需氧和兼性厭氧球菌的鑒定ppt課件

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1、微生物學(xué)檢驗(yàn)需氧和兼性厭氧球菌鑒定返回總目錄本章內(nèi)容第一節(jié)葡萄球菌屬2第二節(jié)鏈球菌屬3第三節(jié)腸球菌屬4第四節(jié)奈瑟菌屬5概述1學(xué)習(xí)目標(biāo)及重點(diǎn)學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.掌握：葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬和奈瑟菌屬的主要生物學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗(yàn)，尤其是它們的鑒定依據(jù)和鑒別要點(diǎn)2.熟悉葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬和奈瑟菌屬的臨床意義本章重點(diǎn)：1.葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬和奈瑟菌屬的主要生物學(xué)特性和微生物學(xué)檢驗(yàn)2.葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬和奈瑟菌屬的臨床意義概述球菌的種類(lèi)很多，根據(jù)革蘭染色性不同分為革蘭陽(yáng)性和革蘭陰性球菌。致病性球菌稱(chēng)病原性球菌主要引起化膿性

2、炎癥又可稱(chēng)為化膿性球菌第一節(jié)葡萄球菌屬葡萄球菌屬細(xì)菌為一類(lèi)觸酶陽(yáng)性的革蘭染色陽(yáng)性球菌，因常堆聚成葡萄串狀而得名。廣泛分布于自然界并構(gòu)成人體的正常菌群。大多非致病，有少部分引起化膿性感染。主要包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血性葡萄球菌等35個(gè)種，17個(gè)亞種一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色本屬菌多為球形，直徑0．5～1．5um。葡萄球菌無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞、無(wú)莢膜（1）在液體培養(yǎng)基上：呈單個(gè)、成雙或短鏈狀排列（2）在固體培養(yǎng)基上：呈葡萄串狀排列（3）膿汁標(biāo)本中：呈單個(gè)散在或少數(shù)呈葡萄串狀排列第一節(jié)葡萄球菌屬金黃色葡萄球菌（膿汁）鏡下形態(tài)金黃色葡萄

3、球菌純培養(yǎng)鏡下形態(tài)第一節(jié)葡萄球菌屬2.培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂（普皿）上生長(zhǎng)良好。在20%CO2中有利于毒素形成（1）在液體培養(yǎng)基：呈均勻混濁生長(zhǎng)（2）在普皿上：形成1～2mm、圓形、光滑、邊緣整齊、不透明、有色菌落。不同菌株產(chǎn)生不同的脂溶性色素，如：金黃色、白色、檸檬色金黃色葡萄球菌金黃色脂溶性色素第一節(jié)葡萄球菌屬表皮葡萄球菌在普通瓊脂平皿上的白色色素表皮葡萄球菌在血平板上的白色色素2.培養(yǎng)特性第一節(jié)葡萄球菌屬（3）在血皿上金黃色葡萄球菌和溶血性葡萄球菌，能產(chǎn)生溶血毒素，在血平板上產(chǎn)生β-溶血。其他葡萄球菌無(wú)此現(xiàn)象金黃色葡萄球菌在血平板上

4、24h菌落2.培養(yǎng)特性（4）在高鹽甘露醇平板上：大多數(shù)葡萄球菌耐鹽性強(qiáng)（10%～15%g/LNaCl培養(yǎng)基中生長(zhǎng)）。此平板常作為選擇性培養(yǎng)基，菌可分解甘露醇使指示劑呈淡黃色。G-菌在此平板上不生長(zhǎng)金黃色葡萄球菌在高鹽甘露醇平板上的淡黃色菌落2.培養(yǎng)特性第一節(jié)葡萄球菌屬第一節(jié)葡萄球菌屬（5）卵黃高鹽瓊脂平板：金黃色葡萄球菌產(chǎn)生卵磷脂酶，在此培養(yǎng)基上，菌落周?chē)尚纬砂咨恋憝h(huán)。表皮葡萄球菌亦可生長(zhǎng)，但無(wú)白色沉淀環(huán)。2.培養(yǎng)特性金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌在卵黃平板上生長(zhǎng)現(xiàn)象第一節(jié)葡萄球菌屬3.生化反應(yīng)：葡萄球菌的生化活性強(qiáng)，能分解多種糖類(lèi)，蛋白質(zhì)和氨基酸，

