結(jié)扎后10min、結(jié)扎后6h的II導(dǎo)聯(lián)ECG,觀察S-T段變化。心肌梗塞范圍測定：于結(jié)扎后6h取下心臟，剪去心房，將心室橫切為3-4片，立即置0.5%NBT(溶在0.1mmol/L磷酸緩沖液中，pH7.4)溶液中，37℃孵2min,以拒染部分為梗塞區(qū)，藍(lán)染部分為未梗塞區(qū)（見圖1），剪下拒染部分心肌，稱重，計算該部分心肌占心室全重的%，作為心肌梗塞范圍，如下式：心肌梗
3、塞范圍/%=×100%冠狀動脈結(jié)扎部位大鼠心梗NBT染色大鼠心梗ECG變化心室內(nèi)壓及心室收縮功能曲線腦缺血模型的復(fù)制方法頸外血管阻斷法（雙側(cè)頸總動脈夾閉，沙土鼠結(jié)扎一例頸總動脈，雙側(cè)頸總動脈夾閉加放血,雙側(cè)頸總動脈夾閉加一例或兩側(cè)椎動脈結(jié)扎)顱內(nèi)動脈阻塞法主要是大腦中動脈的阻塞(直接暴露大腦中動脈電凝或結(jié)扎),穿線法阻斷大腦中動脈（0．2mm的尼龍線）栓子法:腦表面血管阻塞法血管周圍注射促凝劑應(yīng)用光敏劑MCA解剖大鼠大腦中動脈（MCA） 血栓形成模型模型制備：大鼠術(shù)前禁食12小時。0.3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉。右側(cè)臥位固定，沿左眼外眥與左外耳道連線中點垂
4、直線做一約2cm縱切口，鈍性分離顳肌，咬去顴弓，撐開顳頜關(guān)節(jié)，在蝶骨大翼處用牙科鉆打薄骨質(zhì)，牙科探針挑去骨片，開一約4mm×3mm骨窗，可見大腦中動脈沿嗅束垂直走行。取3mm長4號手術(shù)絲線，浸50%FeCl310μL，將此絲線置MCA嗅束-大腦下靜脈之間，即置MCA中段表面，損傷血管誘導(dǎo)血栓形成，每5分鐘重置一根，20分鐘后除去絲線，用生理鹽水洗凈創(chuàng)面，縫合皮膚傷口。指標(biāo)檢測：神經(jīng)損傷癥狀檢測：術(shù)后待大鼠清醒后及24小時進(jìn)行腦缺血行為評分，按以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行：尾部倒提時，患側(cè)上肢內(nèi)收，肩外旋，4分；向?qū)?cè)推左（右）上肢，患側(cè)抵抗力下降，1-3分；將上肢置金屬網(wǎng)上，患側(cè)肌張力下降
5、，1-3分；向患側(cè)旋轉(zhuǎn)，1分?？偡?1分。梗塞面積：術(shù)后24小時將大鼠斷頭取腦，去除小腦，肉眼可見MCA中段呈黑色，血栓形成。沿冠狀面切四刀，切成3mm厚腦片，將腦片置2%TTC(紅四氮唑）溶液中，37℃溫孵30min染色,用圖象分析儀攝像，計算梗死灶(未著色區(qū))面積，腦梗塞面積以梗死灶面積與腦總面積百分比表示。腦含水量：腦片TTC染色攝像后，沿正中矢狀線將腦片切為左右兩半，取左側(cè)(病變區(qū))及右側(cè)(無病變區(qū))皮質(zhì)，分別稱取左右大腦的濕重，60℃96h干至恒重，稱干重，計算腦含水量。腦含水量＝（濕重－干重）/濕重×100%正常MCA位置氯化鐵致右側(cè)MCA血栓形成大鼠腦梗TTC
6、染色未著色區(qū)為梗塞區(qū)異丙腎上腺素 誘發(fā)大鼠心肌肥厚SD大鼠，體重136.5±11.2g，隨機(jī)分為4組：生理鹽水對照組，異丙腎上腺素(ISO)組，給藥前準(zhǔn)確稱大鼠體重，麻醉狀態(tài)下描記大鼠標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)、單極加壓肢體導(dǎo)聯(lián)及CR和CL胸前導(dǎo)聯(lián)ECG，將心電圖異常的動物剔除，然后ISO組用ISO（0.02mg/kg）sc，每日2次，共6wk。給藥6wk時，末次給藥24h后，在麻醉狀態(tài)下描記心電圖，然后迅速剖取心臟，用濾紙拭干血液，稱取全心重、心室重、左心室重、右心室重和室間隔重，以上均為濕重，測量右心室壁厚、左心室游離壁厚和室間隔厚，取左心室心尖部分組織做常規(guī)病理切片，余左心室組織置4℃
7、冰箱保存，待后供SOD活性和MDA含量測定用。結(jié)果大鼠心肌肥厚模型中，持續(xù)給異丙腎上腺素6周，可使大鼠的心電圖J點異常抬高，病檢顯示大鼠心肌細(xì)胞廣泛損傷，同時使全心重/體重（hw/bw）、左心室重/體重（lvw/bw）和室間隔重/體重（vsw/bw）增加，左室游離壁和室間隔厚度增加，異丙腎上腺素 誘導(dǎo)大鼠心肌肥厚 病理組織學(xué)變化光鏡下ISO組大鼠心肌損害多表現(xiàn)心肌灶性壞死融合，在壞死灶處可見毛細(xì)血管擴(kuò)張，間質(zhì)水腫，白細(xì)胞和組織細(xì)胞浸潤。異丙腎上腺素性心肌損傷
