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1、滲漉法提取丹參脂溶性部位的工藝研究【摘要】 目的探討丹參飲片中采用滲漉法提取脂溶性部位的最佳工藝條件。方法以丹參酮ⅡA和隱丹參酮的含量為指標(biāo)，采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行提取工藝全面優(yōu)選，并用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法測(cè)定其含量。結(jié)果最佳乙醇滲漉工藝為：藥材粉碎至綠豆粒大，用15倍量95%乙醇冷浸24h后，滲漉速度3ml/min。結(jié)論采用滲漉法提取丹參中脂溶性部位，操作簡(jiǎn)便，方法可行，降低了生產(chǎn)成本，提高了藥材利用率，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值?！娟P(guān)鍵詞】丹參；正交實(shí)驗(yàn)；丹參酮ⅡA；隱丹參酮 Abstract：ObjectiveTostudythebestextra
2、ctionmethodoftheliposolubilityactiveprinciplesofRhizomaSalviaeMiltiorrhizae.MethodsTheextractionprocessinedbyRP-HPLCasindex．ResultsThebestextractionconditionofliposolubilitypartes95%alcohol,after24hourscold-soaking,percolatEingl/min.ConclusionTheextractionmethodforRhizomaSalviaeMiltiorrhizaec
3、ansavetimeandenergyandbesuitableforthemodernproduction． Keyiltiorrhiza;Orthogonaldesign;TanshinoneⅡA;Cryptotanshinone 丹參為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根莖。味苦，微寒，歸心、肝經(jīng)，具有祛淤止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效，用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、癥瘕積聚、胸腹刺痛、瘡瘍腫痛、心煩不眠、肝脾腫大、心絞痛等病癥?！ 〉⑺苄猿煞种饕械⑺匾约暗⒎铀犷?，對(duì)這一部分的研究較多。丹參的脂溶性成分主要為丹參酮類化合物，主要成分
4、有丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、隱丹參酮、二氫丹參酮等，具有天然抗氧化活性、天然心血管藥理作用以及抗菌消炎作用，還具有明顯的抗腫瘤作用?！ ?器材 Aglient1100系列液相色譜儀（美國(guó)惠普公司）；丹參酮、隱丹參酮對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；丹參飲片（南京本草藥店），經(jīng)自我鑒定為丹參SalviamiltiorrhizaBge.的根?！ ?方法與結(jié)果 2.1丹參提取脂溶性成分指標(biāo)的建立 2.1.1干膏率測(cè)定參照2005年版《中國(guó)藥典》附錄XA浸出物測(cè)定法，精密量取相當(dāng)于丹參5g的藥液，置于已干燥恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，移于干燥器中冷卻30min，
5、迅速精密稱定重量，計(jì)算干膏收率，干膏收率（%）=干膏重量/丹參重量×100%。 2.1.2丹參酮ⅡA、隱丹參酮的含量測(cè)定預(yù)試發(fā)現(xiàn)，由于丹參中丹酚酸類成分在波長(zhǎng)268nm處有著較強(qiáng)的紫外吸收，在進(jìn)行提取工藝考察時(shí)，許多工藝在脂溶性成分被提出時(shí)，水溶性成分同時(shí)被提出，從而使UV法測(cè)定總丹參酮含量的方法在提取工藝考察過程中很不精確，故通過使用HPLC測(cè)定丹參酮ⅡA以及隱丹參酮的含量，對(duì)丹參脂溶性部位的提取工藝進(jìn)行評(píng)價(jià)?！ ∩V條件：色譜柱為ScienhomeKromasilC18(150mm×4.6mm)及預(yù)柱，流動(dòng)相為甲醇-水(75∶25)，檢測(cè)波長(zhǎng)270nm，柱溫30℃，流速0.
6、8ml/min，理論板數(shù)以丹參酮ⅡA，隱丹參酮計(jì)均不低于2000。圖譜見圖1～2。 圖1隱丹參酮、丹參酮ⅡA的色譜圖（略） 圖2樣品色譜圖（略） 丹參酮ⅡA儲(chǔ)備液的制備：精密稱取用五氧化二磷干燥5h的丹參酮ⅡA對(duì)照品4.82mg置50ml棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻?！ ‰[丹參酮儲(chǔ)備液的制備：精密稱取用五氧化二磷干燥5h的隱丹參酮對(duì)照品4.83mg置25ml棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻?！ 』旌蠘?biāo)準(zhǔn)品溶液的配制：精密量取2ml丹參酮ⅡA儲(chǔ)備液和1ml隱丹參酮儲(chǔ)備液置5ml棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得，最終濃度為丹參酮ⅡA38.56μg/ml，隱
7、丹參酮38.64μg/ml?！ ?biāo)準(zhǔn)曲線繪制：精密吸取上述混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液2,6,10,15，20μl依次進(jìn)樣，在上述色譜條件下測(cè)定，記錄色譜圖、峰面積值，并以峰面積Y對(duì)進(jìn)樣量X(μg)回歸，結(jié)果可見：丹參酮ⅡA標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=7083.3X-17.59(R=0.9999)，線性范圍為0.07712～0.7712μg?！ ‰[丹參酮標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=6356.5X-11.28(R=1)，線性范圍為0.07728～0.7728μg。 精密度實(shí)驗(yàn)：取混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別進(jìn)樣10μl5次，測(cè)得峰面
