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《分子診斷學整理【江大京江版】》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、原核生物基因組原核生物主要包括、細菌、支原體、立克次體、衣原體、螺旋體、放線菌、藍綠藻等?有關質(zhì)粒按質(zhì)粒的功能分類:致育質(zhì)粒??????F質(zhì)粒)編碼性菌毛,介導細菌之間的接合傳遞;耐藥性質(zhì)粒????R質(zhì)粒)??編碼細菌對抗菌藥物或重金屬鹽類的耐藥性;毒力質(zhì)粒??????Vi質(zhì)粒)編碼與該菌致病性有關的毒力因子;細菌素質(zhì)粒????????????編碼細菌產(chǎn)生細菌素;代謝質(zhì)粒??????????????編碼產(chǎn)生相關的代謝酶。按復制機制分類:1、嚴緊控制型拷貝數(shù)少,一般<10個,分子量大;?調(diào)節(jié)因子是蛋白質(zhì),復制受限,受染色體DNA
2、復制系統(tǒng)的控制;?嚴謹控制機理(低拷貝原因),認為是該質(zhì)??梢援a(chǎn)生阻遏蛋白,反饋抑制自身DNA合成。2、松弛控制型拷貝數(shù)多,10-200個,分子量??;調(diào)節(jié)因子是RNA,復制不受染色體DNA復制系統(tǒng)限制基因工程使用松弛型(高拷貝數(shù))質(zhì)粒,以獲得較多的基因產(chǎn)物。性質(zhì):1、轉(zhuǎn)移性:可以通過轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導或接合作用而由一個細菌細胞轉(zhuǎn)移到另一個細菌細胞中,使兩個細胞都成為帶有質(zhì)粒的細胞;質(zhì)粒轉(zhuǎn)移時,它可以單獨轉(zhuǎn)移,也可以攜帶著染色體(片段)一起進行轉(zhuǎn)移,所以它可成為基因工程的載體。2、質(zhì)粒具有選擇性標記:質(zhì)粒有抗藥性基因、營養(yǎng)缺陷型基因、抗
3、重金屬鹽基因等多種選擇性標記;3、質(zhì)粒的不相容性:同一類群的不同質(zhì)粒一般不能在同一菌株內(nèi)穩(wěn)定共存;4、自主復制性:能獨立于宿主染色體DNA外獨立復制(但也必須在宿主細胞內(nèi)才能復制);質(zhì)粒已成為分子克隆的有用工具,是目的DNA的載體。載體質(zhì)粒大多是在天然質(zhì)?;A上經(jīng)人工構建而成,質(zhì)粒的一些特點:1、有限制性核酸內(nèi)切酶單一切口,可用以重組外源DNA;2、有篩選標記,如抗藥基因等;3、插入外源DNA后,仍能轉(zhuǎn)化宿主細胞,并能復制。質(zhì)粒基因轉(zhuǎn)移的方式:??1、接合作用??當細胞與細胞、或細菌通過菌毛相互接觸時,質(zhì)粒DNA從一個細胞(細
4、菌)轉(zhuǎn)移至另一細胞(細菌)的DNA轉(zhuǎn)移稱為接合作用2、轉(zhuǎn)化作用??通過自動獲取或人為地供給外源DNA,使細胞或培養(yǎng)的受體細胞獲得新的遺傳表型,稱為轉(zhuǎn)化作用3、轉(zhuǎn)導作用?當病毒從被感染的(供體)細胞釋放出來、再次感染另一(受體)細胞時,發(fā)生在供體細胞與受體細胞之間的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組即為轉(zhuǎn)導作用4、轉(zhuǎn)染作用??通過感染方式將外來DNA引入宿主細胞,并導致宿主細胞遺傳性狀改變的過程稱為轉(zhuǎn)染(transfection)。轉(zhuǎn)染是轉(zhuǎn)化的一種特殊形式。???病毒基因組完整的病毒顆粒包括:衣殼、基因組(DNA或RNA)、被膜、病毒顆粒中的
5、其他內(nèi)容物?病毒分段基因組:流感病毒屬分段RNA病毒意義:a)降低包裝壓力b)降低了造成斷裂的可能性,提高編碼能力?c)有分段基因組的病毒一般感染效率較低,只有全部基因組核酸片段存在時,病毒才具有感染能力。植物病毒d)由于分段基因組易發(fā)生重組,故病毒容易變異。?病毒基因組特點:1、5‘的帽子和3’的poly(A)尾結(jié)構2、末端重復序列結(jié)果:粘性末段、正/反向互補序列、長末端重復序列;3、高效基因組:排列緊密很少間隔區(qū),不僅非編碼序列少,而且有重疊基因的存在;4、分段基因組:易重組,是病毒易變異的原因。???真核生物基因組染色體
6、的包裝:(1)染色體的一級結(jié)構—核小體(2)染色體的二級結(jié)構—螺線管(3)染色體的三級結(jié)構—超螺線管(4)染色體的四級結(jié)構—染色單體?真核生物染色體基因組一般特征1、真核生物的基因組比較龐大;2、線性雙鏈DNA和二倍體;3、真核細胞基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。4、存在重復序列,重復次數(shù)可達百萬次以上5、基因是不連續(xù)的(斷裂基因)?重復序列:指多拷貝的相同或近似序列的DNA片段一、高度重復序列,按其結(jié)構特點分為三種:1、反向重復序列2、衛(wèi)星DNA由于這類序列的堿基組成不同于其他部份,可用等密度梯度離心法將其與主體DNA分開,因而稱為
7、衛(wèi)星DNA(或隨體DNA)3、較復雜的重復單位組成的重復順序二、中度重復順序:依據(jù)重復順序的長度,中度重復順序可分為:短散布元件和長散布元件??Alu家族:是哺乳動物基因組中含量最豐富的一種中度重復順序家族(短分散元件),Alu家族每個成員的長度約300bp,每個單位長度中有一個限制性內(nèi)切酶AluⅠ的切點(AG↓CT),Alu可將其切成長130和170bp的兩段,因而定名為Alu序列(或Alu家族)?線粒體DNA的遺傳特性:母系遺傳、突變率高、異質(zhì)性、閾值效應、半自助復制與協(xié)同效應閾值效應:mtDNA突變導致氧化磷酸化水平降低
8、,當突變的mtDNA達到一定比例時,使得線粒體總的能量供應降低到維持組織正常功能所需能量的最低值時,才可能引起某組織或器官的功能異常而出現(xiàn)臨床癥狀。?DNA分子多態(tài)性的主要方式?:微衛(wèi)星DNA多態(tài)性(同一位點不同個體之間有不同長度的微衛(wèi)星DNA,STR)、單個核苷酸的變異—單