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1、苧麻葉中總酚酸提取工藝的正交設(shè)計(jì)優(yōu)化作者:周媛,鄒坤,汪鋆植,朱靜靖,彭元麗,劉闖【摘要】 目的研究苧麻葉中總酚酸提取工藝。方法設(shè)計(jì)不同的工藝路線,在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上采用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化,采用改進(jìn)的Folin-Ciocalteu比色法測(cè)定總酚酸含量,檢測(cè)波長(zhǎng)為755nm。結(jié)果適宜的總酚酸提取工藝為用12倍量80%濃度乙醇,70℃提取3次,2h/次,水稀釋體積為700ml,堿化pH值為10。測(cè)得苧麻葉80%乙醇提取物中總酚酸粗膏得率為19.9%,總酚酸含量為0.214%。結(jié)論該工藝步驟簡(jiǎn)單,成本較低,提取率高,適合于苧麻葉中總酚
2、酸的工業(yè)化提取?!娟P(guān)鍵詞】苧麻總酚酸正交實(shí)驗(yàn)提取工藝 Abstract:ObjectiveTodesigndifferentextractionandseparationtechnologyoftotalpolyphenolinBoehmerianivea(Linn.)Gaudich..MethodsTheorthogonaltestmethodplesinedbyspectrophotometer,thedetection.ResultsTheoptimumextractionconditionsese2h,12time
3、sthevolumeofthealcoholat70℃,thevolume700mlerianivea;Totalpolyphenol;Orthogonaltest;Extractiontechnology苧麻葉系蕁麻科(Urticaceae)植物苧麻Boehmerianivea(Linn.)Gaudich.的干燥葉。苧麻為多年生宿根性草本植物,又名家苧麻、白麻、圓麻。其根具有清熱、止血、解毒散瘀功效[1]。我國(guó)的苧麻產(chǎn)量約占全世界苧麻產(chǎn)量的90%以上,其莖皮主要作為優(yōu)良的紡織原料。僅以2005年為例,我國(guó)苧麻紡織工業(yè)苧麻耗
4、量為177250t,出口創(chuàng)匯15597萬(wàn)美元[2]。苧麻葉作為苧麻紡織工業(yè)的廢棄物資源極其豐富,苧麻葉片約占植株重量的40%左右[3]。多年來(lái),苧麻根已成為臨床常用止血藥,而對(duì)苧麻葉的研究尚不深入,但根據(jù)已有研究資料表明,葉中含有與根相同的成分綠原酸,此外還含有原兒茶酸、野漆樹(shù)苷、蕓香苷等酚酸類等抗氧化活性物質(zhì)[4~7],因此有望作為根的代用品,并在抗衰老等方面有進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)和利用的價(jià)值[8]。本實(shí)驗(yàn)以苧麻葉為原料,選擇了不同的工藝方法提取苧麻葉中的總酚酸,并通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件,以Folin-Ciocaileu比色法測(cè)
5、定總酚酸粗浸膏中的總酚酸含量,為苧麻葉的開(kāi)發(fā)利用提供研究基礎(chǔ)?! ?儀器與材料 1.1儀器N1001EYELA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛(ài)朗儀器有限公司),大容量離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠),S3100紫外分光光度計(jì)(韓國(guó)Scinco公司),BP211D型十萬(wàn)分之一電子天平(德國(guó)Sartorius公司)?! ?.2材料與試劑苧麻葉,采自湖北省咸寧地區(qū),曬干,粉碎至5mm以下的碎片,置50℃干燥箱中干燥12h,密封,備用。沒(méi)食子酸對(duì)照品:基準(zhǔn)純,購(gòu)于上海分析試劑廠,置50℃真空干燥箱真空中干燥4h。乙醇為工業(yè)級(jí),其他試劑均為分析純?! ?/p>
6、2方法 2.1Folin-Ciocalteu比色法測(cè)定總酚酸含量 2.1.1Folin-Ciocalteu試劑配制稱取8g鎢酸鈉和2g鉬酸鈉于圓底燒瓶中,用56ml蒸餾水溶解,加入4ml85%的磷酸溶液和8ml濃鹽酸,文火回流10h,然后加入1.2g硫酸鋰及6ml雙氧水,加熱沸騰15min至亮黃色,不得帶微藍(lán)和綠色。冷卻,移入100ml容量瓶中,定容,貯于棕色瓶中,4℃冰箱保存?! ?.1.2對(duì)照品溶液制備準(zhǔn)確稱取10.00mg干燥的沒(méi)食子酸,加蒸餾水適量,超聲溶解,放冷,以蒸餾水定容至100ml,制成每毫升含0.1mg
7、沒(méi)食子酸的溶液,作為對(duì)照品溶液。 2.1.3待測(cè)溶液制備提取工藝Ⅰ待測(cè)溶液制備:將全部總酚酸浸膏用70%的乙醇溶解,定容至100ml,低溫避光保存,測(cè)定時(shí)再稀釋至適宜濃度。提取工藝Ⅱ待測(cè)溶液制備:精密稱取一定量總酚酸干浸膏(約20mg),用70%濃度乙醇溶解,定容至10ml,低溫避光保存,測(cè)定時(shí)再稀釋至適宜濃度?! ?.1.4總酚酸含量測(cè)定準(zhǔn)確量取0.5ml待測(cè)溶液置10ml干燥具塞比色管中,加6ml水,0.5ml福林試劑,充分搖勻,加入0.75ml20%碳酸鈉溶液,混勻,以蒸餾水稀釋至刻度。40℃水浴40min。同時(shí)制作
8、空白管。為消除供試品溶液本身顏色的干擾,同時(shí)制作不加顯色劑的對(duì)照管。于755nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值?! ?.1.5工作曲線繪制準(zhǔn)確量取對(duì)照品溶液0.00,0.10,0.20,0.30,0.40,0.50,0.60,0.70,0.80ml于10ml干燥具塞比色管中,照總酚酸含量測(cè)定項(xiàng)下操作,