5、觸酶陽(yáng)性。觸酶陽(yáng)性陰性對(duì)照發(fā)酵葡萄糖第一節(jié)葡萄球菌屬4.細(xì)胞壁抗原主要類(lèi)型有下列兩種蛋白抗原*又稱(chēng)為葡萄球菌A蛋白（SPA），具有種、屬特異性的完全抗原。SPA可與人類(lèi)的IgG的Fc段非特異性結(jié)合，而不影響Fab段與特異性抗原結(jié)合的功能，它作為檢測(cè)多種微生物抗原的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的重要試劑，可進(jìn)行簡(jiǎn)單、快速的協(xié)同凝集試驗(yàn)多糖抗原具有型特異性的半抗原。金黃色葡萄球菌-核糖醇磷壁酸；表皮葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌-甘油磷壁酸。檢測(cè)磷壁酸抗體有助于金黃色葡萄球菌感染的診斷和預(yù)后判斷第一節(jié)葡萄球菌屬5.分類(lèi)葡萄球菌屬可根據(jù)DNA的同源性、色素、生化反應(yīng)及是否產(chǎn)生凝

6、固酶等不同方法進(jìn)行分類(lèi)。6.抵抗力葡萄球菌是抵抗力最強(qiáng)的無(wú)芽胞細(xì)菌。*根據(jù)是否產(chǎn)生凝固酶分凝固酶陽(yáng)性凝固酶陰性葡萄球菌二、臨床意義第一節(jié)葡萄球菌屬第一節(jié)葡萄球菌屬微生物檢驗(yàn)程序標(biāo)本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等直接涂片鏡檢革蘭陽(yáng)性球菌分離培養(yǎng)生長(zhǎng)現(xiàn)象色素、溶血鑒定毒素測(cè)定藥物敏感試驗(yàn)生化反應(yīng)：血漿凝固酶、甘露醇、耐熱核酸酶幼貓?jiān)囼?yàn)報(bào)告形態(tài)染色：革蘭陽(yáng)性球菌第一節(jié)葡萄球菌屬1.標(biāo)本：主要有血液、尿液、痰液、腦脊液、穿刺液和濃液等。三、微生物學(xué)檢驗(yàn)2.直接涂片：標(biāo)本或增菌液直接涂片，革蘭染色鏡檢見(jiàn)革蘭陽(yáng)性呈葡萄串狀排列球菌，即可做出“查見(jiàn)革蘭陽(yáng)性球菌，葡萄

7、串狀排列，疑為葡萄球菌”的初步報(bào)告。第一節(jié)葡萄球菌屬3.增菌培養(yǎng)血液標(biāo)本增菌培養(yǎng)，24h培養(yǎng)后每日觀察增菌液變化。如無(wú)變化，需培養(yǎng)7d，其中盲目傳代2次，如無(wú)細(xì)菌培養(yǎng)可報(bào)“血液標(biāo)本經(jīng)7d培養(yǎng)無(wú)菌生長(zhǎng)”。如發(fā)生混濁、內(nèi)有膠胨樣凝塊等現(xiàn)象可進(jìn)行進(jìn)一步分離培養(yǎng)和革蘭染色專(zhuān)家提示?正常情況下無(wú)菌狀態(tài)的體液標(biāo)本如腦脊液，漿膜腔積液和關(guān)節(jié)腔抽出液等，直接涂片檢查具有重要價(jià)值，其他體液標(biāo)本伴有炎癥細(xì)胞也有參考價(jià)值4.分離培養(yǎng)（1）血平板：35℃18～24h（2）高鹽甘露醇平板或高鹽卵黃平板(*進(jìn)行葡萄球菌菌落特征復(fù)習(xí))第一節(jié)葡萄球菌屬5.生化反應(yīng)：（1）觸酶試驗(yàn)：陽(yáng)

8、性。（2）凝固酶試驗(yàn)：玻片法和試管法。第一節(jié)葡萄球菌屬5.生化反應(yīng)（3）耐熱DNA試驗(yàn)表皮葡萄