白術(shù)內(nèi)酯ⅰ及白術(shù)內(nèi)酯ⅲ對(duì)唾液淀粉酶活性的影響

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1、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ及白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)唾液淀粉酶活性的影響郝延軍,桑育黎,李寶林,王勒,賈天柱【關(guān)鍵詞】白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ;,,白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ;,,脾虛;,,唾液淀粉酶活性  摘要:目的通過研究白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)唾液淀粉酶活性的影響來探討白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ是否是白術(shù)健脾的有效成分。方法采用紅色染色淀粉法測(cè)定白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)酶活性的影響。結(jié)果白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ具有增強(qiáng)淀粉酶活性的作用。結(jié)論白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可以作為白術(shù)健脾運(yùn)脾的有效成分之一?! £P(guān)鍵詞:白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ;白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ;脾虛;唾液淀粉酶活性  EffectofAtractylodeⅠ,ⅢonSaliv

2、aAmylaseActivityinRatsofDiarrheaandSpleenDeficiency  Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofatractylodeⅠ,ⅢonsalivaamylaseactivityandstudytheactiveponentsofreinforcingthespleeninAtractylodesmacrocephalaKoidz.MethodsReddyedamylopectinmethod.ResultsAtractylodeⅠincreasedthe

3、activityofsalivaamylae.ConclusionAtractylenolideⅠmaybeoneoftheactiveponentstoimprovespleen.  Keyylaseactivity  白術(shù)為菊科蒼術(shù)屬AtractylodesmacrocephalaKoidz.多年生草本植物白術(shù)的根莖。為常用中藥。具有補(bǔ)氣健脾、燥濕利水、止汗、安胎的功效。臨床多用于脾虛證,生用或炮制應(yīng)用。傳統(tǒng)的中醫(yī)理論認(rèn)為:白術(shù)生用燥濕健脾,偏于燥濕作用。麩炒后健脾燥濕,偏于健脾。但目前白術(shù)中哪些化學(xué)成分是燥性成分和哪些是健脾成

4、分至今不清楚?,F(xiàn)代研究已經(jīng)證實(shí)白術(shù)麩炒后蒼術(shù)酮的含量降低而白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ增加。由此我們提出假說:白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ是白術(shù)的健脾成分。本實(shí)驗(yàn)研究了白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅲ對(duì)唾液淀粉酶活性的影響,從而驗(yàn)證此假說?! ?器材  1.1儀器7230G型分光光度計(jì)(上海分析儀器總廠);恒溫水浴鍋(余姚金電儀表有限公司)?! ?.2主要藥品和試劑(磷酸二氫鈉(汕頭市化學(xué)試劑廠批號(hào)980603),磷酸氫二鈉(汕頭市化學(xué)試劑廠批號(hào)980613),磷酸二氫鉀(汕頭市化學(xué)試劑廠批號(hào)971112),二甲基亞砜(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司批號(hào)T200411

5、02),可溶性淀粉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司批號(hào)T20031205)。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ(實(shí)驗(yàn)室自制,純度>98%)。1/15mol/LPBS緩沖液(pH=8.0),0.1mol/L碘儲(chǔ)備液,2%二甲基亞砜的PBS緩沖液。基質(zhì)緩沖液:稱取氯化鈉4.5g、Na2HPO4?12H2O28.47g和K2H2PO46.25g,溶于250ml蒸餾水中,加熱至沸。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ溶液:精密稱取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ,加1%二甲基亞砜的PBS緩沖液于容量瓶中,制成所需濃度的溶液。唾液淀粉酶溶液:取清晨唾液,離心,吸取上清液1ml,加蒸餾

6、水稀釋至所需倍數(shù)〔1〕?! ?方法  2.1實(shí)驗(yàn)組正常對(duì)照組為未加白術(shù)內(nèi)酯的唾液組,實(shí)驗(yàn)組分別為加入了低、高濃度白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和低高濃度白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ的唾液,每組5份樣品?! ?.2操作方法取配好的基質(zhì)0.5ml,加入唾液1ml,再加入配好的不同濃度的白術(shù)內(nèi)酯溶液0.5ml,最后再加入0.1mol/L碘儲(chǔ)備液1ml,如表1所示?! ”?測(cè)定過程中加入物用量(略)  加入物用量見表1。混勻,37℃水浴水解7.5min后,加水定容至10ml,660nm下測(cè)定A值,根據(jù)u=AB-Au/AB×0.4×15/7.5×6250公式,求u值,進(jìn)行比較?!?/p>

7、 3結(jié)果  見表2?! ”?白術(shù)內(nèi)酯對(duì)唾液淀粉酶活性的影響(略)  與正常對(duì)照組比較,△P<0.05  4討論  傳統(tǒng)的中醫(yī)理論認(rèn)為:白術(shù)生用燥濕健脾,偏于燥濕作用。麩炒后健脾燥濕,偏于健脾?,F(xiàn)在研究表明,白術(shù)麩炒后白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量增加〔2,3〕。中醫(yī)有“脾主涎”“涎為脾液”的論述,本文采用酶學(xué)方法,測(cè)定了白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)唾液淀粉酶活性的影響,實(shí)驗(yàn)表明,與正常組比較白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對(duì)唾液淀粉酶活性有增強(qiáng)作用(P<0.05)。而白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ與正常組無明顯差別。結(jié)果提示,白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ可以作為白術(shù)健脾運(yùn)脾的效應(yīng)成分之一,為研究白

8、術(shù)的健脾活性部位和活性成分提供了藥理學(xué)的驗(yàn)證,同時(shí)為闡明白術(shù)的炮制原理提供理論依據(jù)。

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