白藜蘆醇對大鼠重癥急性胰腺炎胰腺組織 cox2和inos表達的影響

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1、白藜蘆醇對大鼠重癥急性胰腺炎胰腺組織COX2和iNOS表達的影響：李琦，沙煥臣，馬清涌，張磊，張慶元【摘要】目的探討白藜蘆醇(resveratrol,RES)改善重癥急性胰腺炎(severeacutepancreatitis,SAP)大鼠胰腺微循環(huán)的作用機制。方法SD大鼠隨機分為3組：假手術(shamoperation,SO)組、重癥急性胰腺炎(SAP)模型組、白藜蘆醇治療(RES)組。以40g/L牛黃膽酸鈉0.1mL/100g膽胰管逆行注射建立SAP模型。RES組術后立即經(jīng)陰莖背靜脈注射RES(20mg/kg)。分別于術后3、6、12h取

2、材，進行胰腺組織學評分；檢測胰腺組織環(huán)氧化酶2(cyclcoxygenase2,COX2)、誘生型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)的表達和一氧化氮(nitrogenmonoxide,NO)含量。結果RES組胰腺損傷較SAP組明顯減輕(P<0.05)。SAP組COX2、iNOS的表達和NO含量在各時間點均顯著高于假手術組(P<0.05)；RES組COX2的表達在6、12h較SAP組明顯下降，iNOS和NO在各時間點均較SAP組明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)

3、。結論白藜蘆醇可能通過下調(diào)COX2和iNOS的表達改善胰腺微循環(huán)?！娟P鍵詞】重癥急性胰腺炎；白藜蘆醇；微循環(huán)；COX2；iNOSABSTRACT:ObjectiveToexplorethepossiblemechanismofresveratrol(RES)inimprovingpancreaticmicrocirculationinratslydividedinto3groups:shamoperation(SO)group,severeacutepanceatitis(SAP)group,andresveratroltreated

4、(RES)group.SAPmodeladebyinjecting40g/Lsodiumtaurocholateatadosageof0.1mL/100gintothebiliopancreaticduct.RES(20mg/kg)odeling.Allratsicroscope.Theexpressionsofcyclcoxygenase2(COX2)proteinandinduciblenitricoxidesynthase(iNOS)proteininpancreatictissuesmunohistochemistry.Thele

5、velofnitrogenmonoxide(NO)inpancreatictissueseasuredbyNOdetectionkit.ResultsMicroscopically,thereesochymalcongestion,edema,acinarnecrosisandleukocyticinfiltrationfrom3hto12hafterSAPmodelightbethemechanismthatREScanimprovepancreaticmicrocirculationinSAP.KEYIDT[5]評分標準對損傷進行定量評估

6、。②胰腺組織COX2和iNOS表達的測定：采用SP法測定COX2，采用SABC法測定iNOS，嚴格按照試劑盒說明書進行測試。一抗滴度COX2和iNOS均為1∶400。PBS代替一抗做陰性對照。采用MoticMed6.0數(shù)碼醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)進行灰度測量。③胰腺組織NO含量的測定：采用南京建成生物制品研究所NO-2/NO-3試劑盒及考馬斯亮藍試劑盒，并按試劑盒說明進行操作和計算。1.6統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進行統(tǒng)計學處理，實驗數(shù)據(jù)用±s表示，采用單因素方差分析比較均數(shù)間的差異，用LSDt檢驗進行均數(shù)的多重比較。以P&l

7、t;0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。2.2胰腺組織中COX2表達的變化SO組大鼠的胰腺組織未見COX2陽性表達；SAP組3h即出現(xiàn)COX2陽性表達，并隨時間推移呈現(xiàn)升高趨勢，12h(圖1A)最顯著；與SO組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。RES組6h和12hCOX2陽性表達(圖1B)較SAP組明顯降低(P<0.05，表2)。2.3胰腺組織中iNOS表達的變化iNOS在SO組大鼠的胰腺組織不表達或少量表達；SAP組3h即出現(xiàn)iNOS陽性表達，并隨時間推移呈現(xiàn)升高趨勢，12h(圖1C)更為顯著；與SO組相比差異具有統(tǒng)計學

8、意義(P<0.05)。RES組iNOS陽性表達在3、6和12h(圖1D)均較SAP組明顯降低(P<0.05，表3)。表2各組大鼠胰腺組織中COX2平均