涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查

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1、涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查　　摘要：為了掌握近年來(lái)甘肅省武威市涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)豬偽狂犬病感染情況，2010-2012年，在全區(qū)46個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)（點(diǎn)/次）共采集1899份血清，用ELISA檢測(cè)試劑盒進(jìn)行了豬偽狂犬病抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示，抗體陽(yáng)性數(shù)148份，抗體陽(yáng)性率7.79%，其中2010-2012年抗體陽(yáng)性率分別為9.12%、8.70%、4.38%。結(jié)果表明，涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)不同程度地受到豬偽狂犬病的野毒感染。關(guān)鍵詞：豬偽狂犬??；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；調(diào)查中圖分類號(hào)：S858.28文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編

2、號(hào)：1007-273X（2013）10-0043-02豬偽狂犬病是由偽狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus，PRV）引起的多種家畜和野生動(dòng)物的一種急性傳染病[1，2]。PRV感染豬主要通過(guò)母豬胎盤和公豬精液垂直傳播，同時(shí)也可水平傳播。該病可引起種公豬的不育、妊娠母豬的流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和木乃伊胎，可引起新生仔豬的大量死亡而造成養(yǎng)豬業(yè)的較大經(jīng)濟(jì)損。20世紀(jì)90年代以來(lái)分子生物學(xué)和基因工程技術(shù)取得了重大進(jìn)展，研制出了豬偽狂犬病病毒基因缺失疫苗，應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)gE抗體，可以區(qū)分疫苗抗體和野毒抗體

3、，在近20年來(lái)有效阻止和控制了豬偽狂犬病的發(fā)生[3]。4武威市涼州區(qū)是全國(guó)生豬調(diào)出大縣，2012年底，生豬飼養(yǎng)量達(dá)73.9萬(wàn)頭，規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)達(dá)到1.9萬(wàn)戶，養(yǎng)豬近55萬(wàn)頭，占豬飼養(yǎng)量的75%。因此，做好規(guī)模豬場(chǎng)豬偽狂犬病血清學(xué)檢測(cè)，能夠及時(shí)清除隱性帶毒豬，不斷提高豬場(chǎng)的養(yǎng)殖效益。為了解甘肅省武威市涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)偽狂犬病的流行情況，在2010-2012年期間共采集規(guī)模豬產(chǎn)場(chǎng)血清1899份，進(jìn)行豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查，現(xiàn)將調(diào)查結(jié)果報(bào)告如下。1材料與方法1.1待檢血清2010-2012年在涼州區(qū)養(yǎng)豬場(chǎng)46個(gè)場(chǎng)

4、點(diǎn)次，共采集1899份血清。1.2試劑豬偽狂犬gE-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。1.3方法ELISA方法[4]：①取出抗原包被板，在每孔中加入50μL稀釋液、50μL陰陽(yáng)性對(duì)照和待檢血清，陰性對(duì)照設(shè)3孔，陽(yáng)性對(duì)照設(shè)2孔。②輕輕混勻，用封條封閉微量反應(yīng)板，置室溫孵育1h。③用洗滌液洗板3次，300μL/孔，最后一次將板中殘留洗滌液扣拍到吸水材料上。④每孔加100μL辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗PRVgE抗體，室溫孵育20min。⑤洗滌3次，方法同③。⑥每孔加入1004μLTMB底物溶液，避光

5、且室溫孵育15min。⑦每孔加入50μL終止液，酶標(biāo)儀上測(cè)各孔OD650nm值。⑧試驗(yàn)成立條件是陰性對(duì)照0D650nm平均值減去陽(yáng)性對(duì)照0D650nm平均值必須≥0.3。1.4判斷標(biāo)準(zhǔn)通過(guò)計(jì)算樣品與陰性對(duì)照的比例（S/N）來(lái)確定豬偽狂犬病病毒抗體的有無(wú)。如果S/N值≤0.6，樣品判為PRVgE抗體陽(yáng)性；如果S/N值>0.6但≤0.7，樣品應(yīng)重新測(cè)定；如果S/N值>0.7，樣品判為PRVgE抗體陰性。2結(jié)果2010-2012年共檢測(cè)本地養(yǎng)豬場(chǎng)46個(gè)場(chǎng)次，1899份樣品，抗體陽(yáng)性數(shù)148份，抗體陽(yáng)性率7.

6、79%，其中2010-2012年抗體陽(yáng)性率分別為9.12%、8.70%、4.38%（表1）。3討論（1）通過(guò)此次調(diào)查，結(jié)果表明涼州區(qū)養(yǎng)豬場(chǎng)不同程度的受到豬偽狂犬病毒的感染，涼州區(qū)的豬偽狂犬病gE抗體陽(yáng)性率為7.79%。據(jù)調(diào)查，涼州區(qū)只有部分規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和種豬場(chǎng)使用豬偽狂犬病毒gE缺失疫苗，但是還有部分豬場(chǎng)豬偽狂犬病毒感染率比較高，建議豬偽狂犬病毒陽(yáng)性豬場(chǎng)要進(jìn)行定期監(jiān)測(cè)普查，及時(shí)清除野毒感染豬，使豬群逐步得到凈化。4（2）豬免疫偽狂犬病毒gE基因缺失疫苗后，配合使用豬偽狂犬病ELISAgE抗體試劑盒，進(jìn)行

7、抗體檢測(cè)，能夠區(qū)分免疫抗體和野毒感染，清除野毒感染的豬，使豬群得到凈化，該方法操作簡(jiǎn)單、特異、敏感、快速、準(zhǔn)確，在凈化豬偽狂犬病中起到了很重要的作用。（3）豬感染偽狂犬病后主要表現(xiàn)為母豬繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)疾病綜合征（PRDC），給豬場(chǎng)造成很大的損失，凈化該病以后母豬繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)疾病綜合征能夠得到很好的改善，顯著提高生產(chǎn)效益。參考文獻(xiàn)：[1]費(fèi)恩閣，李德昌，丁壯，等.動(dòng)物疫病學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2004.205-209.[2]殷震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)，[M].第2版.北京：北京科學(xué)出版

8、社，1997.998-1009.[3]王金花，丁秀丹，武彤.豬偽狂犬病的新特點(diǎn)及免疫凈化措施[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn)，2009，10：124-124.[4]王科文，楊漢春.我國(guó)重點(diǎn)養(yǎng)豬區(qū)域偽狂犬病野毒感染血清學(xué)調(diào)查報(bào)告[J]，養(yǎng)豬，2010（02）：45-47.4