鳥巢蕨轉錄組高通量測序及分析

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1、園藝學報2014,(4111):2329–2341http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com鳥巢蕨轉錄組高通量測序及分析*賈新平,孫曉波,鄧衍明,梁麗建,葉曉青(江蘇省農業(yè)科學院農業(yè)生物技術研究所,江蘇省農業(yè)生物學重點實驗室,南京210014)摘要:采用新一代高通量測序技術IlluminaHiSeq2000對鳥巢蕨轉錄組(Aspleniumnidus)進行測序,共獲得29254595個序列讀取片段(reads),包含了5908586517個堿基序列(bp)信息

2、。對reads進行序列組裝,共獲得42907個單基因簇(Unigene),平均長度936bp,序列信息達到了40.16Mb。數(shù)據(jù)庫中的序列同源性比較表明,24993個Unigene與其他物種的已知基因具有不同程度的同源性。鳥巢蕨轉錄組中的Unigene根據(jù)GO功能大致可分為細胞組分、分子功能和生物學過程3大類51個分支,其中有大量的Unigene與代謝進程、結合活性、催化活性和細胞進程相關。將Unigene與COG數(shù)據(jù)庫進行比對,根據(jù)其功能大致可分為24類。KEGG數(shù)據(jù)庫作為參考,依據(jù)代謝途徑可將Unigene定位到116個代謝途徑分支。SSR位點查找發(fā)現(xiàn)

3、,從42907個Unigene中共找到6067個SSR位點。SSR不同重復基序類型中,出現(xiàn)頻率最高的為AG/CT,其次是AC/GT、A/T和AGG/CCT。針對這些序列,設計了20對引物進行了擴增效率和多態(tài)性檢測,其中7對引物在不同蕨類材料中表現(xiàn)出多態(tài)性。關鍵詞:鳥巢蕨;轉錄組;生物信息學;功能注釋;SSR中圖分類號:S68文獻標志碼:A文章編號:0513-353X(2014)11-2329-13SequencingandAnalysisoftheTranscriptomeofAspleniumnidus*JIAXin-ping,SUNXiao-bo,DE

4、NGYan-ming,LIANGLi-jian,andYEXiao-qing(ProvincialKeyLaboratoryofAgroBiology,InstituteofAgro-biotechnology,JiangsuAcademyofAgriculturalSciences,Nanjing210014,China)Abstract:ThetranscriptomeofAspleniumniduswassequencedbyIlluminaHiSeq2000platformthatisanewgenerationofhigh-throughputs

5、equencingtechnologytostudytheexpressionprofilingandpredictthefunctionalgenes.Thetargetsamplesequencing,atotalof29254595readsfragmentcontains5908586517bpinsequenceinformationweregenerated.Atotalof42907unigenescontains40.16Mbinsequenceinformationwereformedbyinitialsequencesplicing,w

6、ithanaveragereadlengthof936bp.24993unigeneswereannotatedusingBLASTXsearchesagainsttheNrandSwissProtdatabases.Inthisstudy,allassembledunigenescanbebroadlydividedintobiologicalprocesses,cellularcomponentsandmolecularfunctioncategoriesof51branchesbygeneontology,includingmetabolicproc

7、ess,binding,catalyticactivityandcellularprocess.UnigeneswerefurtherannotatedbasedonCOGcategory,whichcouldbegroupedinto24functionalcategories.KEGGpathwayanalysisshowedthatunigenescanbebroadlydividedinto116classesaccordingtothefunction.Therewere6067SSRin42907unigeneswere收稿日期:2014–07

8、–21;修回日期:2014–09–15基金項目:江蘇省農業(yè)科技自主

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