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1、秦巴山區(qū)馬兜鈴科兩種常用藥材中馬兜鈴酸含量分析論文【摘要】目的分析測(cè)定秦巴山區(qū)產(chǎn)細(xì)辛AristolochiasieboldiiMiq.和漢中防己A.heterophyllaHemsl.兩種藥材中馬兜鈴酸A的含量。方法色譜柱：AgilentODS(5μm,4.6mm×250mm);流動(dòng)相：甲醇-乙腈-1%冰乙酸（47∶17∶36）;流速1.0ml/min；柱溫∶室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)315nm。結(jié)果細(xì)辛中馬兜鈴酸A的平均含量為74.1μg/g，漢中防己中馬兜鈴酸A的平均含量為2.14mg/g。結(jié)論漢中防己中的馬兜鈴酸A含量是細(xì)辛中馬兜鈴酸A含量的
2、30倍左右?！娟P(guān)鍵詞】細(xì)辛漢中防己馬兜鈴酸A高效液相色譜法細(xì)辛為馬兜鈴科植物北細(xì)辛AsarumheterotropoidesFr.Schmidtvar.mandshuricum（Maxim.）Kitag.，華細(xì)辛A.sieboldiiMiq.的干燥全草，主要分布于遼寧、吉林、黑龍江、陜西、山東等省。臨床上用于祛風(fēng)散寒，通竅止痛，溫肺化飲［1］。漢中防己為馬兜鈴科馬兜鈴屬異葉馬兜鈴AristolochiaheterophyllaHemsl.的干燥根，生于山坡灌叢中，主產(chǎn)于陜西。原植物為纏繞藤本.freel，根圓柱形，長(zhǎng)8～15cm，直徑2
3、～5cm，有香氣，外皮黃棕色或灰褐色。性寒，味苦，能祛風(fēng)，利濕，鎮(zhèn)痛，用于水腫、小便不利、風(fēng)濕痹痛等癥。近年來(lái)，馬兜鈴科植物體含有的馬兜鈴酸引起腎臟損害的臨床報(bào)道和毒理研究受到廣泛重視，許多研究報(bào)告對(duì)一些常用的含馬兜鈴酸藥材進(jìn)行了分析［2～7］，為這些藥材的臨床使用提供科學(xué)依據(jù)。由于植物體內(nèi)的化學(xué)成分含量與生長(zhǎng)環(huán)境有密切的關(guān)系，不同產(chǎn)地的同一種藥材化學(xué)成分存在一定的差異，在現(xiàn)有的報(bào)道中，不同產(chǎn)地的細(xì)辛所含馬兜鈴酸A的量差異也較大［8～15］。秦巴山區(qū)有豐富的藥用植物資源，但含馬兜鈴酸藥材的分析研究還較少。本文選用產(chǎn)于秦巴山區(qū)的兩種含馬兜
4、鈴酸的常用藥材細(xì)辛和漢中防己，分析其藥用部位馬兜鈴酸的含量，為藥用資源的開(kāi)發(fā)利用以及常用藥材的安全使用提供科學(xué)依據(jù)。1儀器與材料1.1儀器紫外分光光度計(jì)（TU-1221），高效液相色譜儀（Agilent1200）,微型植物試樣粉碎機(jī)（FZ102），電子天平，索氏提取儀，三用電熱恒溫水箱。1.2材料本實(shí)驗(yàn)所用實(shí)驗(yàn)材料華細(xì)辛（原植物為華細(xì)辛A.sieboldiiMiq.全草）和漢中防己（原植物為異葉馬兜鈴A.heterophyllaHemsl.干燥根）產(chǎn)自陜西漢中，均由陜西省漢中市藥品檢驗(yàn)所提供。1.3試劑馬兜鈴酸A對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制
5、品鑒定所（批號(hào)：110746-200406）；乙腈為色譜純，甲醇，分析純，西安化學(xué)試劑廠；乙醚，分析純，天津市化學(xué)試劑六廠；水為純化水；3.6%硫酸溶液；0.5%氫氧化鈉溶液。2方法與結(jié)果2.1色譜條件高效液相色譜儀（Agilent1200）；色譜柱：AgilentODS（5μm,.freelm×250mm,Agilent）；流動(dòng)相：甲醇-乙腈-1%冰乙酸（47∶17∶36）；流速1.0ml/min；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)315nm。進(jìn)樣量：20μl，保留時(shí)間：12min。2.2實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備用微型植物試樣粉碎機(jī)分別粉碎細(xì)辛和漢中防己兩種藥
6、材，按照《中國(guó)藥典》操作，藥材粉末過(guò)40目篩，盛于潔凈干燥的廣口瓶中備用。2.3對(duì)照品溶液的制備用電子天平精密稱(chēng)取馬兜鈴酸A標(biāo)準(zhǔn)品7.5mg，用甲醇定容至25ml的容量瓶中（C=0.3mg/ml）。搖勻，再精密吸取0.5ml置于10ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，使其成為15μg/ml的溶液，放于4℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?.4供試品溶液的制備用電子天平精密稱(chēng)取漢中防己藥材粉末1g，置于150ml索氏提取儀中，加入適量的甲醇，加熱回流5h。將提取液回收至干，用15ml0.5%NaOH溶液，使其完全溶解，轉(zhuǎn)至分液漏斗中，調(diào)pH=10，用乙醚
7、萃取兩次，15ml/次。萃取后的堿液，用3.6%的硫酸溶液調(diào)pH=2，再用乙醚萃取4次，15ml/次，合并萃取液，水浴蒸干，用甲醇定容于150ml容量瓶中備用。用電子天平精密取細(xì)辛藥材粉末5g，置于150ml索氏提取儀中，用上述方法進(jìn)行提取，純化后用甲醇定容至50ml容量瓶中備用。2.5檢測(cè)波長(zhǎng)的測(cè)定取馬兜鈴酸A標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，在200～400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，在390，315nm處有最大吸收峰。高效液相色譜實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在315nm處干擾弱，靈敏度高，因此選擇315nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。2.6線性關(guān)系的考察分別吸取濃度為15μg/ml的馬
8、兜鈴酸A標(biāo)準(zhǔn)品溶液5，10，15，20，25μl進(jìn)入高效液相色譜儀中進(jìn)行分析。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=28.804X-1.12，相關(guān)系數(shù)r=0.999958
