染料木黃酮對帕金森病模型小鼠多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用

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1、染料木黃酮對帕金森病模型小鼠多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用：楊延?xùn)|高全桂陳文芳【摘要】　　目的探討染料木黃酮對1甲基4苯基1,2,3,6四氫吡啶（MPTP）制備的帕金森病（PD）模型小鼠多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用。方法將C57BL6雄性小鼠隨機(jī)分為正常對照組、MPTP模型組及染料木黃酮預(yù)處理組。用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RTPCR）技術(shù)檢測黑質(zhì)酪氨酸羥化酶（TH）及多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT)基因的表達(dá)水平。應(yīng)用高效液相色譜法檢測紋狀體（Str）內(nèi)DA及其代謝物二羥基苯乙酸（DOPAC）含量。結(jié)果MPTP模型組黑質(zhì)TH和DAT基因的表達(dá)較正常對照組明顯降低，染料木黃酮預(yù)處理組可

2、逆轉(zhuǎn)上述改變（F=20.31、13.19,P<0.01)。MPTP模型組Str內(nèi)DA及其代謝產(chǎn)物DOPAC的含量較對照組明顯減少，應(yīng)用染料木黃酮后可逆轉(zhuǎn)上述改變(F=63.58、16.12,P<0.01)。結(jié)論染料木黃酮對MPTP制備的PD模型小鼠黑質(zhì)紋狀體DA能神經(jīng)元有明顯的保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】帕金森病染料木黃酮1甲基4苯基1236四氫吡啶黑質(zhì)紋狀體　　［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectofgenisteinondoparminergicneurons.MethodsC57BL6micelydi

3、videdintothreegroups:controlgroup(DMSO,ip),MPTPgroup(15mg/kg,ip)andgenisteinpretreatment(10mg/kg,ip)group.Thechangesoftyrosinehydroxylase(TH)anddopaminetransport(DAT)geneexpressioninsubstantianigra(SN)erasechainreaction(RTPCR).ThecontentsofDAanditsmetabolitesdihydroxyphenylaceticacid(DOP

4、AC)inedbyhighperformanceliquidchromatographyelectricalchemicaldetection(HPLCECD).ResultsGenisteinpretreatmentcouldpreventtheMPTPinduceddecreaseofTHandDATgeneexpression(F=20.31,13.19;P<0.01).MPTPsignificantlydecreasedthelevelsofdopamine(DA)anditsmetabolitesdihydroxyphenylaceticacid(DOP

5、AC)inthestriatum,ent(F=63.58,16.12;P<0.01).ConclusionGenisteinhasneuroprotectiveeffectsondopaminergicneuronsagainstMPTPinducedmousemodelofPD.　?。跭EYPTP）建立PD模型小鼠，研究染料木黃酮對黑質(zhì)酪氨酸羥化酶（TH）和多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(DAT)基因表達(dá)以及紋狀體DA及其代謝產(chǎn)物含量的影響，以期為PD的防治提供進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下?！　?材料與方法　　1.1實(shí)驗(yàn)動物和藥品　　選用健康雄性C57BL6小鼠18只，體質(zhì)量為

6、(20±2)g,由北京維通利華動物實(shí)驗(yàn)中心提供，合格證號：SCXK（京）20020003。置于（19.0±2.0）℃室溫下，以12h12h晝夜循環(huán)光照，自由進(jìn)食、飲水。動物于實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境1周。染料木黃酮為上海同田生化技術(shù)有限公司產(chǎn)品；MPTP、DA和DOPAC均為Sigma公司產(chǎn)品；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒為PROMEGA公司產(chǎn)品；TagDNA聚合酶為TAKARA公司產(chǎn)品?！　?.2實(shí)驗(yàn)動物造模與給藥　　實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為正常對照組、MPTP模型組和染料木黃酮預(yù)處理組，每組6只。3組動物每天8：00時先行腹腔注射二甲基亞砜（DMSO)或染料木黃酮(10mg/kg)，連續(xù)3d；M

7、PTP模型組于第4天注射DMSO后2h開始腹腔注射MPTP(15mg/kg)，連續(xù)注射4次，每次間隔2h，自第5天開始繼續(xù)腹腔注射DMSO，連續(xù)4d；染料木黃酮預(yù)處理組于第4天注射染料木黃酮后2h開始腹腔注射MPTP(15mg/kg)，連續(xù)注射4次，每次間隔2h，自第5天開始繼續(xù)腹腔注射染料木黃酮，連續(xù)4d?！　?.3RTPCR檢測　　末次注射24h后斷頭取腦，快速取雙側(cè)SN，加TRIzol試劑提取總RNA?？俁NA經(jīng)紫外線分光光度計定量后,參照試劑盒說明書建立20μLRT反應(yīng)體系：取3μg總RNA加