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《扶正固腎驅(qū)邪合劑對(duì)小鼠免疫學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)觀察》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、扶正固腎驅(qū)邪合劑對(duì)小鼠免疫學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)觀察【摘要】目的觀察中藥制劑扶正固腎驅(qū)邪合劑對(duì)反復(fù)呼吸道感染小鼠免疫學(xué)的影響。方法60只小鼠隨機(jī)分為正常組,模型組,玉屏風(fēng)組,扶正固腎驅(qū)邪合劑高、中、低劑量組。正常組和模型組分別灌服生理鹽水0.5mL;扶正固腎驅(qū)邪合劑高、中、低劑量組分別灌服扶正固腎驅(qū)邪合劑0.5mL/只,分別含生藥4g/mL,2g/mL,1g/mL;玉屏風(fēng)組灌玉屏風(fēng)口服液0.5mL/只。每日1次,4周后處死。對(duì)各組小鼠的體質(zhì)量、白介素-2、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD3+、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較。結(jié)果扶正固腎驅(qū)邪合劑能明顯提高小鼠的體質(zhì)量、白介素-2、CD4
2、+、CD4+/CD8+、CD3+、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù),降低CD8+,差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論扶正固腎驅(qū)邪合劑對(duì)以免疫功能低下為主要病因的小兒反復(fù)呼吸道感染的治療有著廣闊的前景?!娟P(guān)鍵詞】扶正固腎驅(qū)邪合劑小鼠免疫功能實(shí)驗(yàn)研究反復(fù)呼吸道感染(RRTI)是指在單位時(shí)間內(nèi)上、下呼吸道反復(fù)感染發(fā)作次數(shù)超過規(guī)定次數(shù)而言的一種臨床綜合征,是目前兒科的常見病及多發(fā)病,具有反復(fù)發(fā)作、病程較長(zhǎng)、纏綿難愈的特點(diǎn)?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為RRTI的發(fā)病機(jī)制多集中在免疫功能缺陷、微量元素和維生素缺乏等方面。為了驗(yàn)證中藥在調(diào)節(jié)免疫功能方面的效果,我們用扶正固腎驅(qū)邪合劑對(duì)小鼠做了免疫學(xué)方面影
3、響的實(shí)驗(yàn)研究,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)雄性ICR小鼠60只,體質(zhì)量16~18g,由浙江中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心提供,符合一級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。1.2實(shí)驗(yàn)藥品扶正固腎驅(qū)邪合劑(黃芪10g、黨參10g、焦白術(shù)10g、熟地黃10g、制首烏10g、五味子3g、紫河車3g、茯苓10g、麥冬10g、防風(fēng)5g、蟬蛻3g、山楂10g、淮山藥10g),按比例投藥煎煮,由浙江中醫(yī)藥大學(xué)配制。玉屏風(fēng)顆粒,廣東環(huán)球制藥有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)20070111,5g/包,12包/盒。氫化可的松注射液,上?,F(xiàn)代哈森(商丘)藥業(yè)有限公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)20070223。0.9%生理鹽水,金華市泰來醫(yī)藥
4、有限責(zé)任公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)20070111。1.3實(shí)驗(yàn)器材K3酶標(biāo)儀,芬蘭LARYSTSGSI公司生產(chǎn);FA1604電子天平,南京庚辰科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn);44LXJ-2離心沉淀機(jī),上海醫(yī)用分析儀器廠提供;FACSCan流式細(xì)胞分析儀,杭州眾維科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。1.4主要試劑小鼠白介素-2(IL
5、2)ELISA試劑、小鼠CD3+抗體、CD4+抗體、CD8+抗體,由北京精美生物公司提供。1.5動(dòng)物造模反復(fù)呼吸道感染模型復(fù)制參照《實(shí)用中醫(yī)證候模型學(xué)》使用的方法。小鼠腹腔注射氫化可的松0.04mL/只,連續(xù)12d,造成免疫功能低下(腎虛)小鼠模型。小鼠出現(xiàn)疲乏、自主活動(dòng)明顯減少、嗜睡、反應(yīng)
6、遲鈍、尿量增多等腎陽(yáng)虛的表現(xiàn)。1.6實(shí)驗(yàn)分組與給藥適應(yīng)性喂養(yǎng)5d,確認(rèn)健康后,隨機(jī)分為正常組、模型組、玉屏風(fēng)組、扶正固腎驅(qū)邪合劑高劑量組(簡(jiǎn)稱高劑量組)、扶正固腎驅(qū)邪合劑中劑量組(簡(jiǎn)稱中劑量組)、扶正固腎驅(qū)邪合劑低劑量組(簡(jiǎn)稱低劑量組)6組,每組10只。高、中、低劑量分別相當(dāng)于臨床兒童用量的12倍、6倍和3倍。人鼠劑量換算按章元沛主編的《藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)》[1]人和動(dòng)物的體表面積計(jì)算法計(jì)算。于造模后第2d開始,正常組和模型組分別灌服生理鹽水0.5mL/只;高、中、低劑量組分別灌服扶正固腎驅(qū)邪合劑0.5mL/只,分別含生藥4g/mL,2g/mL,1g/mL;玉屏風(fēng)組灌玉屏風(fēng)口服液0.5mL/只。
7、每日1次,4周后處死。1.7標(biāo)本收集與指標(biāo)檢測(cè)末次給藥后,次日稱取小鼠體質(zhì)量。摘眼球取血后,頸椎脫臼法處死小鼠,剪開胸腔、腹腔取胸腺、脾臟,用無菌試紙吸干水分,在天平上稱重,按公式“胸腺指數(shù)=胸腺質(zhì)量/體質(zhì)量(mg/g)”“脾臟指數(shù)=脾臟質(zhì)量/體質(zhì)量(mg/g)”分別計(jì)算胸腺和脾臟的指數(shù)。用雙抗夾心法和流式細(xì)胞儀檢測(cè)IL
8、2和CD3+,CD4+,CD8+的含量。1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均用SPSS11.5windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,用F方差分析,檢驗(yàn)前先進(jìn)行正態(tài)性分布及方差齊性檢驗(yàn),若呈正態(tài)性分布、方差齊,則用t檢驗(yàn),否則行t′檢驗(yàn)。2實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1扶
9、正固腎驅(qū)邪合劑對(duì)小鼠體質(zhì)量及小鼠血清IL
10、2的影響模型組體質(zhì)量低于正常組,差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05),說明造模成功。治療后中藥各劑量組和玉屏風(fēng)組體質(zhì)量顯著上升,但與正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05)。高、中、低劑量組與玉屏風(fēng)組比較,差異無統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。中劑量組體質(zhì)量高于高、低劑量組,差異有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05)。模型組血清IL
11、2的含量明顯低于正常組,差異有高度統(tǒng)計(jì)意義(P<0.