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《地塞米松對大鼠肺缺血再灌注損傷保護(hù)的研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、地塞米松對大鼠肺缺血再灌注損傷保護(hù)的研究【摘要】目的:通過觀察地塞米松對大鼠肺缺血再灌注后病理形態(tài)變化的影響，探討其對肺缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制。方法:健康的SD大鼠40只，雌雄不拘，隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組（S）、單純?nèi)毖M（I）、缺血再灌注組（IR）、小劑量地塞米松干預(yù)組（D1）及大劑量地塞米松干預(yù)組（D2），每組8只。根據(jù)Eppinger模型制作SD大鼠單側(cè)肺缺血再灌注動物模型，用ethods:40healthySprague-Dalyintofivegroups:shamgroup（S）,ischemi
2、a-onlygroup（I）,ischemia-reperfusiongroup（IR）,small-doseDexamethasoneinterferedgroup（D1）,andlarge-dosedexamethasoneinterferedgroup（D2）,odelofischemiaandreperfusioninsituinsinglelungonarypathologicalchangesuchhigher(P＜0.01),ethasone，especiallyinlargedose.Thep
3、athologicalsectionshoonarystructurallesionoreseriousinGroupIR,andafterintervention,thestructurallesionallungislittle,butifthelungisischemia-reperfusioned,theiNOSproteinincreasesobviouslyethasone，especiallyinlargedose,theiNOSproteindeclinesandthelunginjuryle
4、ssens.[Keyia-reperfusion;Lung;Dexamethasone;Induciblenitricoxidesynthase;Rat近年來肺栓塞溶栓治療、肺動脈血栓內(nèi)膜剝除術(shù)、肺移植、體外循環(huán)手術(shù)等心胸外科手術(shù)得到廣泛開展。隨之而來的肺外組織器官缺血再灌注所致的肺組織損傷情況也增多，肺缺血－再灌注損傷的問題逐漸受到重視。Shang等[1]研究表明無論是內(nèi)源性或是外源性NO對缺血再灌注肺皆有損傷作用。Zhou等[2]研究表明肺外組織缺血再灌注時(shí)可使肺內(nèi)經(jīng)由誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）所調(diào)控
5、的一氧化氮（NO）過度表達(dá)，從而導(dǎo)致炎性介質(zhì)過氧化亞硝酸鹽在肺內(nèi)積聚引起肺損傷，以上研究提示抗炎治療在抗肺缺血再灌注損傷方面有著良好的應(yīng)用前景。地塞米松具有強(qiáng)大的抗炎作用,通過阻斷炎癥因子級聯(lián)反應(yīng)及抑制趨化因子從而減少中性粒細(xì)胞向組織聚集,減輕局部炎癥反應(yīng)；本研究選用地塞米松對大鼠肺缺血再灌注過程進(jìn)行干預(yù)并探討其保護(hù)機(jī)制，從而為臨床治療提供佐證。1 材料和方法1.1 動物分組健康SD大鼠40只，雌雄不分，體重250~350g，由南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。隨機(jī)分成5組：假手術(shù)組（S組）、單純?nèi)毖M（I組）
6、、缺血再灌注組（IR組）、小劑量地塞米松干預(yù)組（D1組）、大劑量地塞米松干預(yù)組（D2組），每組8只。1.2實(shí)驗(yàn)方法根據(jù)Eppinger方法建立動物模型，假手術(shù)組僅開胸不阻斷左肺門，單純?nèi)毖M僅阻斷左肺門2h，不予再灌注。缺血再灌注組、小劑量地塞米松干預(yù)組（D1組）、大劑量地塞米松干預(yù)組（D2組）均阻斷左肺門1h后，給予再灌注2h。D1和D2組在再灌注前5分鐘經(jīng)尾靜脈或陰莖背靜脈分別注入地塞米松1mg/kg、5mg/kg。各實(shí)驗(yàn)組模型制備完成后放血處死大鼠，左肺上部用4%多聚甲醛固定作病理檢查，下部放入液氮保存
7、作western-blot檢測。1.3檢測觀察方法（1）Westernblot： 取肺組織提取液蛋白50μg，用12%SDS-PAGE凝膠電泳分離,將電泳條帶轉(zhuǎn)移至醋酸纖維膜上，1∶500稀釋一抗iNOS（購自武漢博士德公司，產(chǎn)品批號：BA-0362）。二抗為辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記抗體（購自武漢博士德公司，產(chǎn)品批號：BA1054）。用ECL顯色曝光，將膠片曝光結(jié)果掃描到計(jì)算機(jī)，用QuantityOne軟件進(jìn)行條帶灰度值分析。每次結(jié)果以對照組灰度值為參考，其他組條帶灰度與對照組之比為其相對值；（2）HE染
8、色：固定、取材、梯度脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、脫蠟、復(fù)水、HE染色，觀察肺組織學(xué)結(jié)構(gòu)改變。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)采用Stata8.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理，計(jì)量資料以x±s表示，采用方差分析，兩兩比較用q檢驗(yàn)。等級資料采用參照單位分析（Radit分析），P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2．1病理學(xué)改變采用Egan肺組織學(xué)評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷。Egan肺組織學(xué)評分標(biāo)準(zhǔn):正常,無損害;輕度:點(diǎn)
