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《丹參注射液對(duì)哮喘大鼠肺il-13和嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子表達(dá)的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、丹參注射液對(duì)哮喘大鼠肺IL?13和嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子表達(dá)的影響王成國(guó),薛克營(yíng),程立,李威,石明【摘要】目的:探討丹參注射液抑制哮喘氣道變應(yīng)性炎癥作用的分子機(jī)制。方法:30只SD大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組、哮喘組和丹參治療組。HE染色行肺組織病理學(xué)檢查，計(jì)數(shù)支氣管肺泡灌洗液（BALF）中細(xì)胞總數(shù)并分類，SP法和RT?PCR測(cè)定肺組織中IL?13和嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子（Eotaxin）表達(dá)。結(jié)果:丹參組肺組織炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少，BALF細(xì)胞總數(shù)及淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞(Eos)百分率較哮喘組明顯減少(P＜0.05，P＜0.01)。哮喘組肺組織IL?13和Eotaxin表達(dá)較正常對(duì)照組
2、明顯增加(P＜0.05)，丹參組IL?13和Eotaxin表達(dá)較哮喘組明顯減少(P＜0.05)。IL?13和Eotaxin表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.90，P＜0.01）。結(jié)論:丹參注射液可減輕哮喘大鼠氣道炎癥反應(yīng)，其機(jī)制可能與降低哮喘大鼠肺內(nèi)IL?13和Eotaxin表達(dá)有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】丹參注射液；哮喘；IL?13；嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子Abstract:ObjectiveToinvestigatethemolecularmechanismofinhibitoryeffectofDansheninjectiononallergicairmationofasthma.MethodsThirtySDr
3、atslydividedintocontrolgroup,asthmagroupandDansheninjectiongroup.Bronchoalveolarlavagefluid(BALF)ed.ThelungtissueeasuredbyRT?PCRandSPmethodofimmunohistochemistryassay.Resultsparedagroup,lessinfiltrationofinflammatorycellsinlungtissuesber,thepercentageoflymphocytes,neutrophilsandeosinophilsinBALFofD
4、ansheninjectiongroupagroup(P﹤0.05,P﹤0.01).TheexpressionofIL?13andEotaxininlungtissueofasthmagroupmationofasthmaticrats,probablybydecreasingtheexpressionofIL?13andEotaxininlungtissueofasthmaticrats.Keya;Interleukin?13;Eotaxin支氣管哮喘是由多種炎癥細(xì)胞、炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子參與的氣道慢性炎癥性疾病，其中白介素?13（IL?13）和嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子（Eotxin）是致哮喘重
5、要因素。丹參注射液治療哮喘療效明顯，但其機(jī)制不明。本研究通過建立哮喘大鼠模型，檢測(cè)其肺組織IL?13和Eotaxin的表達(dá)，以探討丹參注射液抑制支氣管哮喘氣道變應(yīng)性炎癥作用的分子機(jī)制。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和藥物健康雄性SD大鼠，體重（250±20）g，SPF級(jí)（同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）。隨機(jī)分為正常對(duì)照組、哮喘組和丹參治療組，每組10只。丹參注射液（開開援生制藥股份有限公司，2mL/支，含生藥丹參1.5g/mL）；卵白蛋白（OVA，美國(guó)Sigma公司）；兔抗鼠IL?13多克隆抗體、兔抗鼠Eotaxin多克隆抗體購(gòu)自武漢博士德生物公司；Trizol（上海華舜生物工程有限公司）；PT?PC
6、R試劑盒（美國(guó)Promega公司）；IL?13和Eotaxin mRNA引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。1.2動(dòng)物模型制備哮喘大鼠模型的制備方法參照文獻(xiàn)[1]進(jìn)行。大鼠皮下注射含10mgOVA和200mgAl(OH)3的生理鹽水1mL，同時(shí)腹腔注射百日咳桿菌疫苗1mL（含菌約6×109個(gè)/mL）作為免疫增強(qiáng)劑，第8d重復(fù)致敏一次，第15d天開始激發(fā)。將大鼠置于特制的玻璃容器內(nèi)，用超聲霧化器噴入2％OVA生理鹽水50mL，每次30min，每周3次,連續(xù)4周。激發(fā)后大鼠出現(xiàn)哮喘癥狀如躁動(dòng)不安、咳嗽、呼吸急促、紫紺等，證實(shí)模型制作成功。正常對(duì)照組用生理鹽水代替OVA注射和吸入。丹參治療
7、組每次OVA激發(fā)前30min腹腔內(nèi)注射20％丹參注射液3mL[2]。1.3BALF細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類于末次激發(fā)24h后，將大鼠麻醉后（3％水合氯醛）開胸，氣管切開，將塑料導(dǎo)管插入右主支氣管內(nèi)，用無菌生理鹽水5mL行支氣管肺泡灌洗，反復(fù)抽吸3次，抽取回收液（即BALF）約4.8mL，回收率96％。取搖勻的BALF少許滴于細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，光鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)，然后將BALF離心（1000r/min）10min，離心后沉渣
