附“移液器操作”操作考核步驟與操作規(guī)范

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1、“移液器使用和養(yǎng)護(hù)”操作考核說明移液器的考核旨在規(guī)范移液器的使用，利用葡萄糖試劑盒（Glucosekit）檢測血清標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值，主要考察移液器的操作規(guī)范和加樣的準(zhǔn)確性。1考核標(biāo)準(zhǔn)：21.1檢測結(jié)果（CV值、R值）參考標(biāo)準(zhǔn)：：1.1.1CV值：CV≤3.0為及格，CV值越小，表示每次加樣越均一、誤差越??；2221.1.2R值：R≥0.9960為及格，R值越接近1，3點(diǎn)稀釋越接近同一條直線，表示稀釋越精準(zhǔn)。1.2、成績計(jì)算1.2.1．考生考核成績由酶標(biāo)儀測定成績和考生操作成績兩部分組成；酶標(biāo)儀測定成績（即結(jié)果成績）占60%，；考生操作成績占40%；1.2.2.考生最終成績以百

2、分制計(jì)算（結(jié)果成績滿分為60分，操作成績滿分為40分），結(jié)果成績折算方法：結(jié)果成績＝108/CV值（即CV值小于1.8者，結(jié)果成績?yōu)闈M分）；1.2.3第一次通過，最終成績不作減分處理；第二次才通過，最終成績＝60+（第二次成績－60）x80%。2材料和試劑的準(zhǔn)備：2.1100μL、20μL、10ul、2.5μL四種規(guī)格的移液器各1把。2.2200μL、10μL兩種規(guī)格的吸頭各一盒。2.3工作液、標(biāo)準(zhǔn)品、滅菌超純水（ddH2O）。3操作步驟：3.1、吸取適量工作液（不少于2400μL）。3.2、準(zhǔn)備好①標(biāo)準(zhǔn)品原液②稀釋液A(1/2原液濃度)③稀釋液B（1/4原液濃度）。稀釋液

3、A和稀釋液B的配制方法如下：稀釋液A：28μL＝14μL標(biāo)準(zhǔn)品原液＋14μL超純水稀釋液B：18μL＝9μL稀釋液A＋9μL超純水3.3、將工作液加入酶標(biāo)板孔中，每孔加100μL，共8（孔）×3（排）=24個(gè)孔；13.4、向裝有工作液的3行8孔酶標(biāo)板中分別加入①標(biāo)準(zhǔn)品原液（第一行）②稀釋液A（第二行）③稀釋液B（第三行）各一行，每孔加入2.0μL（注意：每孔須換槍頭）；3.5、加樣完成，將酶標(biāo)板輕輕搖勻后,放入PE手套內(nèi)，并做好標(biāo)記（姓名）,然后放入37℃恒溫箱內(nèi)溫浴15min。此間考生可以在考核室外等待。待溫浴時(shí)間到，取出酶標(biāo)板至酶標(biāo)儀檢測。3.6、檢測結(jié)束，監(jiān)考人員登記

4、考試結(jié)果后，考生離開考場。附：1考試時(shí)間安排1.1考試時(shí)間：考生需按照安排時(shí)間提前10min至考核室簽到，如有事無法進(jìn)行考核，應(yīng)安排替換人，并盡量于前一天郵件通知培訓(xùn)部負(fù)責(zé)教務(wù)的同事，或至少提前30min電話通知，如開考尚未簽到，視為缺考。1.2考試時(shí)間為30min（其中操作時(shí)間為20min），從考生進(jìn)入考場開始計(jì)時(shí)，考生必須在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成所有實(shí)驗(yàn)操作，考試時(shí)間結(jié)束，考生應(yīng)立即停止操作，將裝入手套的酶標(biāo)板放入烘箱，收拾好臺(tái)面，離開考場。若超出時(shí)間在5min以內(nèi)，每分鐘扣除1分，若考生超出5min以上，則此次考試作不通過處理。2考場紀(jì)律2.1考生應(yīng)按時(shí)進(jìn)入考場，考核期間保持

5、安靜?？荚囃戤叺目忌鷳?yīng)盡快離開考場，等溫浴時(shí)間到時(shí)再返回考場取出酶標(biāo)板進(jìn)行測試，測試完畢后應(yīng)迅速離開考場，不得在考場圍觀。違反者取消當(dāng)天考試資格。2移液器考核操作規(guī)范考點(diǎn)說明考生考核前，須仔細(xì)閱讀本考核規(guī)范，進(jìn)入考場時(shí)，監(jiān)考老師不再對(duì)考核原理及流程進(jìn)行說明。1實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：1.1在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前，自覺穿上實(shí)驗(yàn)服，實(shí)驗(yàn)前帶好手套，必要時(shí)戴上口罩，用酒精擦拭桌面。1.2物品擺放規(guī)范：準(zhǔn)備所需的物品，以“規(guī)范操作，防止污染”為原則——通常為“左凈右臟”，合理擺放。1.2.1操作人正前方為操作區(qū)，試劑放于操作區(qū)左方，將槍頭盒放在操作區(qū)的右方，將垃圾桶放于操作區(qū)的右方較遠(yuǎn)處，并盡量遠(yuǎn)離操作

6、區(qū)和槍頭盒。1.2.2附圖：實(shí)驗(yàn)物品擺放圖移液架試劑槍頭盒垃圾桶操作區(qū)2加樣2.1握槍姿勢(shì)規(guī)范2.1.1考生在吸排液體時(shí)，握移液槍姿勢(shì)正確，垂直吸排液。若操作需要，無法0保持垂直，移液器傾斜度不允許超過45；2.1.2手不能接觸槍套筒下端作為支撐，防止污染，若手抖難以控制，只可扶住移液器套筒的上端部分支撐；2.2裝配槍頭：將移液器吸嘴垂直插入吸頭，向下輕壓，順時(shí)鐘微微旋動(dòng)，上緊即可；不允許采用上下反復(fù)撞擊的方式上槍頭；2.3吸液：2.3.1吸頭進(jìn)入液面深度控制好；參考深度：10ul吸頭——1～2mm3200ul吸頭——2～3mm1000ul吸頭——3～5mm2.3.2慢吸慢

7、打，不允許出現(xiàn)液體倒吸至移液器內(nèi)部；2.3.3吸液完成，吸頭需在液面下停頓1s左右，再離開液面。2.4排液：2.4.1勻速按下控制按鈕排液，第一檔打完，停頓1s左右后，再打第二檔；2.4.2吸頭離開液面后，才可放開控制按鈕；2.5按彈射鍵將吸頭丟棄。3實(shí)驗(yàn)素質(zhì)操作規(guī)范：以“保護(hù)試劑，防止污染”為原則3.1在實(shí)驗(yàn)操作過程中，酶標(biāo)板底不可直接接觸桌面，中間鋪上塑料手套；3.2移液槍放置：加樣期間不用移液器時(shí)需放置槍架上，不可水平放置在桌面；更不允許在移液器吸頭內(nèi)有液體時(shí)將其橫放；3.3EP管的使用：3.3.1考生從盒子