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《大鼠重癥急性胰腺炎胰腺組織中no生成及inos表達的變化》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、大鼠重癥急性胰腺炎胰腺組織中NO生成及iNOS表達的變化【摘要】目的探討重癥急性胰腺炎(SAP)時胰腺組織一氧化氮(NO)和誘導型一氧化氮合酶(iNOS)表達的變化。方法36只健康雄性Sprague-DaRNA表達的變化。結果與對照組相比，SAP組在6h時間點上，胰腺組織中NO水平、iNOS活性明顯升高(P<0.01)，免疫組化和RT-PCR結果也顯示iNOS蛋白及iNOSmRNA表達增高(P<0.01);隨時間延長，在12h和24h各指標到達高峰，24h仍維持在較高水平(P<0.01)。結論在SAP時，隨著時間的延長，iNOS表達增高，從而產(chǎn)生高濃度的
2、NO，加重胰腺組織的損傷?！娟P鍵詞】重癥急性胰腺炎;一氧化氮;誘導型一氧化氮合酶 Abstract:ObjectiveToinvestigatethechangesintheformationofnitricoxide(NO)andtheexpressionofinduciblenitricoxidesynthase(iNOS)inpancreatictissueinsevereacutepancreatitis(SAP)inrats.MethodsThirty-sixhealthymaleSprague-Dalyallocatedintosham-operatedgro
3、up(controlgroup)andSAPgroup(n=18each).ThemodelofSAPtaurocholateintothemoncholedocho-pancreaticductinSDrats.Thesamedosageofnormalsalineelysacrificedat6h,12hand24h,respectively(n=6each),andtheirbloodsamplesamylaselevelsandthepathohistologicalchangesofthepancreasetricmethod.TheexpressionofiN
4、OSproteinsandiNOSmRNAinthepancreasinedbyimmunohistochemistryandreversetranscriptasepolymerasechainreactionmethod(RT-PCR),respectively.ResultsTheNOlevelandtheactivityoftotaliNOSinthepancreasat6hsignificantlyincreasedintheSAPgroupasparedtothecontrolgroup(P<0.01).ImmunohistochemistryandRT
5、-PCRalsorevealedanincreaseintheexpressionofpancreaticiNOSproteinandmRNAinthepancreas(P<0.01).Eachparameterincreasedeandreachedthepeakat12handstillretainedahighlevelat24h(P<0.01).ConclusionInSAP,theiNOSexpressioneandthusthehighconcentrationofNOa公司)，NO檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所)，iNOS免疫組化試劑盒(北京
6、中杉金橋生物技術有限公司)，TIANScriptM-MLVRT-PCR試劑盒(上海捷瑞生物公司)，iNOS及β-actin引物合成由上海生工生物工程技術服務有限公司完成。全自動生化分析儀(美國Vitros公司)?！ ?.3方法 1.3.1動物分組及SAP模型制備36只大鼠隨機分為2組。SAP組(n=18)：采用Aho法[1]，逆行胰膽管注射5%?；悄懰徕c(0.1ml/100g)制備SAP模型;對照組(n=18)：處理方法同SAP組，以等量生理鹽水替代5%?；悄懰徕c。于制模成功后第6、12、24h，每組分別隨機選取6只大鼠，予以牽拉頸部處死。心臟穿刺抽血，血清存于-20℃
7、冰箱中保存?zhèn)錂z;從胰腺相同位點分別取胰腺組織立即放入液氮中，2h后轉入-70℃冰箱中保存;部分胰腺組織用10%中性甲醛固定24～48h，常規(guī)脫水、包埋。 1.3.2血清淀粉酶的測定用全自動生化分析儀，采用碘比色法測定血清淀粉酶?！ ?.3.3胰腺組織病理學觀察胰腺組織常規(guī)浸蠟、包埋，3μm厚度切片，蘇木精-伊紅染色。光鏡下(×100)每張切片隨機選取10個高倍鏡視野，從水腫、感染、出血和壞死4個方面評價胰腺組織損傷的程度。參考Kusske標準[2]，由2位專業(yè)病理醫(yī)師雙盲閱片;各項最低分為0，最高分為4分;取各項積分總和為最
