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主講：張靜靜圖片：徐雙梅馮桂梅資料收集：楊雪崔學(xué)怡姚淑慧幻燈片制作：馮路笛陳希盧雨婷毛海波肉毒梭菌
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2形態(tài)特征
3肉毒梭菌一、肉毒梭菌的生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色肉毒梭菌屬于厭氧性梭狀芽胞桿菌屬，革蘭氏染色陽性(老齡菌是陰性），約為4×1μm的大桿菌，多單在，偶見成雙或短鏈，兩側(cè)平行，兩端鈍園，直桿狀或稍彎曲，芽胞為卵圓形，大于菌體寬度，位于次極端，使菌體呈匙形或網(wǎng)球拍狀，偶有位于中央，常見很多游離芽胞。有4~8根周生鞭毛，運動遲緩，無莢膜。
4病毒因子
52、培養(yǎng)特性最嚴(yán)格的厭氧菌生長最適溫度：28℃～37℃：pH為6.8~7.6，產(chǎn)毒的最適pH為7.8~8.2。產(chǎn)毒培養(yǎng)溫度：不同菌型產(chǎn)毒的最適培養(yǎng)溫度不完全相同。C、D型溫度高些為宜，35℃培養(yǎng)3d即可，而E型菌低溫度長時間培養(yǎng)效果較好。對營養(yǎng)要求不高：在普通培養(yǎng)基上都能生長。肉毒梭狀芽孢桿菌菌落在固體培養(yǎng)基表面上，形成類圓形，邊緣不整齊，約3毫米左右的菌落。菌落半透明，表面一般比較光滑也有的呈顆粒狀，界線不明顯，向外擴散。呈絨毛網(wǎng)狀，常常擴散成菌苔。
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8二、肉毒梭菌的致病性肉毒梭菌能產(chǎn)生外毒素即肉毒毒素（大分子蛋白），根據(jù)毒素的抗原特異性將其分為A、B、C（1、2）、D、E、F、G七個型別。與毒素型別相對應(yīng)，肉毒梭菌也分為同樣的七個型別。其中A、B、E、F四型毒素對人有不同程度的致病性。A型毒素經(jīng)60℃2分鐘加熱，差不多能被完全破壞，而B、E二型毒素要經(jīng)70℃2分鐘才能被破壞；C、D二型毒素對熱的抵抗更大些；C型毒素要經(jīng)過90℃2分鐘加熱才能完全破壞，不論如何，只要煮沸1分鐘或75℃加熱5~10分鐘，毒素都能被完全破壞。肉毒毒素對酸性反應(yīng)比較穩(wěn)定，對堿性反應(yīng)比較敏感。某些型的肉毒毒素在適宜條件下，毒性能被胰酶激活和加強。
9致病物質(zhì)主要依靠神經(jīng)外毒素。其作用機制：肉毒桿菌毒素作用于膽堿能運動神經(jīng)末梢，以某種方式拮抗鈣離子的作用，干擾乙酰膽堿從運動神經(jīng)末梢的釋放，使肌纖維不能收縮。肉毒桿菌毒素不阻斷神經(jīng)興奮的傳播，神經(jīng)和肌肉都沒有興奮性和傳導(dǎo)性的損害。這種作用也稱為化學(xué)去神經(jīng)作用。
10致病機理肉毒毒素是一種神經(jīng)麻痹毒素，主要抑制神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，引起肌肉松弛麻痹，特別是呼吸肌麻痹導(dǎo)致死亡。?肉毒毒素的毒性極強，是目前已知在天然毒素和合成毒劑中毒性最強的生物毒素，據(jù)稱，精制毒素1克能殺死400萬噸小白鼠，一個人的致死量大概1微克左右。肉毒中毒一年四季均可發(fā)生。美國以罐頭發(fā)生中毒較多，日本以水產(chǎn)品較多；我國以發(fā)酵食品（如：臭豆腐、豆瓣醬、豆豉等）發(fā)生中毒較多。
11所致疾病成人肉毒中毒該病是單純性毒素中毒，而非細菌感染引起。多見于食入肉毒毒素食品后，數(shù)小時或數(shù)十小時可出現(xiàn)以神經(jīng)末梢麻痹為主的癥狀，患者出現(xiàn)斜視、復(fù)視、眼瞼下垂，嚴(yán)重的出現(xiàn)吞咽、咀嚼困難、口齒不清，進而因膈肌麻痹而死亡。患者神志清醒，不發(fā)熱，很少有胃腸道癥狀。
