基因槍法和農(nóng)桿菌介導(dǎo)的bt 抗蟲基因轉(zhuǎn)化芥藍(lán)

基因槍法和農(nóng)桿菌介導(dǎo)的bt 抗蟲基因轉(zhuǎn)化芥藍(lán)

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1、2016(8):21-28中國(guó)蔬菜CHINAVEGETABLES研究論文基因槍法和農(nóng)桿菌介導(dǎo)的Bt抗蟲基因轉(zhuǎn)化芥藍(lán)*陳長(zhǎng)明 趙祥明 雷建軍 曹必好 陳國(guó)菊(華南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,廣東廣州510642)摘 要:以芥藍(lán)品種小香菇為試材,分別采用基因槍法和農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法將Bt抗蟲基因Cry2Aa2轉(zhuǎn)化到芥藍(lán)中,并對(duì)兩種轉(zhuǎn)化方法進(jìn)行了優(yōu)化和比較。結(jié)果表明:基因槍法在轟擊距離為6cm、轟擊次數(shù)為1次時(shí)轉(zhuǎn)化效率最高,為0.43%;農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法以帶子葉下胚軸為外植體、預(yù)培養(yǎng)2d、侵染10min、共培養(yǎng)2d、抑菌培養(yǎng)5d后轉(zhuǎn)入篩選培養(yǎng)基為最佳參數(shù),轉(zhuǎn)化效率

2、為0.37%。經(jīng)PCR和PCR-Southern鑒定,基因槍法和農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法均成功將目的基因?qū)虢嫠{(lán)基因組中。經(jīng)抗蟲性表型鑒定,T0代轉(zhuǎn)基因芥藍(lán)植株對(duì)甘藍(lán)夜蛾幼蟲的抗性高于非轉(zhuǎn)基因植株。關(guān)鍵詞:芥藍(lán);Bt基因;Cry2Aa2;基因槍法;農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法芥藍(lán)(BrassicaalboglabraL.H.Bailey)為十字別致,營(yíng)養(yǎng)豐富,含有多種硫代葡萄糖苷,其中蘿花科蕓薹屬一、二年生草本植物,原產(chǎn)于中國(guó)南部,卜硫苷(glucoraphanin)尤為豐富,蘿卜硫苷的降是我國(guó)著名的特產(chǎn)蔬菜之一,主要以花薹為產(chǎn)品,解產(chǎn)物蘿卜硫素(sulforaphane)具

3、有很強(qiáng)的抗癌功幼苗及葉片也可食用。芥藍(lán)肉質(zhì)脆嫩、清香,風(fēng)味效(司雨等,2009;孫勃等,2011;Qianetal.,2015)。近年來,由于芥藍(lán)反季節(jié)栽培面積擴(kuò)大,陳長(zhǎng)明,男,副教授,專業(yè)方向:蔬菜遺傳育種與生物技術(shù),E-mail:在栽培過程中常常受到病蟲為害,給生產(chǎn)造成很cmchen@scau.edu.cn*通訊作者(Correspondingauthor):陳國(guó)菊,教授,博士生導(dǎo)師,專業(yè)方大損失,因此培育抗病蟲品種成為芥藍(lán)育種的主要向:蔬菜遺傳育種與生物技術(shù),E-mail:guojuchen@scau.edu.cn目標(biāo)之一。常規(guī)雜交育種選育周

4、期長(zhǎng),且難以找到收稿日期:2016-02-02;接受日期:2016-05-20抗蟲材料,通過基因工程技術(shù)提高芥藍(lán)抗蟲性是一基金項(xiàng)目:廣東省教育廳特色創(chuàng)新項(xiàng)目(2014KTSCX026),廣東省教條快捷有效的途徑。目前針對(duì)芥藍(lán)轉(zhuǎn)基因的研究較育廳青年人才項(xiàng)目(2014KQNCX035),華南農(nóng)業(yè)大學(xué)校長(zhǎng)基金項(xiàng)目少,浙江大學(xué)的黃科等(2007)利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法(K13012)ResearchReviewonSowbanemosaicvirus(SoMV)FENGLi-xia,ZHAOLi-rong,WUMu-tao,YUXuan(GuangdongInspe

5、ctionandQuarantineTechnologyCenter,GuangdongKeyLaboratoryofImportandExportTechnicalMeasuresofAnimal,PlantandFood,Guangzhou510623,Guangdong,China)Abstact:Sowbanemosaicvirus(SoMV)isoneofthemostimportantdiseasesforspinach.SoMVcanbetransmittedbyseed,pollen,i

6、nsectvectorandmechanicalmanners.Alongwiththefurtherexpantioninimportedquantitiesofseedsandseedlings,andplantingindustrialization,theriskofSoMVintroducingintoChinaisincreasing.Thispaperreviewedthebiologicalcharacteristics,distribution,hostrange,endanger

7、sympton,transmissionroute,anddetectingtechniquesofSoMV.ThepaperalsosummarizedthepotentialdangerandriskofSoMVcomingintoChina.Keywords:Sowbanemosaicvirus(SoMV);Biologicalcharacteristic;Transmissionanddamage;Detectionmethods;Review—21—《中國(guó)蔬菜》學(xué)術(shù)論文下載www.cnveg.org研

8、究論文中國(guó)蔬菜CHINA

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