尖銳濕疣患者外周血t淋巴細胞亞群與局部細胞 免疫功能的相關(guān)性研究

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1、尖銳濕疣患者外周血T淋巴細胞亞群與局部細胞免疫功能的相關(guān)性研究【關(guān)鍵詞】尖銳濕疣；T細胞亞群；流式細胞儀；免疫組織化學［摘要］目的研究尖銳濕疣（condylomaacuminatum,CA）患者外周血T細胞亞群（CD4+、CD8+）及皮損局部T細胞亞群（CD4+、CD8+）的變化及二者的相關(guān)性。方法應(yīng)用流式細胞儀檢測42例CA患者及30例正常對照者外周血T細胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）的百分比；同時用免疫組織化學S-P法對尖銳濕疣患者皮損的表、真皮T細胞亞群進行測定。結(jié)果CA組外周血CD4+T細胞表達率（25.21±5.

2、77）%明顯低于正常對照組（35.05±3.06）%，CD8+T細胞表達率（39.34±7.46）%，顯著高于正常對照組（26.39±2.32）%，二者均具有非常顯著性差異（P＜0.01），CD4+/CD8+比值患者組（0.67±0.26）顯著低于正常對照組（1.35±0.19）（P＜0.01）；且CA組真皮每高倍視野中CD4+T細胞表達（185.39±31.69）明顯高于正常對照組CD4+T細胞（60.64±9.11）（P＜0.01），CA組CD8+T細胞表達（228.86±33.26）顯著高于正常對照組（35.59±6.17）（P＜0.

3、01），CA組CD4+/CD8+的比值（0.81±0.10）顯著低于正常對照組（1.73±0.25）（P＜0.01）；經(jīng)統(tǒng)計學分析CA患者外周血CD4+T細胞、CD8+T細胞的變化與皮損局部的CD4+T細胞、CD8+T細胞的變化尚不能認為有相關(guān)性（P＞0.05）。結(jié)論CA患者存在細胞免疫功能降低，CA的發(fā)病（包括亞臨床感染、潛伏感染）、復發(fā)及再感染與機體的細胞免疫功能密切相關(guān)，從而為CA的治療提供理論依據(jù)。［關(guān)鍵詞］尖銳濕疣；T細胞亞群；流式細胞儀；免疫組織化學PeripheralTcellsubsetandlocalcytoimmunef

4、unctionincondylomaacuminatum［Abstract］ObjectiveTostudythechangesofTcellsubset（CD4+,CD8+）inbothperipheralbloodandpartiallesionsinpatientsaacuminatum（CA）,andtherelationship.MethodsTodescribethelevelsofCD4+Tcell,CD8+TcellandCD4+/CD8+in42patientsalcontrolsbyfloetry;tocountthen

5、umbersofTcellsubsetinpartiallesionsediatedimmunodeficiencyexistsinpatientsediatedimmunity,aacuminatum；Tcellsubset；floetry；immunohistochemistry尖銳濕疣（condylomaacuminatum，CA）又稱尖圭濕疣、生殖器疣（genitall至抗凝管中；2％利多卡因注射液局麻手術(shù)切除0.5cm大小皮損。1.2.2試劑外周血CD4+T細胞,CD8+T細胞抗體（CD4+FITC/CD8+PE）購自法國IMMU

6、NOTECH公司。免疫組化CD4+T細胞,CD8+T細胞抗體購自福建邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。CD4+T細胞抗體為鼠抗人單克隆抗體（編號MAB－0251），工作濃度1∶20，CD8+T細胞抗體為鼠抗人單克隆抗體（編號MAB－0021），為工作即用型。SP試劑盒為福建邁新公司產(chǎn)品。1.2.3流式細胞儀分析采用美國COULTER公司生產(chǎn)的流式細胞儀。1.2.4免疫組化福爾馬林浸泡組織，常規(guī)石蠟包埋組織，切片厚5μm。石蠟脫水3％雙氧水室溫孵育10min以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。蒸餾水洗滌5min。PBS液洗滌3遍。CD4+T細胞用EDTA進行抗

7、原修復，CD8+T細胞用枸櫞酸熱修復。血清封閉20min。傾去血清，分別加一抗，4℃過夜。室溫放置30min。PBS沖洗，5min×3次。滴加二抗，37℃孵育30min。PBS沖洗，5min×3次。滴加三抗，37℃孵育30min。PBS沖洗，5min×3次。DAB顯色。自來水充分沖洗，復染，封片。1.2.5統(tǒng)計學方法應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行分析。兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗，兩組指標間做相關(guān)分析。1.3結(jié)果判定流式細胞：計數(shù)每1萬個細胞中標記細胞的百分比。免疫組化：以細胞膜出現(xiàn)棕黃色染色為陽性細胞。獨立觀察每張切片5個具有代表性的高表達

8、視野，分別計數(shù)每個高倍鏡視野下陽性細胞的數(shù)量，計算均數(shù)和標準差。2結(jié)果2.1外周血CD4+T細胞、CD8+T細胞的表達見表1。表1外周血T淋巴細胞亞群檢測結(jié)果注：各組兩兩比較，*