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《人皮下脂肪來源脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com第Aca二dJ軍Sec醫(yī)MiIM學(xué)ed學(xué)Un報iv2。。7A(8)·813·ug；28·論著·人皮下脂肪來源脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定張迅軼，仵敏娟，劉厚奇(第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部組織胚胎學(xué)教研室，發(fā)育生物學(xué)研究所，上海200433)[摘要]目的：建立從切除得到的人皮下脂肪組織分離及培養(yǎng)脂肪干細(xì)胞(ADSC)的方法。方法：以人皮下脂肪組織為材料來源，分離、培養(yǎng)、擴增ADSC，并應(yīng)用針對相對特異性分子的免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)及多向誘導(dǎo)分化等方法鑒定干細(xì)胞特性。結(jié)果：本實驗培養(yǎng)的ADSC具有干
2、細(xì)胞生長特性并表達相對特異分子，有多向分化的潛能，并且具有遺傳穩(wěn)定性。結(jié)論：從切取的人皮下脂肪組織可成功分離得到ADSC，為組織工程提供了新的來源豐富、提取方便的種子細(xì)胞。[關(guān)鍵詞]脂肪組織；間質(zhì)干細(xì)胞；細(xì)胞分離；組織工程[中圖分類號]R329．21[文獻標(biāo)識碼]A[文章編號]0258—879X(2007)08—0813一O4Isolation，cultureandidentificationofadiposederivedstemcellsfromhumansubcutaneousadiposetissuesZHANGXun—y
3、i．wUMin—juan，LIUHou—qi(DepartmentofHistologyandEmbryology，InstituteofDevelopmentalBiology，CollegeofBasicMedicalSciences，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200433，China)[ABsTRAcT]Objective：Toestablishamethodforisolatingadiposederivedstemcells(ADSCs)fromresectedhum
4、ansubcutaneousadiposetissues．Methods：ADSCswereisolated，cultured，andexpandedfromhumansubcutaneousadiposetissues．Immuno—fluorescentstainingofspecificmolecules，F(xiàn)ACSandmulti—lineagedifferentiationinductionwereusedtocharacterizetheobtainedADSCs．Results：ADSCsobtainedinthiss
5、tudyhadthecharacteristicsofstemcellsandexpressedspecificmolecules；theyalsopossessedamulti—lineagedifferentiationpotential，whichwasgeneticallystable．Conclusion：ADSCscanbeisolatedfromhumansubcutaneousadiposetissues，whichprovidesanovelandabundantseedingcellsfortissueengi
6、neering．[KEYWORDS~adiposetissue；mesenchymalstemcells；cellseparation；tissueengineering[AcadJSecMi1MedUniv，2007，28(8)：813-8162脂肪干細(xì)胞(adiposederivedstemcell，ADSC)例患者符合上述條件，其中男2例，女5例，年齡是一種存在于脂肪組織中的間充質(zhì)干細(xì)胞，在皮下32～62歲，體質(zhì)指數(shù)(BMI)為22．3～25．1，患子宮肌白色脂肪組織中約占細(xì)胞總量的10～20，其具瘤5例，膽囊結(jié)石1例，慢性
7、膽囊炎1例。術(shù)前均征有一般干細(xì)胞的特點，在鑒定、分離、擴增和分化的得患者本人同意，填寫知情同意書，于手術(shù)時無菌采方法上也與一般成體干細(xì)胞類似。Zuk等在抽脂集皮下脂肪組織約5cm。。術(shù)組織中成功分離培養(yǎng)ADSC，并誘導(dǎo)分化成脂肪、1．2細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境、培養(yǎng)液及培養(yǎng)用材料細(xì)胞培成軟骨、成骨、成神經(jīng)細(xì)胞，最近更有人將其定向誘養(yǎng)于含10胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液置于5導(dǎo)成為心肌細(xì)胞_2]。然而吸脂術(shù)對皮下脂肪有加熱CO孵箱，胎牛血清、DMEM、磷酸鹽緩沖液(PBS)、液化的操作過程，給細(xì)胞的存活和培養(yǎng)帶來不利影胰酶、膠原酶I、DMSO等試劑
8、均購自美國Gibco公響。本課題組取得開腹手術(shù)時切除、分離得到的皮司，各種培養(yǎng)皿購自美國Falcon公司。細(xì)胞培養(yǎng)各下脂肪進行干細(xì)胞的提取培養(yǎng)實驗，現(xiàn)報告如下。步驟嚴(yán)格無菌操作。1．3ADSC原代培養(yǎng)、傳代、凍存及復(fù)蘇脂肪組織1材料和方法剪成0．3
