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1、秦巴山區(qū)馬兜鈴科兩種常用藥材中馬兜鈴酸含量分析論文【摘要】目的分析測定秦巴山區(qū)產(chǎn)細辛AristolochiasieboldiiMiq.和漢中防己A.heterophyllaHemsl.兩種藥材中馬兜鈴酸A的含量。方法色譜柱：AgilentODS(5μm,4.6mm×250mm);流動相：甲醇-乙腈-1%冰乙酸（47∶17∶36）;流速1.0ml/min；柱溫∶室溫；檢測波長315nm。結(jié)果細辛中馬兜鈴酸A的平均含量為74.1μg/g，漢中防己中馬兜鈴酸A的平均含量為2.14mg/g。結(jié)論漢中防己中的馬兜鈴酸A含量是細辛中馬兜鈴酸A含量的
2、30倍左右。【關(guān)鍵詞】細辛漢中防己馬兜鈴酸A高效液相色譜法細辛為馬兜鈴科植物北細辛AsarumheterotropoidesFr.Schmidtvar.mandshuricum（Maxim.）Kitag.，華細辛A.sieboldiiMiq.的干燥全草，主要分布于遼寧、吉林、黑龍江、陜西、山東等省。臨床上用于祛風散寒，通竅止痛，溫肺化飲［1］。漢中防己為馬兜鈴科馬兜鈴屬異葉馬兜鈴AristolochiaheterophyllaHemsl.的干燥根，生于山坡灌叢中，主產(chǎn)于陜西。原植物為纏繞藤本.freel，根圓柱形，長8～15cm，直徑2
3、～5cm，有香氣，外皮黃棕色或灰褐色。性寒，味苦，能祛風，利濕，鎮(zhèn)痛，用于水腫、小便不利、風濕痹痛等癥。近年來，馬兜鈴科植物體含有的馬兜鈴酸引起腎臟損害的臨床報道和毒理研究受到廣泛重視，許多研究報告對一些常用的含馬兜鈴酸藥材進行了分析［2～7］，為這些藥材的臨床使用提供科學依據(jù)。由于植物體內(nèi)的化學成分含量與生長環(huán)境有密切的關(guān)系，不同產(chǎn)地的同一種藥材化學成分存在一定的差異，在現(xiàn)有的報道中，不同產(chǎn)地的細辛所含馬兜鈴酸A的量差異也較大［8～15］。秦巴山區(qū)有豐富的藥用植物資源，但含馬兜鈴酸藥材的分析研究還較少。本文選用產(chǎn)于秦巴山區(qū)的兩種含馬兜
4、鈴酸的常用藥材細辛和漢中防己，分析其藥用部位馬兜鈴酸的含量，為藥用資源的開發(fā)利用以及常用藥材的安全使用提供科學依據(jù)。1儀器與材料1.1儀器紫外分光光度計（TU-1221），高效液相色譜儀（Agilent1200）,微型植物試樣粉碎機（FZ102），電子天平，索氏提取儀，三用電熱恒溫水箱。1.2材料本實驗所用實驗材料華細辛（原植物為華細辛A.sieboldiiMiq.全草）和漢中防己（原植物為異葉馬兜鈴A.heterophyllaHemsl.干燥根）產(chǎn)自陜西漢中，均由陜西省漢中市藥品檢驗所提供。1.3試劑馬兜鈴酸A對照品購自中國藥品生物制
5、品鑒定所（批號：110746-200406）；乙腈為色譜純，甲醇，分析純，西安化學試劑廠；乙醚，分析純，天津市化學試劑六廠；水為純化水；3.6%硫酸溶液；0.5%氫氧化鈉溶液。2方法與結(jié)果2.1色譜條件高效液相色譜儀（Agilent1200）；色譜柱：AgilentODS（5μm,.freelm×250mm,Agilent）；流動相：甲醇-乙腈-1%冰乙酸（47∶17∶36）；流速1.0ml/min；柱溫：室溫；檢測波長315nm。進樣量：20μl，保留時間：12min。2.2實驗材料準備用微型植物試樣粉碎機分別粉碎細辛和漢中防己兩種藥
6、材，按照《中國藥典》操作，藥材粉末過40目篩，盛于潔凈干燥的廣口瓶中備用。2.3對照品溶液的制備用電子天平精密稱取馬兜鈴酸A標準品7.5mg，用甲醇定容至25ml的容量瓶中（C=0.3mg/ml）。搖勻，再精密吸取0.5ml置于10ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，使其成為15μg/ml的溶液，放于4℃冰箱儲存?zhèn)溆谩?.4供試品溶液的制備用電子天平精密稱取漢中防己藥材粉末1g，置于150ml索氏提取儀中，加入適量的甲醇，加熱回流5h。將提取液回收至干，用15ml0.5%NaOH溶液，使其完全溶解，轉(zhuǎn)至分液漏斗中，調(diào)pH=10，用乙醚
7、萃取兩次，15ml/次。萃取后的堿液，用3.6%的硫酸溶液調(diào)pH=2，再用乙醚萃取4次，15ml/次，合并萃取液，水浴蒸干，用甲醇定容于150ml容量瓶中備用。用電子天平精密取細辛藥材粉末5g，置于150ml索氏提取儀中，用上述方法進行提取，純化后用甲醇定容至50ml容量瓶中備用。2.5檢測波長的測定取馬兜鈴酸A標準品儲備液，在200～400nm波長范圍內(nèi)掃描，在390，315nm處有最大吸收峰。高效液相色譜實驗結(jié)果表明，在315nm處干擾弱，靈敏度高，因此選擇315nm作為檢測波長。2.6線性關(guān)系的考察分別吸取濃度為15μg/ml的馬
8、兜鈴酸A標準品溶液5，10，15，20，25μl進入高效液相色譜儀中進行分析。以進樣量為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得標準曲線回歸方程為Y=28.804X-1.12，相關(guān)系數(shù)r=0.999958