12嬰兒肉毒中毒多見于2周~8個月的嬰兒。由于嬰兒腸道的特殊環(huán)境及缺乏拮抗肉毒梭菌的正常菌群，又食入被梭菌污染的食品，該菌在腸道內(nèi)生長繁殖并產(chǎn)生毒素，毒素被吸收而致命。最早出現(xiàn)的癥狀是便秘，吸乳、啼哭無力，其他癥狀與成人肉毒中毒類似。
13三微生物學(xué)檢驗1、取.糞便檢查在顯微鏡檢查可見革蘭陽性芽胞桿菌。2.細菌培養(yǎng)：將可疑食物、嘔吐物或排泄物加熱煮沸20分鐘后，接種于血瓊脂培養(yǎng)基作厭氧培養(yǎng)，可分離出肉毒梭菌。3.毒素試驗（1）動物試驗將檢查標(biāo)本浸出液飼喂動物，或作豚鼠、小白鼠腹腔內(nèi)注射。可引起動物四肢癱瘓而迅速死亡。嬰兒型者則可用嬰兒糞便浸出液作動物試驗。（2）中和試驗將各型抗毒素血清0.5ml注射小白鼠腹腔內(nèi)，隨后接種標(biāo)本0.5ml同時設(shè)對照組，從而判斷毒素和定型。（3）禽眼瞼接種試驗將含有毒素的浸出液0.1～0.3ml，注入家禽眼內(nèi)角下方眼瞼皮下，出現(xiàn)眼瞼閉合、或出現(xiàn)麻痹性癱瘓和呼吸困難，經(jīng)數(shù)十分鐘至數(shù)小時死亡，可作為快速診斷。4.毒素檢測應(yīng)用抗肉毒毒素抗體進行中和試驗，檢查病人血清中肉毒毒素，可對毒素分型。5．肌電圖檢查：有肌纖維顫動、單次刺激反應(yīng)降低，多次刺激電勢反而增高，有短持續(xù)期小波幅多相運動、電勢增加等表現(xiàn)?？勺鳛檩o助診斷。
14四防治原則預(yù)防本病的主要方法：1、加強食品衛(wèi)生管理和監(jiān)督2、對可疑食品可煮沸半小時以上，破壞肉毒毒素。3、對患者早期注射足量的多價肉毒抗毒素，同時加強護理和對癥治療，尤其是維持呼吸功能，降低死亡率。
15臨床應(yīng)用在了解了毒素的結(jié)構(gòu)與功能以及作用機制后，人類開始用毒素來作為有效藥物。肉毒毒素被助惡治療眼瞼痙攣、痙攣性斜頸、痙攣性發(fā)音困難等疾病美容除皺
16去除動態(tài)皺紋的原理將收縮造成皺紋的肌肉麻痹掉，使肌肉不收縮，連帶的也去除了皺紋。一般在注射后三、四天就可以看到效果，一周后效果就很明顯。效用期約三至六個月，平均四個月。若皺紋再出現(xiàn)，視個人需要，可重復(fù)施打。肉毒桿菌毒素除皺還是有一定的并發(fā)癥和副作用，如注射局部有頭痛；抬頭紋處注射不當(dāng)時會發(fā)生瞼下垂；魚尾紋處注射不當(dāng)時會發(fā)生復(fù)視及閉眼不全；因注射劑量不準(zhǔn)確，一側(cè)多、一側(cè)少會發(fā)生不對稱的結(jié)果；進針刺破血管偶而發(fā)生出血或血腫；大劑量、反復(fù)注射可能會引起免疫復(fù)合物疾??；肌肉麻痹的結(jié)果是不能做各種表情
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18副作用盡管如此，肉毒桿菌毒素除皺還是有一定的并發(fā)癥和副作用，如注射局部有頭痛；抬頭紋處注射不當(dāng)時會發(fā)生瞼下垂；魚尾紋處注射不當(dāng)時會發(fā)生復(fù)視及閉眼不全；因注射劑量不準(zhǔn)確，一側(cè)多、一側(cè)少會發(fā)生不對稱的結(jié)果；進針刺破血管偶而發(fā)生出血或血腫；大劑量、反復(fù)注射可能會引起免疫復(fù)合物疾病；肌肉麻痹的結(jié)果是不能做各種表情，有假面具樣感覺；極少數(shù)病人可發(fā)生過敏性休克。
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